DB13河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：師校欣、杜國強(qiáng)、高儀、王莉、楊麗麗、王燕霞、劉婉君、李寶1植物組織培養(yǎng)室組建及操作技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物組織培養(yǎng)研究實(shí)驗(yàn)室及組培快繁育苗工廠組建及常下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注植物組織培養(yǎng)室（或組培工廠）選址應(yīng)環(huán)境清潔，遠(yuǎn)離微粒和煙霧等污染源，水電供應(yīng)植物組織培養(yǎng)室（或組培工廠）應(yīng)包括培養(yǎng)基制備室、洗滌室、滅菌室、接種室、培養(yǎng)和資源狀況確定。應(yīng)配置合理，工作方便，使用安全，節(jié)省能源。各部分比例大小和設(shè)備規(guī)應(yīng)有適宜的空間和配套的工作臺，便于多人同時操作。配備冰箱、電子分析天平、電子秤移液管、移液管架、微量移液器、玻璃棒、記號筆、封口材料（棉塞、牛皮紙、組培專用透氣或組培專用透氣瓶蓋）、棉線繩、pH試紙、周轉(zhuǎn)筐、蒸餾水桶、小推車等用品和用具；配備器械2應(yīng)配備合理專用輸電線路，施工規(guī)范；配置空調(diào)、換氣扇等通風(fēng)設(shè)備；高壓蒸汽滅菌器、毒柜或恒溫干燥箱（烘箱）、周轉(zhuǎn)筐及小推車等接種室外側(cè)設(shè)置緩沖間，或?qū)⒁粋€房間隔斷成兩部分，外部小空間作緩沖間，內(nèi)部大空間做室。外界與緩沖間的門、緩沖間與接種室的門應(yīng)錯開，建議采用滑動門。緩沖間配備紫外線殺菌燈、洗手池、鞋架、衣帽鉤、工作服、工作帽、口罩等，用于無菌操作前洗手、更衣、換鞋。有條件位可在接種室門口設(shè)置風(fēng)淋室。接種室要求門窗密封防塵性能好，地面和墻壁平整光滑，便于清消毒。配套的電源插座布局合理。配置紫外線殺菌燈、臭氧發(fā)生器、超凈工作臺、空調(diào)、接種器培養(yǎng)室門窗、地面和墻面的要求同3.2.4接種室，另外要求保溫性能好。配備光照培養(yǎng)培養(yǎng)箱、暗培養(yǎng)櫥、震蕩培養(yǎng)器（搖床）、光照控制系統(tǒng)、空調(diào)、暖氣、除濕機(jī)、空氣消毒線殺菌燈、臭氧發(fā)生器、溫濕度記錄儀等。光照培養(yǎng)架設(shè)5～6層，最低層距地面20cm，層間距30cm左右，架長依40W日光燈管的長度決定，一般130cm，架寬60cm左右，每層架面安裝2～3支日光燈或培養(yǎng)材料固體培養(yǎng)時擺放在培養(yǎng)架上，也可置于光照培養(yǎng)箱中方便設(shè)定不同的培養(yǎng)條件暗培養(yǎng)的材料，放置在暗培養(yǎng)櫥中培養(yǎng)。培養(yǎng)材料應(yīng)干燥、通風(fēng)、防火。配置櫥柜、儲物架，便于物品存放整齊選用有防蟲網(wǎng)或防蟲設(shè)施的溫室或大棚，用于組培材料的瓶外扦插生根和已生根試管苗的棚室配置苗床、彌霧增濕裝置、遮陽網(wǎng)、塑料薄膜、小拱棚架；營養(yǎng)缽或穴盤等移栽容器；不同植物種類組織培養(yǎng)時適宜的基本培養(yǎng)基種類及配方不同，常用的基本培養(yǎng)基3生長素：吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NA培養(yǎng)室溫度應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)材料種類和培養(yǎng)目的，設(shè)定并調(diào)節(jié)在最適溫度范圍。一般情況下，25℃±4.2光照4.2.1光照強(qiáng)度4.2.2光質(zhì)4.2.3光照周期4.3濕度培養(yǎng)室的相對濕度一般控制在60%以內(nèi)，超過時用除濕5培養(yǎng)基制備4普通器皿用洗滌劑洗滌后，用自來水沖洗；新購入器皿，先用水清洗，再用1%鹽酸浸泡2h～3h，適用于培養(yǎng)基、蒸餾水、接種器具等，常用高壓蒸汽滅菌，在0.1MPa壓力下，即12適用于金屬接種器具，先將鑷子、剪子、解剖刀等浸入70%乙醇中，取出后在酒精燈火焰外焰灼燒1min左右，或?qū)⑵浼舛瞬糠譄t為止；也可用280℃~320℃接種器具滅菌器滅菌1min～2min，省分植物生長調(diào)節(jié)劑（赤霉素、玉米素、吲哚乙酸）、常用于接種室、培養(yǎng)室等環(huán)境的滅菌，用260nm紫外線燈照射20min～30min。常用70%乙醇在接種室、培養(yǎng)室等場所進(jìn)行噴霧降常用70%乙醇擦拭接種人員雙手或桌面、超凈工作臺臺面，用84消毒液、25利用設(shè)備直接放出殺菌氣體或用氧化方法將化學(xué)試劑變?yōu)闅怏w擴(kuò)散到空氣中殺滅微生物6.3.1對緩沖間和接種室全面清潔，紫外燈照需事先高溫滅菌，每接種一瓶試管材料要更換一的棉塞或封口膜，慢慢打開并始終夾在手中（培養(yǎng)瓶蓋可里面朝上），分好的材料，以植物材料的形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基，深度以材料可牢固豎立為宜，單芽莖6.3.7封好瓶口，標(biāo)明材料名稱、接種臺內(nèi)，并注意手臂不得在培養(yǎng)基、無菌材料、接種器械上方經(jīng)過，手臂離開工作臺后再次進(jìn)新消毒。已滅菌的外植體、試管苗、接種工具以及封口材料接觸瓶口的部分等不得接觸雙手量4ml/m3～8ml/m3，高錳酸鉀用量2g/m3～4g/m3，在接種室地面中央放置耐熱、耐腐蝕敞口容器，67.3培養(yǎng)基制備室、洗滌