PAGEPAGE8動物細胞培育和核移植技術[隨堂檢測]1．(2024·北京海淀區(qū)高二檢測)動物細胞培育的特點是()①細胞貼壁②有絲分裂③分散生長④接觸抑制⑤減數(shù)分裂⑥傳代培育一般傳至10代就不易傳下去A．①②④⑥ B．②③④⑤C．①③④⑥ D．③④⑤⑥解析：選A。培育瓶內懸液中分散的細胞只有貼附在光滑無毒的瓶壁上才會生長增殖，稱為細胞貼壁，在懸液中不會分散生長，①對、③錯；動物體細胞增殖的方式是有絲分裂，沒有減數(shù)分裂，②對、⑤錯；當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂，這叫接觸抑制，④對；傳代培育的細胞一般傳到10代以后就不易傳下去了，⑥對。2．(2024·淮安高二檢測)試驗小鼠皮膚細胞培育的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()eq\a\vs4\al(試驗,小鼠)eq\o(→,\s\up7(甲))eq\a\vs4\al(皮膚,組織)eq\o(→,\s\up7(乙))eq\a\vs4\al(皮膚,細胞)eq\o(→,\s\up7(丙))eq\a\vs4\al(培育,細胞1)eq\o(→,\s\up7(丁))eq\a\vs4\al(培育,細胞2)A．甲過程須要對試驗小鼠進行消毒B．乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶處理C．丙過程得到的細胞大多具有異樣二倍體核型D．丁過程得到的部分細胞可能失去貼壁黏附性解析：選C。甲過程表示獲得試驗小鼠的組織細胞，須要對試驗小鼠進行消毒處理，選項A正確；乙表示用胰蛋白酶處理皮膚組織，使其分散成單個皮膚細胞，選項B正確；丙過程表示原代培育，形成的細胞株遺傳物質沒有發(fā)生變更，具有正常的二倍體核型，選項C錯誤；丁是傳代培育過程，該過程部分細胞遺傳物質可能發(fā)生了變更而失去貼壁黏附性，選項D正確。3．(2024·福建八縣一中高二期末)某探討小組對某種動物的肝腫瘤細胞(甲)和正常肝細胞(乙)進行動物細胞培育。下列有關說法正確的是()A．在利用兩種肝組織塊制備肝細胞懸液時，也可用胃蛋白酶處理B．細胞培育應在含5%CO2和95%O2的混合氣體的恒溫培育箱中進行C．為了防止細胞培育過程中細菌的污染，可向培育液中加入適量的抗生素D．在相同相宜條件下培育等量的甲、乙細胞，一段時間后，乙細胞數(shù)量比甲多解析：選C。動物細胞培育的相宜pH為7.2～7.4，而在這樣的環(huán)境中胃蛋白酶會變性失活，因此在利用兩種肝組織塊制備肝細胞懸液時，不行用胃蛋白酶處理，應用胰蛋白酶處理，A錯誤；細胞培育應在含5%CO2和95%空氣的混合氣體的恒溫培育箱中進行，B錯誤；為了防止培育過程中雜菌的污染，可向培育液中加入適量的抗生素，C正確；甲(肝腫瘤細胞)失去接觸抑制，而乙(正常肝細胞)具有接觸抑制，因此一段時間后，甲細胞數(shù)量比乙多，D錯誤。4．(2024·淮安高二檢測)如圖所示是某動物細胞培育時，培育液中活細胞和死亡細胞密度統(tǒng)計結果，下列相關敘述錯誤的是()A．試驗中要限制胰蛋白酶溶液濃度和處理時間，以免損傷細胞B．培育液中應適當加入青霉素、鏈霉素，以避開雜菌污染C．曲線bc段變更的主要緣由是培育液中養(yǎng)分物質不足及有害代謝產物積累等D．培育至第6天時，新產生的細胞數(shù)等于死亡細胞數(shù)解析：選D。試驗中要限制胰蛋白酶溶液的濃度和處理時間，以免損傷細胞，A正確；培育液中應適當加入青霉素、鏈霉素等肯定量的抗生素，以避開雜菌污染，B正確；曲線bc段表示活細胞密度削減，而此時間段內死細胞密度增加，產生這種變更的主要緣由是培育液中養(yǎng)分物質不足及有害代謝產物積累等，C正確；培育至第6天時，活細胞數(shù)等于死細胞數(shù)，D錯誤。5．下列為克隆羊“多利”的培育過程示意圖。下列各項有關表述錯誤的是()A．克隆羊“多利”的主要性狀與甲羊一樣，因其細胞核基因來自甲羊B．克隆羊“多利”的培育過程中采納的生物技術有核移植和胚胎移植C．乙羊的去核卵母細胞為重組細胞基因表達供應了細胞內的環(huán)境條件D．此過程說明高度分化的動物細胞具有全能性解析：選D。生物的性狀主要由細胞核中的基因限制，此過程中培育成的早期胚胎須要移植到第三只羊的子宮內完成發(fā)育過程，此試驗只能說明高度分化的動物細胞的細胞核具有全能性，而不能證明動物細胞的全能性。6．(2024·泰安高二檢測)某生物愛好小組對一種抗癌新藥進行試驗時，以動物肝癌細胞為材料，測定抗癌藥物對體外培育細胞增殖的影響。請回答下列有關動物細胞培育的問題：(1)在動物細胞培育時，將細胞所需的養(yǎng)分物質按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培育基稱為________培育基。通常在培育基中還須要加入適量________等一些自然成分。細胞培育應在含5%CO2的恒溫培育箱中進行，CO2的作用是________________。另外，還應當保證被培育的細胞處于________、________的環(huán)境。(2)在細胞生長過程中，當細胞貼壁生長到肯定程度時，其生長會受到抑制，這種現(xiàn)象稱為________。(3)為了防止細胞培育過程中細菌的污染，可向培育液中加入適量的____________。(4)請你幫助愛好小組的同學分析本試驗，試驗的自變量是________________，試驗組和比照組除了自變量不同外，其他處理均應當相同，這是為了遵循試驗設計的________原則。解析：(1)將動物細胞所須要的各種養(yǎng)分物質按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培育基，稱為合成培育基。由于對細胞所需的養(yǎng)分物質還沒有完全搞清晰，因此，在運用合成培育基時，還要加入一些動物血清、血漿等自然成分。細胞培育所需的氣體中有CO2，作用是維持培育液的pH。被培育的細胞必需處于無菌、無毒的環(huán)境中，才能保證細胞正常地生長增殖。(2)動物細胞在分裂過程中有接觸抑制的現(xiàn)象。(3)抗生素能殺死培育基中的微生物，保證無菌無毒環(huán)境。(4)要測定抗癌藥物對體外培育細胞增殖的影響，試驗的自變量為抗癌藥物的有無，其他無關變量應當相同，否則會干擾試驗結果，這種設計遵循的是試驗的單一變量原則。答案：(1)合成血清、血漿維持培育液的pH無菌無毒(2)接觸抑制(3)抗生素(4)是否加入抗癌藥物單一變量7．隨著科學技術的發(fā)展，人們可以依據(jù)需求來改造生物的性狀。如圖是利用奶牛乳汁生產人類血清白蛋白的圖解，據(jù)圖回答下列問題：(1)在此過程中涉及到的細胞水平現(xiàn)代生物技術手段主要有_______________________。(2)在基因工程中，我們稱②為________，在②進入③之前要用__________________等工具來構建基因表達載體，能實現(xiàn)②進入③的常用方法是______________________。(3)圖中①一般經________處理可以得到③，從③到④的過程中一般利用去核后未受精的卵母細胞作為受體，而不用一般的體細胞，緣由是________________________________________________________________________。(4)⑦是⑥的后代，那么⑦的遺傳性狀和____________最相像，緣由是________________________________________________________________________。假如②的數(shù)量太少，常用________來擴增。要實現(xiàn)⑦批量生產人類血清白蛋白，則要求③的性染色體是______。利用該方法得到的動物叫做_______________________。答案：(1)核移植、動物細胞培育(2)目的基因限制酶、DNA連接酶和載體顯微注射法(3)胰蛋白酶卵母細胞大、易操作、養(yǎng)分物質多，體細胞的細胞核在卵母細胞的細胞質中才能表現(xiàn)出全能性(4)荷斯坦奶牛個體⑦的核遺傳物質大部分來自荷斯坦奶牛，⑥只是為胚胎發(fā)育供應養(yǎng)分和場所，⑦并沒有獲得⑥的遺傳信息PCR技術XX轉基因克隆動物[課時作業(yè)]一、選擇題1．(2024·安徽阜陽高二期末)下列有關動物細胞培育的敘述中，正確的是()A．動物細胞培育前要用胃蛋白酶使細胞分散B．動物細胞培育的主要目的是獲得大量的細胞分泌蛋白C．細胞遺傳物質的變更發(fā)生于原代培育過程中D．動物細胞培育須要無菌、無毒的環(huán)境解析：選D。通常將健康幼齡動物組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞，將處理后的細胞初次培育，稱為原代培育。貼滿瓶壁的細胞須要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶接著培育，讓細胞接著增殖，這種培育過程即為傳代培育。胃蛋白酶的最適pH約為2，不適合用作細胞培育時分散細胞的酶。動物細胞培育利用了細胞有絲分裂的原理，獲得大量的具有相同遺傳特性的細胞，細胞傳代培育至50代以后，遺傳物質可能發(fā)生變更。動物細胞培育須要無菌、無毒的環(huán)境，養(yǎng)分物質足夠，氣體環(huán)境、溫度、pH相宜等條件。2．(2024·南京高二檢測)在將動物組織塊分散成單個細胞時，可以運用胰蛋白酶。由此不能推想出來的是()A．動物細胞之間可能依靠蛋白質相互聯(lián)系B．處理時肯定要留意處理時間、加酶量C．胰蛋白酶肯定不會對動物細胞造成損傷D．動物細胞培育液的pH應當與胰蛋白酶作用的相宜pH基本一樣解析：選C。在動物細胞培育時，胰蛋白酶可以使細胞間的蛋白質水解，使細胞分散，運用時應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度而造成細胞損傷。3．(2024·臨沂高二檢測)在動物細胞培育過程中，下列處理中不恰當?shù)氖?)A．培育液和培育用具要進行無菌處理B．供應種類齊全的養(yǎng)分物質C．供應純氧以保證細胞的呼吸作用D．保證供應相宜的溫度和pH解析：選C。動物細胞培育過程中要保證無菌、無毒，須要對培育液和培育用具進行無菌處理，A項正確；培育液中養(yǎng)分成分足夠，以滿意細胞增殖的須要，B項正確；動物細胞培育過程須要的氣體環(huán)境應為95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，空氣中的O2保證其代謝所用，CO2維持培育液的pH，C項錯誤；細胞體外培育須要相宜溫度和pH，其中溫度一般與動物體溫接近，D項正確。4．(2024·河南南陽高二期中)下列關于動物體細胞核移植技術的敘述，不正確的是()A．用核移植技術得到克隆動物的過程體現(xiàn)了動物細胞的細胞核具有全能性B．動物體細胞核移植過程中用到了動物細胞培育和細胞融合技術C．用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞D．用動物體細胞核移植方法生產的克隆動物是對核供體動物進行100%的復制解析：選D。用核移植技術得到克隆動物的過程體現(xiàn)了動物細胞的細胞核具有全能性，A正確；動物體細胞核移植過程中用到了動物細胞培育和細胞融合技術，B正確；傳代10代以內的細胞能夠保持正常的二倍體核型，遺傳物質沒有發(fā)生變更，故一般都選傳代10代以內的細胞用作核移植的供體細胞，C正確；通過動物體細胞核移植方法生產的重組細胞的細胞質中的遺傳物質主要來自卵母細胞，故用動物體細胞核移植方法生產的克隆動物不是對核供體動物進行100%的復制，D錯誤。5．(2024·鹽城高二檢測)人臍帶間充質干細胞在特定誘導條件下，可分化為脂肪、肝、神經等多種組織細胞。下圖表示培育人臍帶間充質干細胞的大致過程。下列有關敘述錯誤的是()A．人臍帶間充質干細胞屬于專能干細胞B．通過離心除去上清液可以除去胰蛋白酶C．過程①通常用胰蛋白酶處理D．出現(xiàn)接觸抑制前，培育瓶中的細胞數(shù)量有可能呈“J”型增長解析：選A。依據(jù)題意可知，人臍帶間充質干細胞可以分化為脂肪、肝、神經等多種組織細胞，故屬于多能干細胞，A錯誤；離心后細胞沉淀在底層，胰蛋白酶在上清液中，B正確；將剪碎的人臍帶組織塊用胰蛋白酶分散成單個細胞，C正確；出現(xiàn)接觸抑制之前，細胞數(shù)量的增長可能接近“J”型，D正確。6．下列哪一項不屬于克隆()A．利用PCR技術擴增目的基因B．利用核移植技術培育出克隆綿羊C．利用植物體細胞雜交技術培育出雜種植株D．利用胡蘿卜莖尖組織經植物組織培育得到脫毒苗解析：選C?？寺∈侵笍囊还餐淖嫦龋ㄟ^無性繁殖的方法產生出來的遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體。利用PCR技術擴增目的基因屬于分子水平的克??；利用核移植技術培育出克隆綿羊屬于個體水平的克??；利用植物體細胞雜交技術培育出雜種植物產生的不是復制品，不屬于克?。焕弥参锝M織培育獲得脫毒苗，屬于個體水平的克隆。7．(2024·啟東高二檢測)從母羊甲的體細胞中取出細胞核，移植入母羊乙的去核卵母細胞中，融合后的細胞經卵裂形成早期胚胎，再植入另一只母羊丙的子宮內，下列有關說法正確的是()A．生出小羊的性狀與甲羊完全相同B．一般來說生出小羊的核基因型與甲羊完全相同C．生出小羊的遺傳物質由甲、乙雙親共同確定，所以該過程為有性生殖D．生出小羊的性狀由甲、乙、丙3個親本的基因型與環(huán)境共同確定解析：選B。核移植獲得克隆動物的生殖方式是無性生殖，遺傳物質中甲羊的和乙羊的都有，因此認為生出的小羊性狀完全同甲羊是不正確的，應是主要性狀與甲羊相同，核基因型一般與甲羊完全相同，因此B項正確。8．(2024·河北涿鹿中學高二期中)如圖是某克隆羊培育過程模式圖，試分析獲得該克隆羊的生殖方式、該克隆羊的基因型以及該克隆羊發(fā)育成熟時所分泌的性激素依次是()A．無性生殖、Aa、雌性激素 B．無性生殖、aa、雄性激素C．有性生殖、aa、雄性激素 D．有性生殖、AA、雌性激素解析：選B。克隆羊是利用了細胞核移植技術，其生殖方式為無性生殖；該克隆羊繼承了B羊的全部的細胞核基因和A羊的細胞質基因，因此其基因型為aa；由于B羊為雄性，因此該克隆羊亦為雄性，故該克隆羊發(fā)育成熟時所分泌的性激素是雄性激素。9．(2024·福建季延中學高二期末)隨著生物技術的快速發(fā)展，已滅亡生物的“復活”將不再是神話。假如世界上最終一只野驢剛剛死亡，下列“復活”野驢的方法中，最可行的是()A．將野驢的體細胞取出，利用組織培育技術，經脫分化、再分化，培育成新個體B．取出野驢的體細胞兩兩融合，再經組織培育培育成新個體C．取出野驢的體細胞核移植到家驢的去核卵母細胞中，經孕育培育成新個體D．將野驢的基因導入家驢的受精卵中，培育成新個體解析：選C。動物細胞的全能性受到限制，因此動物細胞培育不能形成新個體，A錯誤；動物細胞融合技術還不能形成新的動物個體，況且細胞融合后會導致遺傳物質加倍，B錯誤；將野驢的體細胞核移植到雌性家驢的去核卵母細胞中，可以克隆形成野驢，C正確；將野驢的基因導入家驢的受精卵中，屬于基因工程，可培育出新性狀的家驢，D錯誤。10．如圖所示為人類治療性克隆的也許過程，以下說法正確的是()A．治療性克隆的過程中涉及轉基因、核移植、細胞培育等現(xiàn)代生物技術B．治療性克隆的結果說明動物細胞具有全能性C．治療性克隆的過程中有細胞的分裂和分化D．治療性克隆的器官在移植方面的主要優(yōu)點是其遺傳物質與患者完全相同，沒有免疫排斥反應解析：選C。治療性克隆主要涉及核移植、細胞培育等技術，不涉及轉基因技術；沒有新個體的產生不能說明動物細胞具有全能性；治療性克隆的器官中遺傳物質和患者不完全相同，去核卵母細胞中也有部分遺傳物質；形成器官的克隆過程會出現(xiàn)細胞的分裂和分化。二、非選擇題11．如圖表示動物細胞培育流程圖，請據(jù)圖回答下列問題：①取動物組織塊↓②______________↓③處理組織分散成單個細胞↓④制成____________↓⑤轉入培育液中進行培育↓⑥處理貼壁細胞分散成單個細胞，制成________↓⑦轉入培育液中進行培育(1)過程②表示________________________。(2)過程③和⑥用________________________處理組織或貼壁細胞分散成單個細胞，這樣做的目的是_______________________________________________________________。(3)④和⑥的過程都要把分散的細胞制成_______________________________。(4)過程⑤進行的細胞培育是________，細胞適于________生長增殖。(5)過程⑦進行的細胞培育是________，一般傳至________代后就不易傳下去了，傳至________接著培育時，增殖會漸漸緩慢，以至于完全停止，部分細胞的______會發(fā)生變更。接著培育時，少部分細胞發(fā)生了______，朝著等同于________的方向發(fā)展。解析：進行動物細胞培育時，首先將組織塊剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成很多單個細胞，然后，用培育液將分散的細胞稀釋制成細胞懸液，再將細胞懸液放入培育瓶內，置于相宜環(huán)境中培育。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。以后，細胞進行有絲分裂，數(shù)目不斷增多。當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。人們通常將動物組織消化后的初次培育稱為原代培育。貼滿瓶壁的細胞須要重新用胰蛋白酶等處理，然后分別接著培育，讓細胞接著增殖，這樣的培育過程通常被稱為傳代培育。答案：(1)剪碎組織(2)胰蛋白酶解除由于接觸對細胞生長和繁殖的抑制(3)細胞懸液(4)原代培育貼壁(5)傳代培育1010～50代細胞核型突變癌細胞12．(2024·高考全國卷Ⅱ節(jié)選)如圖表示通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)圖中A表示正常細胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為____________。過程①表示去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培育至適當時期再進行，去核時常采納________的方法。②代表的過程是__________。(2)經過多次傳代后，供體細胞中__________________的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必需關注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質的角度分析其緣由是________________________________________________________________________。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育勝利一樣，其他克隆動物的勝利獲得也證明白________________________________________________________________________。解析：(1)核移植過程中，供體的體細胞中性染色體組成可為XX或XY；去核時常采納顯微操作的方法；圖示②過程表示胚胎移植。(2)細胞培育過程中，經過多次傳代培育，細胞中遺傳物質的穩(wěn)定性會降低。(3)由于卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響，所以克隆動物與供體性狀不完全相同。(4)克隆動物的勝利獲得證明白已分化的動物體細胞的細胞核具有全能性。答案：(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(3)卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響(4)動物已分化體細胞的細胞核具有全能性13．(2024·濟南高二檢測)華南虎是原產中國的老虎品種，已有近30年沒有野生華南虎出現(xiàn)的報告，野生華南虎也被一些專家認為已經面臨滅亡?？茖W工作者嘗試用一般老虎完成體細胞克隆華南虎的探討，下圖是其培育過程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)克隆華南虎的遺傳性狀與________(填字母)虎基本一樣。(2)A、B、C3只虎哪一只沒有供應遺傳物質？______。(3)克隆華南虎的過程是否遵循孟德爾的遺傳定律？為什么？________________________________________________________________________。(4)有人設想將虎的體細胞與牛的體細胞進行融合，以獲得新物種“虎—?！?，你認為依據(jù)目前的生物技術和理論能否實現(xiàn)這一愿望？________。緣由是___________________。解析：(1)由克隆華南虎的過程可知，華南虎A供應細胞核，一般虎B供應細胞質，所以克隆虎D的遺傳性狀與供核的A更接近，即相當于克隆了A。(2)老虎C只供應胚胎發(fā)育的場所，沒有供應遺傳物質給D。(3