生物化學(xué)考研復(fù)習(xí)要點(diǎn)

第1章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能

考綱要求

①組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)和分類。②氨基酸的理化性質(zhì)。肽鍵和肽。③

蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)及高級(jí)結(jié)構(gòu)。④蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系。⑤蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)（兩性解

離、沉淀、變性、凝固及呈色反應(yīng)等）。⑥分離、純化蛋白質(zhì)的一般原理和方法。

復(fù)習(xí)要點(diǎn)

一、蛋白質(zhì)的分子組成

1.氨基酸分類和化學(xué)結(jié)構(gòu)

組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸有20種，根據(jù)其側(cè)鏈的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)可分為①、②、③、④、

⑤類（見(jiàn)下表）。

①非極性疏水性氨基酸（6種）|甘氨酸、丙氨酸、綴氨酸、亮氨酸、異氨酸、脯氨酸

I②極性中性氨基酸（6種）|幺幺氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇

氨酸I

③芳香族氨基酸（3種）I苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸

④酸性氨基酸（2種）I谷氨酸、天冬氨酸

⑤堿性氨基酸（3種）I賴氨酸、精氨酸、組氨酸

賴氨酸I含2個(gè)氨基的氨基酸

谷氨酸、天冬氨酸I含2個(gè)狡基的氨基酸

脯氨酸、羥肺氨酸I亞氨基酸

1脯氨酸1容易使肽鏈走向形成折角的氨基酸

1

11

11

--------------1

1同型半胱氨酸1天然蛋白質(zhì)中不存在的氨基酸

1

11

11

--------------1

1瓜氨酸1不出現(xiàn)于蛋白質(zhì)中的氨基酸

1

11

11

--------------1

1色氨酸、酪氨酸在280hm波長(zhǎng)處有特征性吸收峰的氨基酸

1

11

甘氨酸I20種氨基酸中除甘氨酸外，都屬于L—d-氨基酸

111

1

111氨基酸1同音記憶法

1

11_________________________1____________________

|1必需氨基酸I綴、異亮、亮、苯丙、蛋、色、蘇、賴I寫一兩本淡色書來(lái)（繳.異

一亮.苯-蛋一色-蘇一賴）I

1堿性氨基酸1賴、精、組1揀來(lái)精讀（堿一賴一精

一組）1

111

111

-------------------------------------------------1

1酸性氨基酸1谷、天冬1二伏天（酸一谷一天）

1

111

111

-------------------------------------------------1

1支鏈氨基酸1綴、異亮、亮1只借一兩（支一繳一異

一亮）

1芳香族氨基酸1酪、苯丙、色1芳香老本色（芳香一酪

一苯一色）1

1____________________11

--------------1

1一碳單位1絲、色、組、甘1施舍（一根）竹竿（幺

幺.色.組.甘）1

1_______________11

--------------1

1含硫氨基酸1半胱、胱、蛋1留幫光蛋（硫一半■胱嗤）

1

1_______________11

--------------1

1生酮氨基酸1亮、賴1同樣來(lái)（酮.亮.賴）

1

1|_11

--------------1

1生糖兼生酮氨基酸1異亮、苯丙、酪、色、蘇1一本落色書

（異.苯.酪.色.蘇）1

I11

155

2010考研西醫(yī)綜合輔導(dǎo)講義

訊:①潮!氯酸最冷兩個(gè)§濾夢(mèng)1氨箍媛3記憶為f提墨\醒巍匙t村i柱畏一督氨基良j趙蠶

督離開(kāi)娥餐督氮基.酸q薯I.~

j。jj愁輔蘸囂瓣糧麓瓣辮夥爹壤爹？

10?：斗④應(yīng)熟記鐲精氨基酸的葵爻縮寫代號(hào)圓許多年份蛾I考題直瀚代專出現(xiàn)jj、？0夥

A.半胱氨酸B.胱氨酸

D.精氨酸E.賴氨酸

【例5】2008N025A-F3~］氨基酸酸中，屬于酸性氨基酸的是

A.精氨酸B.甘氨酸

［例6］I998N019AV-1下哪種氨基酸是含硫的氨基酸？

A.谷氨酸B.賴氨酸

D.蛋氨酸E.酪氨酸

【例7】2006N023AT~］哪種氨基酸體內(nèi)不能合成，必需靠食物供給？

A.繳氨酸B.精氨酸

D.組氨酸E.絲氨酸

2.氨基酸及蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的鑒別

C.瓜氨酸

C.亮氨酸D.天冬氨酸

C.亮氨酸

c.半胱氨酸

1

11氨基酸的理化特性1蛋白質(zhì)的理化特性

1

1_______________11

111

-------------1

11①兩端d.氨基和a.竣基在溶液中解離1①氨基+竣基+側(cè)鏈上某

些基團(tuán)的解離1

1兩性解離/1②若溶液pH<pI,解離成陽(yáng)離子1②若溶液pH<pl,蛋白

質(zhì)帶正電荷1

1兩性電離1③若溶液pH>pI,解離成陰離子1③若溶液pH>pL蛋白

質(zhì)帶負(fù)電荷1

11④若pH=pL成為兼性離子，電中性1④若pH=pL為兼性離

子，電荷為01

L.11

111

-------------1

1等電點(diǎn)plIpl：(pKl-FpK2)/21各種蛋白質(zhì)的pl不同，

多接近5.01

|_11

111

-------------1

11①色氨酸、酪氨酸最大吸收峰在280nm1蛋白質(zhì)分子中色氨酸、

酪氨酸最大吸收峰1

1紫外吸收1②大多數(shù)蛋白質(zhì)都含有色氨酸、酪氨酸，1在280nm?.蛋白質(zhì)

的.A2s~.與其濃度成正比，|

11故利用該原理可測(cè)定蛋白質(zhì)含量1故可作蛋白質(zhì)的定量測(cè)

定1

L11

111

-------------1

11氨基酸與荀三酮水合物共加熱，最終形成1

1

1

1瑋三酮反應(yīng)1藍(lán)紫色化合物，其最大吸收峰在570nm,利|同左

1

1

11用此原理行氨基酸定量分析1

1

|_11

111

-------------1

1雙縮胭反應(yīng)1無(wú)1陽(yáng)性。用于檢測(cè)蛋白質(zhì)水

解程度1

11

111

_______________________________1

I膠體性質(zhì)I無(wú)I有

I變性沉淀凝固I無(wú)I有

156

第三部分生物化學(xué)

黛麓釐一570nm囊j*攀

101?11④旃確艮盈時(shí)'生成誦盤絮色化合溺的最+汲油媾柱處。ojjojOOIjO

二、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

1.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分成?級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)，后三者稱高級(jí)結(jié)構(gòu)。并非所有蛋白質(zhì)都

有四級(jí)結(jié)構(gòu)，

由一條肽鏈組成的蛋白質(zhì)只有一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)，由二條或二條以上的多肽鏈組成的蛋白質(zhì)

才有四級(jí)結(jié)構(gòu)。

1111

11

11一級(jí)結(jié)構(gòu)1二級(jí)結(jié)構(gòu)1三級(jí)結(jié)構(gòu)

1四級(jí)結(jié)構(gòu)1

11111

—1------------------------------1

11蛋白質(zhì)分子中氨基酸1指蛋白質(zhì)分子中某一段1整條肽鏈中所有原子在

1蛋白質(zhì)分子中各亞1

1定義111

11

11的于j｝列J『1頤序1肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)1三維空間的排布位置

1基間的空間排布1

1111

1111

—1------------------------------1

1表現(xiàn)1肽鏈1僅?螺旋、B-折疊1結(jié)構(gòu)域、分子伴侶

1亞基1

1形式11B一轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)卷曲1

11

1111

—1------------------------------1

11肽鍵（主要）11疏水作用、氫鍵

11

1維系鍵11氫鍵1

1氫鍵、離子鍵1

11二硫鍵（次要）11范得華力、離子鍵

11

I一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空I二級(jí)結(jié)構(gòu)是由一級(jí)結(jié)I分子量較大的蛋白質(zhì)

含有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋I

I間構(gòu)象和特異性功能I構(gòu)決定的。在蛋白質(zhì)I?？烧郫B成多個(gè)結(jié)構(gòu)

I

意義III

白質(zhì)，單獨(dú)的亞基一I

I的基礎(chǔ)，但不是決定I中存在2?3個(gè)模體，|較為緊密的區(qū)域，并各

般沒(méi)有生物學(xué)功能I

I空間構(gòu)象的唯一因素|發(fā)揮特殊生理功能|行其功能，稱為結(jié)構(gòu)域

注意：①常考點(diǎn)為各級(jí)結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)形式及其維系鍵。

②四級(jí)結(jié)構(gòu)的維系鍵5版生。物化學(xué)為疏水作用（主善射盆氫鍵和離子鍵；6、7版主要

為氫鍵和離子鍵。

④氫鑲可維畚二八三4四級(jí)姥捅譽(yù)

lliij?〈蛋理0叛生他的三級(jí)縫桶奇如入1命專懵侶。I、IIHilor.

[例11]2003N019A、1994N0左穩(wěn)定蛋白質(zhì)分子中0【一螺旋利p'折疊的化學(xué)鍵是

157

2010考研西醫(yī)綜合輔導(dǎo)講義

A.肽鍵B.二硫鍵C.鹽鍵

D.氫鍵E.疏水作用

【例12】2001N019AL穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象通常不起作用的化學(xué)鍵是

A.氫鍵B.鹽鍵C.酯鍵

D.疏水鍵E.范德華力

[例13]1992N040A隹系蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是

A.鹽鍵B.疏水鍵C.氫鍵

D.二硫鍵E.肽鍵

[例14]1995N0142X蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)中存在的構(gòu)象

A.01—螺旋B.B.螺旋

C.a-轉(zhuǎn)角D.B-轉(zhuǎn)角

【例15A】$轉(zhuǎn)角常由4個(gè)氨基酸殘基組成，其中第2個(gè)殘基常見(jiàn)為

A.甘氨酸B.天冬氨酸C.天冬酰胺

D.脯氨酸E.色氨酸

【例16X1關(guān)于鋅指結(jié)構(gòu)，下列哪兒項(xiàng)正確？

A.是一個(gè)模體例子B.具有結(jié)合鋅離子的功能

C.含鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)都能與DNA.~占合D.含鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)都能與RNA占

合

A.一級(jí)結(jié)構(gòu)B.二級(jí)結(jié)構(gòu)C.三級(jí)結(jié)構(gòu)

D.四級(jí)結(jié)構(gòu)E.模序結(jié)構(gòu)（6、7版生物化學(xué)已改稱“模體結(jié)構(gòu)”）

【例17】2005N0113B亮氨酸拉鏈屬于蛋白質(zhì)的

【例18】2005N0114B整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)位置屬于蛋白質(zhì)的

A.亞基聚合B.亞基解聚C.蛋白質(zhì)變性

D.蛋白質(zhì)水解E.肽鍵形成

【例19B］蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的形成是

【例20B】蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞是

【例21B】蛋白質(zhì)二、三級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞是

【例22B】蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞是

【例23B】蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)形成時(shí)出現(xiàn)

2.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

?級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ)，也是功能的基礎(chǔ)。一級(jí)結(jié)構(gòu)相似的蛋白質(zhì)具有相似的高級(jí)

結(jié)構(gòu)與功能。若

一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變影響其功能，稱為分子病。

蛋白質(zhì)空間構(gòu)象與功能有密切關(guān)系。生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成、加工和成熟是一個(gè)復(fù)雜的

過(guò)程，其中多肽

鏈的正確折疊對(duì)其正確構(gòu)象的形成和功能的發(fā)揮至關(guān)重要。若蛋白質(zhì)的折疊發(fā)生錯(cuò)誤，盡管

其一級(jí)結(jié)構(gòu)不

變，但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變，仍可影響其功能，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致疾病發(fā)生，稱為蛋白質(zhì)構(gòu)象

疾病。

瘋牛病是由骯病毒蛋白(PrP)引起的一組人和動(dòng)物神經(jīng)的退行性病變，具有傳染性、遺

傳性或散在發(fā)病

的特點(diǎn)。其致病的生化機(jī)制是生物體內(nèi)正常d-螺旋形式的PrPC轉(zhuǎn)變成了異常的B一折疊形

式的PrPSeo

三、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)

1.蛋白質(zhì)的兩性電離、紫外吸收、呈色反應(yīng)見(jiàn)與氨基酸理化性質(zhì)的鑒別表。

體內(nèi)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)各不相同，大多數(shù)接近于pH5.Oo所以在人體體液pH'7.4的

環(huán)境下，大多數(shù)蛋白質(zhì)

解離成陰離子。少數(shù)蛋白質(zhì)含堿性氨基酸較多，其等電點(diǎn)偏堿性，稱堿性蛋白質(zhì)，如魚精蛋

白、組蛋白等。也

有少量蛋白質(zhì)含酸性氨基酸較多，其等電點(diǎn)偏酸性，稱酸性蛋白質(zhì)，如胃蛋白酶、絲蛋白等。

2.蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)

158

第三部分生物化學(xué)

蛋白質(zhì)分子量1萬(wàn)?.100萬(wàn)KD,分子直徑1-lOOnm,具有膠體性質(zhì)。?

蛋白質(zhì)顆粒表面有水化膜、帶電荷是維持蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的兩個(gè)重要因素。若去除蛋白

質(zhì)顆粒的表面電

荷和水化膜，則蛋白質(zhì)極易從溶液中析出。

3.蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固

(1)蛋白質(zhì)的變性

蛋白質(zhì)變性是指在各種理化因素的作用下，蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象被破壞，導(dǎo)致其理化性質(zhì)

的改變和生物活

性的喪失。

一般認(rèn)為蛋白質(zhì)變性主要是二硫鍵和非共價(jià)鍵的破壞，不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)中氨基酸序列的

改變。蛋白質(zhì)變

性后，其溶解度降低、黏度增加、結(jié)晶能力消失、生物活性喪失，易被蛋白酶水解。

造成蛋白質(zhì)變性的因素包括加熱、乙醇、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子、生物堿試劑等。

(2)蛋白質(zhì)的復(fù)性與不可逆性變性

若蛋白質(zhì)變性的程度較輕，去除變性因素后，有些蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的

構(gòu)象和功能，稱為

復(fù)性。許多蛋白質(zhì)變性后，空間構(gòu)象嚴(yán)重破壞，不能復(fù)原，稱為不可逆性變性。

【例24】2007N023A蛋白質(zhì)變性是由于

A.蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的破壞B.氨基酸組成的改變

c.肽鍵的斷裂D.蛋白質(zhì)的水解

【例25】1997N0145X蛋白質(zhì)變性時(shí)

A.空間結(jié)構(gòu)破壞。一級(jí)結(jié)構(gòu)無(wú)改變B.280nm處光吸收增加

c.溶解度降低D.生物學(xué)功能改變

注意：本題給出的答案為ACDo但I(xiàn)995NO139題(下題)與本題類似，“酶變性時(shí)的表現(xiàn)”(除

核醐外，絕大

多數(shù)酶都是蛋白質(zhì))，其答案就將“紫外線(280nni)吸收增強(qiáng)”選入正確答案。究竟蛋白

質(zhì)變性是否

對(duì)光吸收度有影響，查閱5、6、7版生物化學(xué)都沒(méi)有明確答案。王鏡巖主編的《生物化

學(xué)》第3版只說(shuō)

會(huì)發(fā)生改變，但沒(méi)有說(shuō)是增加還是減少。

【例26】：1995NO139X酶變性時(shí)的表現(xiàn)

A.溶解度降低B.易受蛋白酶水解

c.酶活性喪失D.紫外線(280nm)吸收增強(qiáng)

【例271’1994N03A下列關(guān)于免疫球蛋白變性的敘述，哪項(xiàng)是不正確的？

A.原有的抗體活性降低或喪失B.溶解度增加c.易被蛋白酶水解

D.蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象破壞E.蛋白質(zhì)的級(jí)結(jié)構(gòu)并無(wú)改變

(3)蛋白質(zhì)的沉淀

蛋白質(zhì)變性后，疏水側(cè)鏈暴露在外，肽鏈融匯相互纏繞繼而聚集，因而從溶液中析出，

這一現(xiàn)象稱為蛋白

質(zhì)沉淀。

(4)蛋白質(zhì)的凝固

蛋白質(zhì)經(jīng)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿作用發(fā)生變性后，仍能溶解于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿溶液中，若將pH調(diào)至等

電點(diǎn)，則變性蛋白

質(zhì)立即結(jié)成絮狀的不溶解物，此絮狀物仍可溶解于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中。如再加熱則絮狀物可變成

比較堅(jiān)固的凝

塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的凝固作用。實(shí)際上凝固是蛋白

質(zhì)變性后進(jìn)一步

發(fā)展的不可逆的結(jié)果。

(5)蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固的關(guān)系

變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不?定變性，凝固的蛋白質(zhì)一定變性。

四、蛋白質(zhì)的分離和純化

分離、純化蛋白質(zhì)是研究單個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的先決條件。通常利用蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)，

采取不損傷

159

2010考研西醫(yī)綜合輔導(dǎo)講義

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的物理方法來(lái)純化蛋白質(zhì)。

1.分離和純化概述

-1

1分離、純化方法1蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)1機(jī)理

1

111

--------1

111①透析是利用透析袋將大分子蛋白質(zhì)和

小分子化合物分開(kāi)1

1透析、超濾法1蛋白質(zhì)屬于大分子1②超濾法是利用正壓或離心力使蛋白質(zhì)溶

液透過(guò)有一定截1

111留分子量的超濾膜，達(dá)到濃縮蛋白質(zhì)溶

液的目的1

1___________11

--------1

11蛋白質(zhì)顆粒表面有水化1向溶液中加人脫水劑破壞水化膜使蛋白

質(zhì)沉淀而分離1

1丙酮沉淀、鹽析11

1

11膜、蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)1將溶液pH調(diào)節(jié)至蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，消除

其表面電荷1

L111

----------------------------1

1電泳1蛋白質(zhì)顆粒表面帶電荷1帶電荷的蛋白貢分子在電場(chǎng)中向正極或

負(fù)極泳動(dòng)而使蛋白質(zhì)分離1

|蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷

1層析11離子交換層析、凝膠過(guò)濾、親和層析

1

11多少、親和力1

1

111

_________________________________1

I超速離心|蛋白質(zhì)分子量大小I既可分離純化蛋白質(zhì)，又可測(cè)定蛋白質(zhì)分

子量I

2.丙酮沉淀、鹽析和免疫沉淀

蛋白質(zhì)被丙酮沉淀后，應(yīng)立即分離，否則蛋白質(zhì)會(huì)變性。

鹽析是指在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽（如硫酸錢、硫酸鈉、氯化鈉），使蛋白質(zhì)沉

淀。鹽析一般無(wú)

蛋白質(zhì)的變性。

蛋白質(zhì)具有抗原性，將某一純化蛋白質(zhì)免疫動(dòng)物可獲得抗該蛋白的特異抗體。利用特異

抗體識(shí)別相應(yīng)抗

原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白，稱免疫

沉淀法。

3?電泳利用蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)的特性來(lái)分離各種蛋白質(zhì)。分子量小，帶電多的蛋白

質(zhì)泳動(dòng)速率快。

4.透析利用透析袋將大分子的蛋白質(zhì)與小分子化合物分開(kāi)。

5?層析利用蛋白質(zhì)的電荷量和性質(zhì)不同，通過(guò)離子交換層析，或親和層析將蛋白質(zhì)分

開(kāi)。如使用陰離

子交換層析，由于陰離子交換樹(shù)脂顆粒上帶正電荷，能吸引溶液中的陰離子。然后再用含陰

離子的溶液洗柱。

含負(fù)電荷小的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來(lái);增加陰離子濃度，含負(fù)電荷多的蛋白質(zhì)也被洗脫下來(lái),

于是兩種蛋白質(zhì)

被分開(kāi)。

6.凝膠過(guò)濾也稱分子篩層析，是利用分子大小分離蛋白質(zhì)的方法。

7.超速離心利用蛋白質(zhì)的密度、形態(tài)、沉降系數(shù)不同而分離蛋白質(zhì)。

注意：①利用蛋白質(zhì)兩性性分離蛋白質(zhì)的有——電泳、離子交換層析。

②利用蛋白質(zhì)分子大小不同分離蛋白質(zhì)的有——透析、凝膠過(guò)濾（分子篩層析）。

【例28】2000N020A5列蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠過(guò)濾層析時(shí)最先被洗脫的是

A.馬肝過(guò)氧化氫酶（分子量247500）BJR紅蛋白（分子量16900）

c.人血清清蛋白（分子量68500）D.牛p.乳球蛋白（分子量35000）

E.牛胰島素（分子量5733）

【例29】1993NO2OA用凝膠過(guò)濾層析（交聯(lián)葡聚糖凝膠）柱分離蛋白質(zhì)時(shí)，下列哪項(xiàng)是正確

的？

A.分子體積最大的蛋白質(zhì)最先洗脫下來(lái)B.分子體積最小的蛋白質(zhì)最先洗脫下來(lái)

c.不帶電荷的蛋白質(zhì)最先洗脫下來(lái)D.帶電荷的蛋白質(zhì)最先洗脫下來(lái)

E.沒(méi)有被吸附的蛋白質(zhì)最先洗脫下來(lái)

解題；①凝膠過(guò)洲分子篩層辛,.是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同進(jìn)行的分離提純。是在層析柱內(nèi)

充滿帶小孔

的顆粒。蛋白裹溶液加入柱確上部，讓央包揀下滲3這時(shí)，小務(wù)尋蛋白質(zhì)進(jìn)入凝陵微軋。

夫命亍不能

進(jìn)入恕洗再湃。皋。?卜分于后汽能屯-F朱j并不是想當(dāng)然的小分亍由于法違怏。屯：

梵1賦嚇朱譽(yù)?

j②離尋交狹層橇i是設(shè)蛋自質(zhì)分于輯芾電荷不融進(jìn)待誡命稿提魂。若以電撩著隱；蝸

亍隕離亍爻狹

跌ji斤，賦含負(fù)電穩(wěn)小鞠蛋白質(zhì)靠范被洗骸弋皋3jj

160

第三部分生物化學(xué)

五、多肽鏈中氨基酸序列分析大綱已刪除該知識(shí)點(diǎn)。

多肽鏈中氨基酸序列分析包括下列步驟：

1.分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成，計(jì)算出各氨基酸在蛋白質(zhì)中的百分組成或個(gè)

數(shù)。

2.測(cè)定多肽鏈的氨基末端和段基末端為何種氨基酸殘基。最常用方法為丹酰氯法。

多肽鏈的d.氨基可與丹酰氯反應(yīng)生成丹酰衍生物，該物質(zhì)具強(qiáng)烈熒光，可資鑒別?？?/p>

基側(cè)氨基酸殘基用

竣肽酶水解下來(lái)后進(jìn)行鑒定。這樣鑒定出來(lái)的頭、尾兩端的氨基酸殘基可作為整條肽鏈的標(biāo)

志點(diǎn)O

3.將肽鏈水解成片段分別進(jìn)行分析。方法很多，胰蛋白酶可水解賴氨酸或精氨酸的竣

基所形成的肽鍵；

胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸竣基側(cè)的肽鏈；浪化“青水解甲硫氨酸竣基側(cè)的肽鏈。

4.用肽段重疊法測(cè)定完整多肽鏈的序列。

近年來(lái)，由于核酸研究在理論和技術(shù)上.的迅猛發(fā)展，人們開(kāi)始通過(guò)核酸來(lái)推演蛋白質(zhì)中的

氨基酸序列。

即先分離編碼蛋白質(zhì)的基因，測(cè)定DNA序列，排列出mRNA序列，按照三聯(lián)密碼的原則

推演出氨基酸的序

列。

[例30]2001N()20A常用于測(cè)定多肽N末端氨基酸的試劑是

A.淡化氫B_丹酰氯C.B一—筑基乙醇

D.羥胺E.過(guò)甲酸

常考點(diǎn)幾種特殊的氨基酸；蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)；蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及提純。

參考答案——詳細(xì)解答見(jiàn)《西醫(yī)綜合歷年真題精析》

1.A

9.D

17.E

25.ACD

2.B3.D

10.B11.D

18.C19.E

26.ABCD27.B

4.C

12.C

20.D

28.A

5.D

13.E

21.C

29.A

6.D7.A

14.AD15.D

22.B23.A

30.B

8.A

16.ABCD

24.A

161

2010考研西醫(yī)綜合輔導(dǎo)講義

第2章核酸的結(jié)構(gòu)與功能

考綱要求

①核酸分子的組成，5種主要啜吟、喀唾堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)。②核甘酸。③核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu),

核酸的空間結(jié)構(gòu)

與功能。④核酸的變性、復(fù)性及雜交。

復(fù)習(xí)要點(diǎn)

一、核酸的化學(xué)組成及一級(jí)結(jié)構(gòu)

1.核酸的分類

11i

1

||DNA|RNA

1

111

111

--------------------1

1名稱1脫氧核糖核酸1核糖核酸

1

1_____________________11

111

--------------------1

1分布1細(xì)胞核、線粒體1細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、

線粒體1

L一11

111

--------------------1

1功能1攜帶遺傳信息，決定細(xì)胞和個(gè)體的遺傳型1參與遺傳信息的復(fù)

制和表達(dá)1

L一11

111

--------------------1

1堿基IA、G、C、T1A、G、C、U

1

L11

111

--------------------1

1戊糖1其戊糖為B—D—2一脫氧核糖1其戊糖為B—D

一核糖1

1_____________________11

111

--------------------1

1核甘酸/脫氧核甘酸|dAMP、dGMP、dCMP、dTMPIAMP、GMP、

CMP、UMP|

1i?

[例1]2001NO21A通常不存在RNA中，也不存在DNA中的堿基是

A.腺喋吟B.黃喋吟C.鳥(niǎo)喋吟

D.胸腺喀咤E.尿嘴嚏

2.核酸的組成'

核甘酸是組成核酸的基本單位。

喜=篙；卜甘1核甘酸一核酸

酸一（磷酸）一磷酸J

記憶：①上述組成記憶為“核.甘.酸”，“核”為核糖；“昔”記憶為堿基；“酸”為磷酸。

②由核（核糖）+甘（堿基）=核甘。“核”與“昔”之間的結(jié)合鍵為——糖甘鍵。

③由核苜+酸（磷酸）=核甘酸?！昂烁省迸c“酸”之間的結(jié)合鍵為——酯鍵。

④多個(gè)核甘酸組成核酸。''核甘酸"之間的連接鍵為——3',5'一磷酸二酯鍵。

【例2】2002N020A、1997：NO20A核酸中核甘酸之間的連接方式是

A.2'.3'.磷酸二酯鍵B.3',5'一磷酸二酯鍵c.2',5'一磷酸二酯鍵

D.1\5'一糖昔鍵E.氫鍵

3.核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)

核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指構(gòu)成核酸的核苜酸或脫氧核甘酸從5'-末端到3'一末端的排列順序,

也就是核甘酸序

列。由于核昔酸之間的差異在于堿基不同，因此核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)也就是它的堿基序列。

由于核酸分子具有方向性，規(guī)定它們的核甘酸或脫氧核甘酸的排列順序和書寫規(guī)則必須

是從5'一末端到

3'.末端。

核酸分子中的核糖（或脫氧核糖）和磷酸基團(tuán)共同構(gòu)成其骨架結(jié)構(gòu)，但不參與遺傳信息的

貯存和表達(dá)。

DNA和。RNA對(duì)遺傳信息的攜帶和傳遞，是依靠堿基排列順序變化而實(shí)現(xiàn)的。

162

第三部分生物化學(xué)

二、DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能

1..DNA的分子結(jié)構(gòu)及功能

~1

1IDNA一級(jí)結(jié)構(gòu)1DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)|DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)

1

1111

T

11指核甘酸的排列順序11指在雙螺旋結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一

1

?

1定義1|即‘DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)|

1

11即堿基排列順序1I步扭曲成超螺旋

1

1111

|①DNA是以基因的形式荷載遺傳信息，并作為基因復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的模板

功能

I②是生命遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是個(gè)體生命活動(dòng)的信息基礎(chǔ)

J

2.DNA中四種堿基組成的Chargaff規(guī)則

(1)腺喋吟與胸腺喀嚏的摩爾數(shù)相等，而鳥(niǎo)口票吟與胞喀嚏的摩爾數(shù)相等；

(2)不同生物種屬的DNA堿基組成不同；

(3)同?個(gè)體不同器官、不同組織的DNA具有相同的堿基組成。

這一規(guī)則暗示了DNA的堿基A與T、G與c是以某種相互配對(duì)的方式存在的。

3.Watson-Crick結(jié)構(gòu)模型(DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型)的要點(diǎn)

(l)DNA是反平行、右手螺旋的雙鏈結(jié)構(gòu)兩條多聚核苜酸鏈在空間上的走向呈反向平行。

一條鏈的走

向?yàn)?'_+3',另一條為3‘硝

兩條鏈圍繞著同一個(gè)螺旋軸形成右手螺旋結(jié)構(gòu)。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的直徑為2.3'7nm,

螺距為3.54nm。每

一螺旋有10.5個(gè)堿基對(duì)，每個(gè)堿基對(duì)之間的相對(duì)旋轉(zhuǎn)角度為36―每?jī)蓚€(gè)相鄰的堿基對(duì)平

面之間的垂直距

離為0.341"113q?注意：7版生物化學(xué)已更改許多數(shù)據(jù)。

在。DNA雙鏈結(jié)構(gòu)中，疏水的堿基位于雙鏈的內(nèi)側(cè)，而山脫氧核糖和磷酸基團(tuán)組成的

親水性骨架位于雙鏈

的外側(cè)。

(2)DNA雙鏈之間形成了互補(bǔ)堿基對(duì)兩條鏈的堿基間嚴(yán)格按A=T(2個(gè)氫鍵)、G；c(3個(gè)

氫鍵)配對(duì)

存在，因此A+G與c+T的比值為1。堿基對(duì)平面與雙螺旋結(jié)構(gòu)的螺旋軸垂直。

(3)疏水作用力和氫鍵共同維持著DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定相鄰的兩個(gè)堿基對(duì)平面在旋

進(jìn)過(guò)程中會(huì)彼

此重疊，由此產(chǎn)生了具有疏水性的堿基堆積力。這種堿基堆積力和互補(bǔ)鏈之間堿基對(duì)的氟鍵

共同維系著

DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，而且堿基堆積力對(duì)于雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定更為重要。

記憶：時(shí)間一長(zhǎng)，堿基互補(bǔ)規(guī)律很容易忘掉。其實(shí)，利用形象記憶就很簡(jiǎn)單!同學(xué)們仔細(xì)觀

察A=T、Gs

C,就會(huì)發(fā)現(xiàn)：G和C很相似，都是半圓，因此它們就能互補(bǔ)配對(duì)。

4.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性

右手螺旋結(jié)構(gòu)(B型.DNA)并不是自然界DNA分子的唯一存在方式，此外還有左手螺旋

結(jié)構(gòu)(z型?

DNA)和A型.DNAo

5.DNA右手螺旋結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)的d螺旋結(jié)構(gòu)的區(qū)別

IDNA右手螺旋結(jié)構(gòu)I蛋白質(zhì)的a螺旋結(jié)構(gòu)

1---------------------------1--------------------------------------------------------------------------------------1---------------------------------------------------------------

_________________1

1

1類型1屬于DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)1屜千蛋白后的一綴結(jié)構(gòu)

1

1___________11

111

4

1概念I(lǐng)為DNA兩條互補(bǔ)鏈的線性螺旋型延長(zhǎng)1為一條多肽鏈主鏈圍繞中心

軸螺旋式上升1

1___________?1

111

T

1螺旋方向1右手螺旋（順時(shí)針）1右手螺旋（順時(shí)針）

1

1_________11

111

4

1螺距|3.54nm,每周10.5對(duì)堿基I0.54nm,每周3.6個(gè)氨基

酸殘基1

1___________??

111

4

1外側(cè)1脫氧核糖和磷酸基團(tuán)骨架位于雙鏈外側(cè)1氨基酸側(cè)鏈伸向外側(cè)

1

L11

11I

4

1內(nèi)側(cè)1堿基位于雙鏈內(nèi)側(cè)1肽鏈位于內(nèi)側(cè)

6.DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)是超螺旋結(jié)構(gòu)

DNA雙鏈可以盤繞形成超螺旋結(jié)構(gòu)。當(dāng)盤繞方向與DNA雙螺旋方向相同時(shí)，其超螺旋結(jié)

構(gòu)稱為正超螺

163

2010考研西醫(yī)綜合輔導(dǎo)講義

旋；反之則為負(fù)超螺旋。DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)是在拓?fù)洚悩?gòu)醐參與下實(shí)現(xiàn)的。自然界的閉合

雙鏈DNA主要以

負(fù)超螺旋形成存在。

真核細(xì)胞的DNA以非常有序的形式存在于細(xì)胞核內(nèi)。核小體是染色質(zhì)的基本組成單位,

由DNA和5種

組蛋白共同構(gòu)成。兩個(gè)分子的組蛋白H2A、H2B、H3、H4分子構(gòu)成八聚體的核心組蛋白，

與DNA雙鏈形成核

小體的核心顆粒。核心顆粒之間再由DNA和組蛋白III構(gòu)成的連接區(qū)連接起來(lái)構(gòu)成染色質(zhì)細(xì)

絲。這是DNA

在核內(nèi)形成致密結(jié)構(gòu)的第一層次折疊，使DNA的體積壓縮了6?7倍。

DNA

冬之等染色質(zhì)細(xì)絲

壓縮6?7倍'一”

第2層次折疊

壓縮6倍

染色質(zhì)纖維空管j氣等染色質(zhì)超螺線管

1贏怎嘉魯嘉染色單體、組裝成染色體

【例3】I993N0137XDNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的堿基對(duì)主要是

A.腺噂吟一胸腺嗑唬B.胞喀嗡.鳥(niǎo)噪吟

C.尿喘唆一鳥(niǎo)噪吟D.腺喋吟一尿喘咤

【例4】2007.NO164A按照Chargaff規(guī)則，下列關(guān)于DNA堿基組成的敘述，正確的是

A.A與C的含量相等B.A+T=G+C

C.同一生物體，不同組織的DNA堿基組成不同D.不同生物來(lái)源的DNA,堿基組

成不同

【例5】2004N020A下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的敘述，正確的是

A.一條是左手螺旋，一條是右手螺旋B.雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，縱向靠氫鍵維系

C.A+T與G+C的比值為1D.兩條鏈的堿基間以共價(jià)鍵相連

E.磷酸、脫氧核糖構(gòu)成螺旋的骨架

【例6】2003N020A下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的敘述，不正確的是

A.兩股脫氧核甘酸鏈呈反向平行B.兩股鏈間存在堿基配對(duì)關(guān)系C.螺旋每周包含10

對(duì)堿基

D.螺旋的螺距為3.4nmE.DNA形成的均是左手螺旋結(jié)構(gòu)

【例712000N021A下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的敘述正確的是

A.由兩條完全相同的多核甘酸鏈繞同?中心軸盤旋成雙螺旋

B.--條鏈?zhǔn)亲笫致菪?，另一條鏈為右手螺旋C.A+G與c+T的比值為I

D.A+TijG+C的比值為1E.兩條鏈的堿基間以共價(jià)鍵相連

三、RNA的結(jié)構(gòu)與功能

1.RNA與DNA一般特性的比較

1

1IRNA的?般特性1DNA的一般特-―

1

L11

111

-----------------------1

1堿基IA、G、C、UIA、G、C、T

1

1________________11

111

-----------------------1

1戊糖1B-D一核糖1p-D一2-脫氧核糖

1

11

|1_11

-----------------------1

1核甘酸連接鍵I3',5'-磷酸二酯鍵I3',5'一磷酸二酯鍵

1

1ItRNA(2800)、mRNA(10，)|

1

1大小（分子量）1I.DNA分子較RNA分子大

得多（＞2X10。）1

1|rRNA(0.5~1.0X10?)|

1

1_______________11

111

---------------1

1形狀1單鏈無(wú)規(guī)卷曲（tRNA約。75%堿基配對(duì)）|雙螺旋結(jié)構(gòu)（堿基嚴(yán)格配對(duì)）

1

L1I

111

---------------1

1結(jié)合的物質(zhì)1rRNA與核蛋白體蛋白結(jié)合成核糖體|組蛋白

1

LII

111

---------------1

1對(duì)堿水解1敏感（RNA具有較強(qiáng)的酸性）|不敏感

1

|_1I

111

---------------1

1I除雙鏈病毒RNA外，無(wú)明確配對(duì)堿基|A=T、GzC

1

1堿基配對(duì)11

1

11tRNA可能含稀有堿基（占10%-20%）|不含稀有堿基

1

L11

111

---------------1

1分布1主要在胞質(zhì)中，胞核和線粒體中也有1主要在胞核內(nèi)，線粒體中也

有1

1_______________1