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附件1

保健食品中75種非法添加化學(xué)藥物的檢測

BJS201710

1范圍

本方法規(guī)定了保健食品中利血平、格列喹酮、羥基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、

格列美脲、豪莫西地那非、伐地那非、西地那非、那紅地那非、偽伐地那非、那莫西地那非、瑞

格列奈、紅地那非、格列吡嗪、洛伐他汀羥酸鈉鹽、尼莫地平、辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他汀、

美伐他汀、氨基他達(dá)拉非、他達(dá)拉非、佐匹克隆、尼索地平、脫羥基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地

平、格列波脲、尼群地平、羅格列酮、吡咯列酮、羅通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑侖、青藤

堿、呋塞米、咪達(dá)唑侖、格列齊特、勞拉西泮、酚酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑侖、扎來普

隆、氯氮卓、氫氯噻嗪、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那

敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛爾、N-單去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明、沙丁胺

醇、司可巴比妥、褪黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可樂定、異戊巴比妥、卡托普利、苯乙雙胍、

巴比妥、麻黃堿、丁二胍、氨甲環(huán)酸、二甲雙胍和煙酸的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。

本方法適用于片劑、口服液、硬膠囊和軟膠囊保健食品中的利血平、格列喹酮、羥基豪莫西

地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、格列美脲、豪莫西地那非、伐地那非、西地那非、那紅地那

非、偽伐地那非、那莫西地那非、瑞格列奈、紅地那非、格列吡嗪、洛伐他汀羥酸、尼莫地平、

辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他汀、美伐他汀、氨基他達(dá)拉非、他達(dá)拉非、佐匹克隆、尼索地平、

脫羥基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地平、格列波脲、尼群地平、羅格列酮、吡咯列酮、羅通定、醋

氯芬酸、硝苯地平、三唑侖、青藤堿、呋塞米、咪達(dá)唑侖、格列齊特、勞拉西泮、酚酞、二氧丙

嗪、氯硝西泮、阿普唑侖、扎來普隆、氯氮卓、氫氯噻嗪、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西

泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛爾、N-單去甲基西布曲明、

N,N-雙去甲基西布曲明、沙丁胺醇、司可巴比妥、褪黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可樂定、異戊

巴比妥、卡托普利、苯乙雙胍、巴比妥、麻黃堿、丁二胍、氨甲環(huán)酸、二甲雙胍和煙酸共75種非

法添加物質(zhì)的檢測，同樣適用于片劑、口服液、硬膠囊、軟膠囊類聲稱具有保健功效的食品中上

述75種物質(zhì)的檢測。

2原理

試樣經(jīng)甲醇提取后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測。

3試劑和材料

注：水為GB/T6682規(guī)定的一級水。

3.1試劑

3.1.1甲醇（CH3OH)：色譜純。

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3.1.2乙腈（CH3CN）：色譜純。

3.1.3甲酸（CH2O2）：質(zhì)譜級。

3.1.4乙酸銨（CH3COONH4）：質(zhì)譜級。

3.1.50.1%甲酸-10mmol/L乙酸銨水溶液：精密量取甲酸（3.1.3）1mL，稱取乙酸銨（3.1.4）0.771

g，用水溶解并定容至1000mL。

3.2標(biāo)準(zhǔn)品

利血平、格列喹酮、羥基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、格列美脲、豪莫西地那

非、伐地那非、西地那非、那紅地那非、偽伐地那非、那莫西地那非、瑞格列奈、紅地那非、格

列吡嗪、洛伐他汀羥酸鈉鹽、尼莫地平、辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他汀、美伐他汀、氨基他達(dá)

拉非、他達(dá)拉非、佐匹克隆、尼索地平、脫羥基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地平、格列波脲、尼群

地平、羅格列酮、吡咯列酮、羅通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑侖、青藤堿、呋塞米、咪達(dá)唑

侖、格列齊特、勞拉西泮、酚酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑侖、扎來普隆、氯氮卓、氫氯噻

嗪、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那敏、氯美扎酮、甲苯

磺丁脲、阿替洛爾、N-單去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明、沙丁胺醇、司可巴比妥、褪

黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可樂定、異戊巴比妥、卡托普利、苯乙雙胍、巴比妥、麻黃堿、丁

二胍、氨甲環(huán)酸、二甲雙胍和煙酸標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式和相對分

子量見附錄A表A.1，純度均≥98%。

3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

3.3.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：分別精密稱取利血平、格列喹酮、羥基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯

脲、格列美脲、豪莫西地那非、伐地那非、西地那非、那紅地那非、偽伐地那非、那莫西地那非、

瑞格列奈、紅地那非、格列吡嗪、洛伐他汀羥酸鈉鹽、尼莫地平、辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他

汀、美伐他汀、氨基他達(dá)拉非、他達(dá)拉非、佐匹克隆、尼索地平、脫羥基洛伐他丁、哌唑嗪、非

洛地平、格列波脲、尼群地平、羅格列酮、吡咯列酮、羅通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑侖、

青藤堿、呋塞米、咪達(dá)唑侖、格列齊特、勞拉西泮、酚酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑侖、扎

來普隆、氯氮卓、氫氯噻嗪、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西泮、西布曲明、文拉法辛、氯

苯那敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛爾、N-單去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明、沙

丁胺醇、司可巴比妥、褪黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可樂定、異戊巴比妥、卡托普利、苯乙雙

胍、巴比妥、麻黃堿、丁二胍、氨甲環(huán)酸、二甲雙胍和煙酸標(biāo)準(zhǔn)品（3.2）0.01g（精確至0.00001

g）于10mL容量瓶中，甲醇溶解并定容，得到濃度為1mg/mL的儲(chǔ)備液，-20℃避光貯存，有效

期3個(gè)月。

3.3.2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別精密量取儲(chǔ)備液（3.3.1）適量，用甲醇（3.1.1）稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，

其中利血平、格列喹酮、羥基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、格列美脲、豪莫西地那

非、伐地那非、西地那非、那紅地那非、偽伐地那非、那莫西地那非、瑞格列奈、紅地那非、格

列吡嗪、尼莫地平、辛伐他丁、氨氯地平、洛伐他丁、美伐他丁、氨基他達(dá)拉非、他達(dá)拉非、佐

匹克隆、尼索地平、脫羥基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地平、格列波脲、尼群地平、羅格列酮、吡

咯列酮、羅通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑侖、青藤堿、咪達(dá)唑侖、格列齊特、勞拉西泮、酚

酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑侖、扎來普隆、氯氮卓、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西

泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛爾、N-單去甲基西布曲明、

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N,N-雙去甲基西布曲明、沙丁胺醇、褪黑素、芬氟拉明、可樂定、卡托普利、苯乙雙胍、麻黃堿、

丁二胍、氨甲環(huán)酸和二甲雙胍濃度為10μg/mL，洛伐他汀羥酸鈉鹽、呋塞米、氫氯噻嗪、司可巴

比妥、苯巴比妥、異戊巴比妥、巴比妥和煙酸濃度為100μg/mL。再用初始流動(dòng)相（見表1）稀釋

成混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，上述物質(zhì)濃度分別為100ng/mL和1μg/mL，臨用時(shí)配制。

4儀器和設(shè)備

4.1高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。

4.2分析天平：感量分別為0.001g、0.0001g和0.00001g。

4.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000r/min。

4.4超聲波清洗器。

5分析步驟

5.1試樣制備

精密稱取樣品1g（精確至0.0001g），置于50mL容量瓶中，加甲醇（3.1.1）適量，超聲

提取15min，放冷至室溫，用甲醇（3.1.1）定容（若樣品中含有油脂，則將樣品提取液在-20℃

條件下放置24~48h，時(shí)間可視樣品是否澄清而定），5000r/min離心5min，上清液經(jīng)微孔濾膜

過濾(0.22μm，有機(jī)相)，取續(xù)濾液作為待測液。

5.2儀器參考條件

5.2.1色譜條件

a）色譜柱：C18柱，1.8μm，2.1×100mm，或性能相當(dāng)者。

b）流動(dòng)相：A為0.1%甲酸-10mmol/L乙酸銨（3.1.5），B為乙腈（3.1.2），參考梯度洗脫程序

見表1。

c）流速：0.3mL/min。

d）柱溫：40℃。

e）進(jìn)樣量：5μL。

表1參考梯度洗脫程序

時(shí)間/minA：0.1%甲酸-10mmol/L乙酸銨/%B：乙腈/%

09010

29010

2.16535

46535

4.16040

6.56040

72080

92080

9.11090

5.2.2質(zhì)譜條件

a）電離方式：電噴霧正負(fù)離子模式。

b）檢測方式：多反應(yīng)檢測（MRM）。

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c）霧化氣：N2。

d）干燥氣流速：8L/min。

e）噴霧電壓：500V。

f）氣流溫度：350℃。

g）毛細(xì)管電壓：3500V（+）3000V（-）。

h）鞘氣流速：11L/min。

i）鞘氣溫度：250℃。

j）定性離子對、定量離子、碎裂電壓、碰撞能量和離子化模式見表2。

表2非法添加化學(xué)藥物的主要質(zhì)譜參數(shù)

母離子子離子碎裂電壓碰撞能量

序號化合物離子化模式

（m/z）（m/z）（V）（eV）

609.2448.113528+

1利血平

609.2397.1*13524+

528403*1357+

2格列喹酮

52838613519+

505487*13520+

3羥基豪莫西地那非

50537713520+

50544813520+

4硫代艾地那非

505393*13520+

4953691356+

5格列苯脲

495169*13518+

4913521357+

6格列美脲

491126*13523+

48931113520+

7豪莫西地那非

489113*13520+

48929913520+

8伐地那非

489151*13520+

47537713520+

9西地那非

475311*13520+

46742013520+

10紅地那非

467396*13520+

460432*13520+

11偽伐地那非

46037713520+

46037713520+

12那莫西地那非

460329*13520+

45316213520+

13瑞格列奈

45386*13520+

45340613516+

14那紅地那非

453353*13524+

4463471357+

15格列吡嗪

446321*1357+

帶格式的:邊框:底端:(無框線)

445343*13510+

16洛伐他丁羥酸鈉鹽

44517313530+

419343*13510+

17尼莫地平

41930113520+

41928513520+

18辛伐他汀

419199*13520+

40929413510+

19氨氯地平

409238*13510+

40528513520+

20洛伐他汀

405199*13520+

391185*13520+

21美伐他汀

39115913520+

391269*13520+

22氨基他達(dá)拉非

39126213520+

39030213520+

23他達(dá)拉非

390268*13520+

389.2245*13510+

24佐匹克隆

389.221713520+

389239*13510+

25尼索地平

38919513520+

387199*13510+

26脫羥基洛伐他汀

38717313510+

384.1247.1*13528+

27哌唑嗪

384.113813528+

383.935213510+

28非洛地平

383.9338*13510+

367170*13510+

29格列波脲

36715213520+

36132913520+

30尼群地平

361315*13510+

358135*13523+

31羅格列酮

35810713523+

357134*13523+

32吡咯列酮

35711913523+

356.4192*13530+

33羅通定

356.416513520+

35525113510+

34醋氯芬酸

355215.8*13520+

347315*1352+

35硝苯地平

347245.91352+

343.1314.913528+

36三唑侖

343.1308*13524+

帶格式的:邊框:底端:(無框線)

330.1180.913530+

37青藤堿

330.158*13540+

329205*13530-

38呋塞米

32912613530-

326.1291*13524+

39咪達(dá)唑侖

326.1243.913528+

324127*13515+

40格列齊特

32411013519+

321.1302.913512+

41勞拉西泮

321.1275*13520+

319225*13530+

42酚酞

31910513530+

31716713530+

43二氧丙嗪

31786*13520+

316240.913530+

44氯硝西泮

316213.8*13540+

309.1281*13524+

45阿普唑侖

309.1274.113524+

306.126413520+

46扎來普隆

306.1236*13520+

300.1283*13512+

47氯氮卓

300.124113512+

296268.913520-

48氫氯噻嗪

296205*13520-

295.1267*13524+

49艾司唑侖

295.119213520+

287241*13520+

50奧沙西泮

287162.913530+

285.1257.113520+

51地西泮

285.1222.1*13528+

282.125413520+

52硝西泮

282.1236*13524+

28013913530+

53西布曲明

280125*13530+

278.2120.913520+

54文拉法辛

278.257.9*13510+

275.1230.1*13510+

55氯苯那敏

275.1166.913535+

274154*13520+

56氯美扎酮

27410313520+

27115513512+

57甲苯磺丁脲

27174*13512+

帶格式的:邊框:底端:(無框線)

267.119013516+

58阿替洛爾

267.1145*13524+

N-單去甲基西布曲26613913530+

59

明266125*13530+

N,N-雙去甲基西布25213913530+

60

曲明252125*13530+

24016613510+

61沙丁胺醇

240147.9*13520+

237194*1358-

62司可巴比妥

2378513520-

233.1174.2*13510+

63褪黑素

233.115913520+

232159*13530+

64芬氟拉明

23210913530+

231188*1354-

65苯巴比妥

2318513520-

230212.8*13522+

66可樂定

230159.613538+

225.1182*1354-

67異戊巴比妥

225.18513520-

2181721356+

68卡托普利

218116*13510+

20610513523+

69苯乙雙胍

20660*13515+

183.1140.1*1354-

70巴比妥

183.18513520-

16614813530+

71麻黃堿

166133*13530+

15860*13510+

72丁二胍

1585713520+

15895*13510+

73氨甲環(huán)酸

15867.113510+

1307113523+

74二甲雙胍

13060*13511+

1247813550+

75煙酸

12452*13550+

注：標(biāo)*為定量離子

5.3定性判定

按照上述條件測定待測液和混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，如果試樣待測液中色譜峰的保留時(shí)間與混合標(biāo)

準(zhǔn)使用液中某一組分保留時(shí)間一致（變化范圍在±2.5%之內(nèi)），試樣待測液中色譜峰定性離子對

的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)幕旌蠘?biāo)準(zhǔn)使用液相對豐度一致，相對豐度（k）偏差不超過表3規(guī)定的范

圍，則可判定為試樣中存在該成分。

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表3定性確證時(shí)相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度（%）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%

允許的最大偏差（%）±20±25±30±50

6檢出限

當(dāng)稱樣量為1g時(shí)，75種非法添加化學(xué)藥物的檢出限見表4。

表4非法添加化學(xué)藥物的檢出限

編號名稱口服液檢出限（μg/g)硬膠囊檢出限（μg/g)軟膠囊檢出限（μg/g)片劑檢出限(μg/g)

1利血平0.0240.220.0690.22

2格列喹酮0.0250.370.110.37

3羥基豪莫西地那非0.110.880.270.88

4硫代艾地那非0.0540.810.250.81

5格列苯脲0.0550.230.240.24

6格列美脲0.0230.330.100.33

7豪莫西地那非0.0360.530.160.53

8伐地那非0.0170.250.0780.25

9紅地那非0.230.830.260.83

10西地那非0.0250.380.120.38

11偽伐地那非0.0760.260.080.26

12那莫西地那非0.0351.80.261.8

13瑞格列奈0.0250.370.110.37

14那紅地那非0.060.880.270.88

15格列吡嗪0.0250.380.120.38

16洛伐他汀羥酸鈉鹽1.20.644.54.5

17尼莫地平0.0240.360.110.36

18辛伐他汀0.160.360.110.36

19氨氯地平0.0240.360.110.36

20洛伐他汀0.0430.350.340.35

21美伐他汀0.0330.490.420.49

22氨基他達(dá)拉非0.0410.610.190.61

23他達(dá)拉非0.030.450.140.45

24佐匹克隆0.0180.270.0840.27

25尼索地平0.0260.390.300.39

26脫羥基洛伐他汀0.100.640.170.64

27哌唑嗪0.0240.360.110.36

28非洛地平0.120.480.150.48

29格列波脲0.0490.640.170.64

30尼群地平0.490.320.260.49

31羅格列酮0.0280.410.130.41

32吡咯列酮0.0240.360.110.36

33羅通定0.0240.320.0920.32

34醋氯芬酸0.0250.350.110.35

帶格式的:邊框:底端:(無框線)

35硝苯地平0.0240.340.100.34

36三唑侖0.0240.320.0840.32

37青藤堿0.0350.330.100.33

38呋塞米9.47.02.79.4

39咪達(dá)唑侖0.0270.390.120.39

40格列齊特0.0230.340.10.34

41勞拉西泮0.0430.350.110.35

42酚酞0.0270.400.120.40

43二氧丙嗪0.0250.370.120.37

44氯硝西泮0.0350.380.120.38

45阿普唑侖0.0240.340.110.34

46扎來普隆0.0260.380.120.38

47氯氮卓0.0910.350.160.35

48氫氯噻嗪3.73.52.13.7

49艾司唑侖0.0270.40.120.40

50奧沙西泮0.0240.360.110.36

51地西泮0.0270.40.120.40

52硝西泮0.0240.360.110.36

53西布曲明0.0230.350.110.35

54文拉法辛0.0250.360.110.36

55氯苯那敏0.0240.350.110.35

56氯美扎酮0.390.860.260.86

57甲苯磺丁脲0.0250.370.110.37

58阿替洛爾0.0580.350.110.35

59N-單去甲基西布曲明0.0660.980.