…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷630考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖．以下相關(guān)敘述；正確的是（）

A.⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異B.③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C.④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶兩種酶參與2、如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路；下列敘述不正確的是（）

A.代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過(guò)程是④⑤B.代表中心法則內(nèi)容的是①②C.①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計(jì)，⑤代表DNA合成D.蛋白質(zhì)工程的目的是對(duì)基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)，通過(guò)基因合成或改造實(shí)現(xiàn)。3、下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是（）A.葉肉細(xì)胞脫分化后可形成定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞B.葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過(guò)程可形成愈傷組織C.融合植物葉肉細(xì)胞時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜D.葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出全能性4、某生物興趣小組的同學(xué)測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)小鼠的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行培養(yǎng)。下列說(shuō)法正確的是A.利用胃蛋白酶處理兩種肝組織塊后可得到肝細(xì)胞懸液B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞的呼吸C.甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過(guò)程中，乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D.該試驗(yàn)中用到的培養(yǎng)液也能用來(lái)培養(yǎng)乙肝病毒5、下列實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟荒軐?shí)現(xiàn)的是（）A.利用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)是否變性B.利用PCR技術(shù)快速檢測(cè)新冠病毒感染C.利用酵母菌和醋酸菌進(jìn)行果醋發(fā)酵D.利用核移植和胚胎移植繁育良種家畜6、下列關(guān)于試管嬰兒和克隆猴的敘述，正確的是（）A.都有很高的成功率B.都需進(jìn)行胚胎移植C.都屬于無(wú)性生殖D.體外受精和細(xì)胞核移植過(guò)程都發(fā)生了基因重組7、有研究人員體外誘導(dǎo)小鼠的皮膚細(xì)胞，獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)，并將這種iP5細(xì)胞放置在特殊的孵化器中培養(yǎng)，得到了一種類似原腸胚的結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)在，用iPS細(xì)胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.可用小分子化合物誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞B.特殊的孵化器可能模擬了子宮的特殊環(huán)境C.正常原腸胚的外胚層將發(fā)育成胎盤(pán)和胎膜D.利用自身體細(xì)胞誘導(dǎo)的iPS細(xì)胞治療，可避免免疫排斥反應(yīng)評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖；沒(méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化的磷酸酶，再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害9、格瓦斯是一種廣泛流傳于東歐的低度酒精飲料。制作過(guò)程：①將發(fā)酵面包制成的面包液、糖化液裝入發(fā)酵罐，加入保加利亞乳酸菌、酵母菌進(jìn)行發(fā)酵；②發(fā)酵液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的過(guò)濾；③過(guò)濾液經(jīng)5～8s迅速升溫到127℃進(jìn)行高溫殺菌，冷卻后即可飲用。酵母菌產(chǎn)生酒精的能力差異較大，其產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)。下列說(shuō)法正確的是（）A.保加利亞乳酸菌和酵母菌都能同時(shí)進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸B.面包液、糖化液可為微生物的生長(zhǎng)提供碳源、氮源以及水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C.若想得到產(chǎn)酒精能力比較強(qiáng)的酵母菌，可向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精進(jìn)行篩選D.過(guò)程③中瞬時(shí)高溫滅菌可使微生物蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)迅速破壞，從而達(dá)到滅菌效果10、為探究原生質(zhì)體制備的最佳溶壁酶反應(yīng)時(shí)間，研究人員在高滲溶液中進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的有（）

A.與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴(kuò)大親本的選擇范圍B.可用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化，檢測(cè)原生質(zhì)體的形成情況C.每隔一段時(shí)間，可取反應(yīng)液直接滴加到血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測(cè)，在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解11、黃粉蟲(chóng)可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲(chóng)腸道中分離、純化目的微生物的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是（）

A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長(zhǎng)期保存D.與傳統(tǒng)填埋、焚燒相比，黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)造成二次污染12、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵B.制作腐乳利用了微生物產(chǎn)生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在無(wú)氧條件下產(chǎn)生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在無(wú)氧條件下產(chǎn)生乙酸13、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說(shuō)法正確的是（）A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器B.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害或過(guò)敏的蛋白質(zhì)C.我國(guó)不反對(duì)治療性克隆，允許有限制地進(jìn)行克隆人實(shí)驗(yàn)D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問(wèn)題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物14、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見(jiàn)下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素15、克隆動(dòng)物常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合。世界首例體細(xì)胞克隆北極狼的供體細(xì)胞來(lái)自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來(lái)自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小C.供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞D.細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過(guò)程中發(fā)生了基因重組評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、生化武器散布途徑：將病原體_____或者通過(guò)_____、_____等散布到敵方，會(huì)對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。17、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。18、獲取目的基因的方法______、______、______19、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。20、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_(kāi)________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過(guò)適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。21、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____22、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)______。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共14分)23、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預(yù)防，簡(jiǎn)要過(guò)程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過(guò)_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術(shù)獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術(shù)還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開(kāi)始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗(yàn)證表達(dá)的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性；請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的檢測(cè)方案并預(yù)期檢測(cè)結(jié)果。

方案:_________________________________。

結(jié)果:_________________________________。24、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評(píng)卷人得分五、綜合題(共3題，共12分)25、人血清白蛋白（HSA）是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，具有重要的醫(yī)用價(jià)值。下圖是通過(guò)基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）為獲取HSA基因，首先提取人血細(xì)胞中的mRNA，利用_______________法合成總cDNA。再利用_______________技術(shù)擴(kuò)增HSA基因，該技術(shù)所用到的關(guān)鍵酶是_______________，擴(kuò)增得到的HSA基因_______________（填“含有”或“不含有”）啟動(dòng)子。

（2）HSA基因?qū)胧荏w細(xì)胞前，需要實(shí)施基因工程的核心步驟：_______________。

（3）途徑Ⅱ選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞具有繁殖快、遺傳物質(zhì)少等優(yōu)點(diǎn)。但相比于途徑1，利用大腸桿菌獲得的rHSA存在無(wú)活性的缺點(diǎn)，試從細(xì)胞結(jié)構(gòu)的角度進(jìn)行分析_______________。26、基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?；ㄒ蛉狈λ{(lán)色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開(kāi)藍(lán)色花，因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細(xì)胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中，以期獲得藍(lán)色矮牽牛新品種，該過(guò)程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHI、Sau3AI、HindIII識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)圖1質(zhì)粒中沒(méi)有顯示的結(jié)構(gòu)是______，啟動(dòng)子的功能是______________。

(2)基因工程中除質(zhì)粒外，______也可以作為運(yùn)載體。若用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用______兩種限制酶來(lái)切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，理由是________。

(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌，最終成功導(dǎo)入藍(lán)色素基因的農(nóng)桿菌，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是_______________。

(4)檢測(cè)轉(zhuǎn)座酶F35H基因是否成功在普通矮牽牛細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，常采用的檢測(cè)技術(shù)是______。

(5)通過(guò)基因工程，將轉(zhuǎn)座酶F35H基因?qū)肫胀ò珷颗Ｖ校@得藍(lán)色矮牽?；ㄐ缕贩N的育種原理是__________________。相比傳統(tǒng)的花卉育種方法，利用基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)是_________（答出2點(diǎn)即可）。27、果膠甲酯酶具有催化水解果膠的作用；為獲得高產(chǎn)；高純度的胞外果膠甲酯酶，下圖表示某科研小組設(shè)計(jì)的黑曲霉工程菌的構(gòu)建和發(fā)酵流程圖。

回答下列問(wèn)題：

(1)科研小組從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得果膠甲酯酶基因序列后，需要根據(jù)果膠甲酯酶基因設(shè)計(jì)_______________，以擴(kuò)增出大量果膠甲酯酶基因片段。利用農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化，在構(gòu)建重組基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將果膠甲酯酶基因插入Ti質(zhì)粒上的______________之間，確保侵染黑曲霉菌后能成功表達(dá)。為提高構(gòu)建重組表達(dá)載體的成功率，在構(gòu)建重組表達(dá)載體過(guò)程中加入緩沖液，其目的是______________。

(2)獲得轉(zhuǎn)基因的黑曲霉后，可以通過(guò)______________獲得純培養(yǎng)物，該過(guò)程需要______________作為對(duì)照。為判斷高產(chǎn)果膠甲酯酶黑曲霉工程菌是否構(gòu)建成功，可對(duì)單位量的轉(zhuǎn)基因黑曲霉進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)，即通過(guò)檢測(cè)并比較轉(zhuǎn)基因黑曲霉_______________。因黑曲霉自身某種蛋白質(zhì)的物理和化學(xué)性質(zhì)與果膠甲酯酶相似，造成提取產(chǎn)物純度不高，可通過(guò)_______________；避免該蛋白產(chǎn)生，實(shí)現(xiàn)獲得高純度的果膠甲酯酶。

(3)獲得的黑曲霉工程菌需先進(jìn)行活化和______________培養(yǎng)后才能接種到發(fā)酵罐中進(jìn)行大型發(fā)酵，以縮短發(fā)酵時(shí)間。發(fā)酵過(guò)程需保持______________（至少寫(xiě)兩點(diǎn)）；適宜pH、充足的氧氣等條件；保證發(fā)酵過(guò)程不受雜菌污染和菌體能正常生長(zhǎng)。

(4)發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液進(jìn)行離心處理，取______________進(jìn)行果膠甲酯酶的分離和純化工作。在分離過(guò)程中使用一定濃度的硫酸銨處理發(fā)酵液后獲得有活性的果膠甲酯酶沉淀物，原因是在一定濃度的硫酸銨條件下______________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

基因工程的工具酶包括限制酶和DNA連接酶。農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物；對(duì)大部分單子葉植物沒(méi)有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需要進(jìn)行檢測(cè)和鑒定，才能確定其是否導(dǎo)入或成功表達(dá)。

【詳解】

A；⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明抗蟲(chóng)基因表達(dá)了；即發(fā)生了可遺傳變異，A正確；

B；③侵染植物細(xì)胞后；重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到植物細(xì)胞的染色體上，B錯(cuò)誤；

C；若受體細(xì)胞的染色體上含抗蟲(chóng)基因；并不代表該基因就一定成功表達(dá)，因此不能確定⑤是否表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀，C錯(cuò)誤；

D；重組質(zhì)粒的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶參與；D錯(cuò)誤。

故選A。2、D【分析】【分析】

1.蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求．（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）

2.蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

【詳解】

A；④過(guò)程是根據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)相應(yīng)的氨基酸序列；進(jìn)而通過(guò)⑤過(guò)程推測(cè)應(yīng)有的基因序列，進(jìn)而合成相關(guān)的基因，即代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過(guò)程是④⑤，A正確；

B；圖中①代表轉(zhuǎn)錄；②代表翻譯，顯然，屬于中心法則內(nèi)容的是①②，B正確；

C；根據(jù)蛋白質(zhì)的設(shè)計(jì)思路可知；圖中①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計(jì)，⑤代表DNA合成，C正確；

D；蛋白質(zhì)工程的目的是對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)；通過(guò)基因合成或修飾實(shí)現(xiàn)，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性；其過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織（高度液泡化，無(wú)定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松；無(wú)規(guī)則的組織），愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株。

【詳解】

A；葉肉細(xì)胞脫分化后可形成無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞愈傷組織；A錯(cuò)誤；

B；葉肉細(xì)胞經(jīng)脫分化過(guò)程可形成愈傷組織；B錯(cuò)誤；

C；融合植物葉肉細(xì)胞時(shí)；應(yīng)先去掉細(xì)胞壁，C錯(cuò)誤；

D；葉肉細(xì)胞wanzhe以形成一個(gè)完整的植株；表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細(xì)胞貼壁．細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

【詳解】

A、處理肝組織塊獲得到肝細(xì)胞懸液用胰蛋白酶，A錯(cuò)誤；

B、細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2，CO2用于維持培養(yǎng)液的pH值，B錯(cuò)誤；

C、正常細(xì)胞不具有無(wú)限增殖能力，培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)停止分裂，C正確；

D；病毒只能寄生在活細(xì)胞中；不能用培養(yǎng)液直接培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

故選C。5、A6、B【分析】【分析】

試管嬰兒是精子和卵細(xì)胞進(jìn)行體外受精；然后通過(guò)胚胎早期培養(yǎng)；胚胎移植技術(shù)獲得，屬于有性生殖的范疇；而克隆猴是利用細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)獲得的，屬于無(wú)性生殖的范疇，并且體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性。

【詳解】

A；試管嬰兒和克隆猴的成功率都比較低；A錯(cuò)誤；

B；試管嬰兒和克隆猴的獲得都需要利用胚胎移植技術(shù)；B正確；

C；試管嬰兒是精子和卵子進(jìn)行體外受精；然后通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等獲得的，屬于有性生殖的范疇，C錯(cuò)誤；

D；體外受精和細(xì)胞核移植都沒(méi)有涉及基因重組；D錯(cuò)誤。

故選B。7、C【分析】【詳解】

A；科學(xué)家已嘗試采用多種方法來(lái)制備iPS細(xì)胞；包括借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中，直接將特定蛋白質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞，A爭(zhēng)??；

B；根據(jù)題干“將這種iP5細(xì)胞放置在特殊的孵化器中培養(yǎng)；得到了一種類似原腸胚的結(jié)構(gòu)”，推測(cè)特殊的孵化器可能模擬了子宮的特殊環(huán)境，B正確；

C；原腸胚外胚層發(fā)育成神經(jīng)系統(tǒng)、感覺(jué)器官、表皮及其附屬結(jié)構(gòu)；囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞；將發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)，C錯(cuò)誤；

D；iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞；將它移植回人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的；A正確；

B；根據(jù)題意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程，B正確；

C；在治療中；應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時(shí)注射，C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體特異性強(qiáng)；能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害，D正確。

故選ABD。9、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟欠纸鉃槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌為嚴(yán)格厭氧菌；只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸，A錯(cuò)誤；

B；面包液、糖化液主要成分為糖類；也含有其他物質(zhì)，可為微生物的生長(zhǎng)提供碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，B正確；

C；酵母菌產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)；利用選擇培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精篩選出產(chǎn)酒精能力比較強(qiáng)的酵母菌，C正確；

D；過(guò)程③中瞬時(shí)高溫會(huì)破壞微生物的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)；進(jìn)而將微生物殺死達(dá)到滅菌效果，D正確。

故選BCD。10、A:B:D【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】

A；與傳統(tǒng)的雜交育種相比；植物體細(xì)胞的雜交能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，因此，與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴(kuò)大親本的選擇范圍，A正確；

B；原生質(zhì)體為顯微結(jié)構(gòu)；可用光學(xué)顯微鏡來(lái)檢測(cè)原生質(zhì)體的形成情況，B正確；

C；每隔一段時(shí)間；從試管中吸出反應(yīng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)前，需將試管輕輕振蕩數(shù)次，目的是使培養(yǎng)液中的原生質(zhì)體均勻分布，減少誤差，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測(cè)；隨著溶壁酶反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，原生質(zhì)體濃度先升高后降低，可推測(cè)在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解，導(dǎo)致原生質(zhì)體的濃度降低，D正確。

故選ABD。11、B:D【分析】【分析】

1；分離菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的篩選:

①依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。

②實(shí)例：PCR技術(shù)過(guò)程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶；就是從熱泉中篩選出來(lái)的Taq細(xì)菌中提取出來(lái)的。

(2)實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選:

①原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)；溫度、pH等）；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

2；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

(1)稀釋涂布平板法（間接）：

①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。

②通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。

(2)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【詳解】

A；富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基；不應(yīng)含有瓊脂，A錯(cuò)誤；

B；分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源；B正確；

C；轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時(shí)保存；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可用甘油管藏的方法，C錯(cuò)誤；

D；如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)，D正確。

故選BD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；在無(wú)氧條件下；乳酸菌能將葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵，A正確；

B；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正確；

C；酵母菌在無(wú)氧條件下；可通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在無(wú)氧條件下產(chǎn)生酒精，C正確；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧條件下產(chǎn)生醋酸，D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來(lái)；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療。

【詳解】

A；對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，堅(jiān)決禁止生物武器，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因要注意基因安全；對(duì)外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過(guò)敏的蛋白質(zhì)，B正確；

C；中國(guó)對(duì)于克隆人的態(tài)度是不反對(duì)治療性克??；禁止進(jìn)行克隆人的實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問(wèn)題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗(yàn)，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見(jiàn)細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。15、A:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細(xì)胞來(lái)自野生北極狼；卵母細(xì)胞來(lái)自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細(xì)胞的細(xì)胞核；操作簡(jiǎn)單且對(duì)供體細(xì)胞核損傷小，同時(shí)注射的位置是卵母細(xì)胞外的透明帶，然后誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞融合，對(duì)卵母細(xì)胞的損傷小，B正確；

C；供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后；還需要電融合法等誘導(dǎo)才能使供體細(xì)胞進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，C錯(cuò)誤；

D；細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過(guò)程是有絲分裂過(guò)程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥竣?直接②.食物③.生活必需品17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫(kù)人工合成PCR技術(shù)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過(guò)適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲(chóng)性狀。四、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共14分)23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄；起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。在體外將DNA擴(kuò)增的技術(shù)是PCR，中文名稱為多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；該過(guò)程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開(kāi)始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，還應(yīng)選擇一對(duì)方向相反的引物，且與模板的3'端結(jié)合，據(jù)圖可知，應(yīng)選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細(xì)胞內(nèi)是否合成了由目的基因控制的蛋白質(zhì)，使用抗原-抗體雜交法檢測(cè)，為了檢驗(yàn)表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，本實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是唯一的，因此本實(shí)驗(yàn)結(jié)果是出現(xiàn)雜交帶?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達(dá)的S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)雜交帶24、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變，說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異五、綜合題(共3題，共12分)25、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：圖中Ⅰ表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞；培育轉(zhuǎn)基因植物；Ⅱ表示采用感受態(tài)細(xì)胞法將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞。

2；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

【詳解】

（1）利用mRNA為模板合成cDNA的過(guò)程為逆（反）轉(zhuǎn)錄；獲得的cDNA一般采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，該技術(shù)需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶，以催化合成DNA子鏈。由于啟動(dòng)子具有（物種及組織）特異性，所以構(gòu)建在胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體時(shí)；需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子，而不能選擇其他物種和組織細(xì)胞的啟動(dòng)子，故擴(kuò)增得到的HSA基因不含有啟動(dòng)子。

（2）HSA基因?qū)胧荏w細(xì)胞前；需要實(shí)施基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟，此步驟是基因工程的核心步驟。

（3）大腸桿菌是原核生物，具有繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少等優(yōu)點(diǎn)，常作為基因工程的受體細(xì)胞；但是大腸桿菌沒(méi)有生物膜系統(tǒng)，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)rHSA進(jìn)一步修飾加工，獲得的rHSA可能沒(méi)有生物活性。

【點(diǎn)睛】

本題的關(guān)鍵是識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)和題干要求準(zhǔn)確答題?！窘馕觥糠崔D(zhuǎn)錄PCR熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）不含有基因表達(dá)載體的構(gòu)建大腸桿菌無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)rHSA進(jìn)一步修飾加工26、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序：1；目的基因的獲取：原核基因采取直接分離獲得、真核基因是人工合成；人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法、化學(xué)合成法、PCR技術(shù)擴(kuò)