…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年仁愛科普版選擇性必修3生物上冊月考試卷92考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、研究人員利用農桿菌侵染水稻葉片；經(jīng)組培；篩選最終獲得了一株水稻突變體。利用不同的限制酶處理突變體的總DNA、電泳；并與野生型的處理結果對比，得到圖所示放射性檢測結果。（注：T-DNA上沒有所用限制酶的酶切位點）對該實驗的分析錯誤的是（）

A.檢測結果時使用了放射性標記的T-DNA片段做探針B.該突變體產(chǎn)生的根本原因是由于T-DNA插入到水稻核DNA中C.不同酶切顯示的雜交帶位置不同，說明T-DNA有不同的插入位置D.若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結果不準確2、為純化菌種；在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結果如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實驗結果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色3、干細胞是一種尚未充分分化的未成熟的細胞，醫(yī)學家們正在嘗試利用干細胞治療一些頑疾，下列說法不正確的是（）A.各種組織干細胞分化形成不同組織細胞是基因選擇性表達的結果非B.利用干細胞治療某些頑疾，是因為干細胞具有再生各種組織，器官的潛能C.同一生物個體中，神經(jīng)細胞與干細胞所含有的遺傳物質不同的D.干細胞包括成體干細胞和胚胎干細胞4、近年來基因工程的發(fā)展非常迅猛，下列不屬于基因工程應用的是（）A.克隆猴“中中”和“華華”B.利用乳腺生物反應器生產(chǎn)藥物C.制造一種能分解石油的“超級細菌”D.制造一種能產(chǎn)生干擾素的工程菌5、孟德爾說：“任何實驗的價值和效用；取決于所使用材料對于實驗目的的適合性?！毕铝袑嶒灢牧线x擇不適合的是（）

A.用洋蔥鱗片葉表皮觀察細胞的質壁分離和復原現(xiàn)象B.用洋蔥根尖分生區(qū)觀察細胞有絲分裂C.用洋蔥鱗片葉提取和分離葉綠體中的色素D.用洋蔥鱗片葉粗提取DNA6、下列關于生物工程相關知識的敘述有幾項是正確的（）

①在基因工程操作中為了獲得重組質粒；必須用相同的限制性內切酶，露出的黏性末端可以不同。

②只要B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞；就能產(chǎn)生單克隆抗體。

③若要生產(chǎn)轉基因抗病水稻；可將目的基因先導入到大腸桿菌中，再轉入水稻細胞中。

④植物體細胞雜交；能克服遠源雜交不親和的障礙，培育出的新品種是二倍體。

⑤基因治療主要是對具有缺陷的體細胞進行全面修復。

⑥誘導細胞融合之前，需將抗原反復注射給實驗小鼠，目的是獲得產(chǎn)生單一抗體的效應B細胞A.1項B.2項C.3項D.4項7、下列有關生物工程的敘述；錯誤的有（）

①基因工程的核心步驟是構建基因表達載體②蛋白質工程可通過直接改造蛋白質的結構從而改變其功能③克隆羊的培育涉及細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術④PCR技術需要利用限制性內切核酸酶打開DNA雙鏈⑤利用動物細胞培養(yǎng)技術和細胞融合技術可以制備單克隆抗體⑥利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時，全程都需要光照A.①②⑤B.①②⑤C.①②⑤D.①②⑤①③⑤8、某地的野生玉米中含有一種產(chǎn)生抗蟲毒蛋白的基因（來自蘇云金芽孢桿菌）。下列敘述錯誤的是（）A.通過誘變育種也可以獲得含有抗蟲毒蛋白的玉米植株B.將抗蟲毒蛋白基因導入葉綠體中，可以防止基因污染C.用PCR技術檢測野生玉米中是否含有抗蟲毒蛋白基因無需掌握其全部堿基序列D.以DNA作為遺傳物質、共用一套遺傳密碼是抗蟲毒蛋白基因在玉米細胞中表達的基礎評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、下列有關現(xiàn)代生物工程技術應用的敘述，錯誤的是（）A.“前面造林，后面砍林”的現(xiàn)象違背了系統(tǒng)整體性原理B.設計試管嬰兒性別會引起性別比例失調，違背倫理道德C.中國政府對于克隆技術的態(tài)度是不反對治療性克隆，可有限制的進行生殖性克隆D.由于存在生殖隔離，大田種植轉基因抗旱、抗除草劑農作物不存在生物安全性問題10、關于我國對轉基因技術的方針，敘述正確的是（）A.我國對轉基因技術的方針是隨著國家的政治、經(jīng)濟、科學發(fā)展水平的提升不斷變化的B.研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新C.推廣上要慎重，做到確保安全D.管理上要嚴格，堅持依法監(jiān)管11、下列關于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯誤的是（）A.精子在獲能液中培養(yǎng)的目的是使精子獲取能量B.注射到囊胚腔中的胚胎干細胞可以參與個體器官的發(fā)育C.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)，注射相關激素有促進超數(shù)排卵的作用D.分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質，因此發(fā)育成的個體沒有形態(tài)學差異12、下列關于DNA粗提取與鑒定的實驗敘述不正確的是（）A.獲取雞血時，容器中應先加入適量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA對高溫耐受性差，故提取時需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，當出現(xiàn)析出物時停止加水13、驅蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達到驅蚊且對人體無害的效果。驅蚊草是把天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體進行誘導融合培育而成的。下列關于驅蚊草培育的敘述，錯誤的是（）A.驅蚊草的培育屬于細胞工程育種，優(yōu)點是克服了遠緣雜交不親和的障礙B.驅蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，無細胞脫分化和再分化的過程D.驅蚊草培育利用了植物體細胞雜交技術，育種原理是基因突變14、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對白色污染進行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化目的微生物的過程，相關敘述正確的是（）

A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長期保存D.與傳統(tǒng)填埋、焚燒相比，黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會造成二次污染15、關于現(xiàn)代生物工程技術應用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.對轉基因植物的外源DNA要認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進行克隆人實驗D.一旦發(fā)現(xiàn)轉基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物16、下列有關PCR的敘述，正確的有（）A.PCR所需引物和體內DNA復制所需引物不同B.引物長度和復性溫度均會影響PCR擴增的特異性C.PCR產(chǎn)物電泳時的遷移速率與DNA分子的大小有關，與凝膠的濃度無關D.PCR預變性的目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲。19、在____________的溫度范圍內，DNA的雙螺旋結構解體，雙鏈分開，這過程成為__________。20、什么是生物武器？簡述生物武器的危害。__________21、我國是一個愛好和平的國家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國家。我國政府對生物武器的態(tài)度是什么？我們?yōu)槭裁凑J同這種態(tài)度？__________22、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關資料，分析和歸納這些資料__________。評卷人得分四、實驗題(共3題，共12分)23、GDNF是一種多肽類的神經(jīng)營養(yǎng)因子；對損傷的神經(jīng)細胞有營養(yǎng)和保護作用，可用于運動神經(jīng)細胞損傷的治療。

（1）培養(yǎng)運動神經(jīng)細胞：接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的______，以防止污染；當培養(yǎng)的運動神經(jīng)細胞達到一定數(shù)量時，使用______處理；進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）研究GDNF對運動神經(jīng)細胞生長的影響：將（1）得到的細胞；平均分成4組進行處理，得到實驗結果如下表所示．

GDNF對運動神經(jīng)細胞生長的影響。

。分組處理細胞突起的平均數(shù)量（個）細胞突起的平均長度（μm）AGDNF0ng/mL176120．12BGDNF50ng/mL217141．60CGDNF100ng/mL241160．39DGDNF200ng/mL198147．68①該實驗的對照組是_______。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知_______。

③基于上述研究和所學的生物學知識，你能為治療運動神經(jīng)細胞損傷提供的方法有______。24、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會發(fā)生落葉、落果，嚴重時葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因導入柑橘可獲得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉基因植株的過程：

①基因表達載體必需的結構除復制原點、啟動子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時，Ti質粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導愈傷組織生根、生芽的先后順序為______。

⑤從個體生物學水平鑒定柑橘再生植株時可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設計引物，擴增后利用______進行檢測；結果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。25、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調控序列，為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構建表達載體，再分別導入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導；B2是Spl的結合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結合，與Sp1共同調控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結果如圖2．據(jù)實驗結果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調控功能，實驗設計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設是_____。評卷人得分五、綜合題(共1題，共2分)26、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫??；其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強，影響最顯著?？蒲腥藛T為建立抗SSB抗體全自動定量檢測的磁微?；瘜W發(fā)光試劑，利用基因工程技術獲得重組SSB蛋白，流程如下，請分析回答：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要____________酶。通過PCR技術擴增SSB基因的前提是要測定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是____________。

(2)為確保與PET41a質粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有____________酶切位點。在PCR過程中，第____________輪循環(huán)產(chǎn)物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。

(3)獲得含SSB基因的重組質粒后，進行如下實驗切割原質粒和重組質粒，獲得片段大小如右表（1kb=1000堿基對）（注意：DNA片段大小與圖中所畫比例一致）。SSB基因的長度為____________。限制酶EcoRIBamHI和XhoI原質粒8.1kb2.7kb、5.4kb重組質粒3.4kb、5.0kb未做該處理

(4)③過程目的是將重組質粒轉染到大腸桿菌內，并接種于添加____________的培養(yǎng)基上；收集菌落進行鑒定，將陽性菌落進一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。

(5)為檢測重組質粒表達情況及重組蛋白與抗體結合能力，科研人員通過注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進行如下實驗，請完成下表：。實驗步驟實驗操作分組取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機均分成兩組。實驗處理實驗組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對照組①____________，連續(xù)三次。飼養(yǎng)在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。②___第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進行檢測。結果分析與對照組相比，若抗體檢測呈③____________，則表明重組SSB蛋白具有與相應抗體高度結合的能力。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、C【分析】【分析】

將目的基因插入到農桿菌的Ti質粒的T-DNA上；通過農桿菌的轉化作用，就可以使目的基因進入植物細胞，并將其插入到植物細胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。它是將目的基因導入植物細胞采用最多的方法。

放射性標記的T-DNA片段做探針的目的是檢測受體細胞的DNA中有無目的基因。均顯示一條雜交帶；說明在這一突變體中，T-DNA插入位置是唯一的。

【詳解】

A；圖示結果突變體中出現(xiàn)放射性；說明使用了放射性標記的T-DNA片段做探針對目的基因進行檢測，A正確；

B；該突變體產(chǎn)生的根本原因是T-DNA攜帶目的基因插入到水稻的DNA中；B正確；

C；不同酶切雜交帶位置不同；說明不同酶切后帶有T-DNA的片段長度不同（即：不同的酶切位點距離T-DNA的遠近不同），C錯誤；

D；由圖所示放射性檢測結果可知；野生型無放射性雜交條帶，若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結果不準確，D正確。

故選C。

【點睛】

本題通過放射性同位素標記方法檢測目的基因的方法，考查對基礎知識的運用，以及對實驗結果的分析和判斷能力。2、B【分析】【分析】

分析平板結果可知；采用的接種方法為平板劃線法，且劃線順序是Ⅰ區(qū)；Ⅱ區(qū)、Ⅲ區(qū)，可以看到Ⅲ區(qū)中出現(xiàn)了單菌落。

【詳解】

A；倒平板后無需晃動；A錯誤；

B；Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒有出現(xiàn)單菌落；說明細菌數(shù)量太多，故應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；

C；出現(xiàn)單菌落即達到了菌種純化的目的；C錯誤；

D；剛果紅是一種染料；它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解。

后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應；D錯誤。

故選B。3、C【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺。

2；胚胎干細胞的特點：具有胚胎細胞的特性；體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造。

3；胚胎干細胞的主要用途是：

①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；

②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸；丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；

③可以用于治療人類的某些頑疾；如帕金森綜合癥；糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；

④培育各種組織器官；用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。

【詳解】

A；細胞分化是基因選擇性表達的結果；A正確；

B；干細胞具有發(fā)育的全能性；可以分化成成年動物的各種組織、器官，故可利用干細胞治療某些頑疾，B正確；

C；同一個體的神經(jīng)細胞和干細胞均是由受精卵通過細胞分裂和細胞分化形成的；遺傳物質相同，C錯誤；

D；干細胞包括成體干細胞和胚胎干細胞；D正確。

故選C。4、A【分析】【分析】

體細胞核移植技術又稱體細胞克隆；原理就是細胞核的全能性，是動物細胞工程技術常用的手段。

基因工程技術又稱基因拼接技術；原理是基因重組。在醫(yī)藥方面的應用：通過轉基因微生物生產(chǎn)抗生素；疫苗、激素類藥物；在環(huán)境保護方面，通過轉基因技術得到超級細菌，降解石油；在轉基因動物方面，可以通過生物反應器產(chǎn)生藥物等。

乳腺生物反應器：將所需目的基因構建入載體；加上適當?shù)恼{控序列，轉入動物胚胎細胞，使轉基因動物分泌的乳汁中含有所需要藥用蛋白。

動物乳腺生物反應器的優(yōu)點：1；產(chǎn)品質量穩(wěn)定；2、產(chǎn)品成本低；3、研制開發(fā)周期短；4、無污染；5、經(jīng)濟效益顯著。

【詳解】

A；克隆猴“中中”和“華華”應用了動物細胞核移植技術；A正確；

B；利用乳腺生物反應器生產(chǎn)藥物；這屬于動物基因工程的應用，B錯誤；

C；“超級細菌”能分解石油；是基因工程在微生物方面的應用，C錯誤；

D；產(chǎn)生干擾素的工程菌；屬于基因工程在醫(yī)藥方面的應用，D錯誤。

故選A。5、C【分析】【分析】

洋蔥是比較好的實驗材料：

①洋蔥根尖分生區(qū)細胞觀察植物細胞的有絲分裂；

②洋蔥鱗片葉外表皮細胞；色素含量較多，用于觀察質壁分離和復原；

③洋蔥的綠葉做葉綠體中色素的提取和分離實驗；葉肉細胞做細胞質流動實驗。

④洋蔥的內表皮細胞顏色淺；由單層細胞構成；適合觀察DNA、RNA在細胞中的分布狀況。

【詳解】

A；洋蔥鱗片葉外表皮細胞的液泡為紫色；便于觀察細胞的質壁分離和復原現(xiàn)象，A正確；

B；洋蔥根尖分生區(qū)細胞分裂旺盛；可以用來觀察細胞有絲分裂，B正確；

C；洋蔥鱗片葉不含葉綠體；不能用來提取和分離葉綠體中的色素，C錯誤；

D；洋蔥鱗片葉細胞有細胞核且顏色淺；可以用來粗提取DNA，D正確。

故選C。6、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與漿細胞結合；經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細胞并經(jīng)專一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體；

基因治療是指把正?；驅氩∪梭w內有缺陷的細胞中；使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的。

【詳解】

①為了獲得重組質粒；一般使用同一種的限制性內切酶切割目的基因和運載體，從而露出相同的黏性末端，①錯誤；

②雜交瘤細胞使用的是已免疫的B細胞（漿細胞）與骨髓瘤細胞融合；②錯誤；

③要生產(chǎn)轉基因抗病水稻；可采用農桿菌轉化法，即將目的基因先導入到農桿菌中，再轉入水稻細胞中，③錯誤；

④植物體細胞雜交；能克服遠源雜交不親和的障礙，培育出的新品種是異源多倍體，④錯誤；

⑤基因治療是把正?；驅氩∪梭w內有缺陷的細胞中；使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的。例：將腺苷酸脫氨酶（ADA）基因導入患者的淋巴細胞，治療復合型免疫缺陷癥，⑤錯誤。

⑥誘導細胞融合之前；需將抗原反復注射給實驗小鼠，目的是獲得產(chǎn)生單一抗體的效應B細胞，從而為獲得能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細胞做準備，⑥正確。

故選A。

【點睛】7、B【分析】【分析】

1；基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達。

【詳解】

①基因工程的核心步驟是第二步；即構建基因表達載體，①正確；

②蛋白質工程可通過直接改造基因的結構從而改變蛋白質功能；②錯誤；

③克隆羊的培育涉及細胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術；③正確；

④PCR技術需要利用高溫打開DNA雙鏈；④錯誤；

⑤利用動物細胞培養(yǎng)技術和細胞融合技術可以制備單克隆抗體；⑤正確；

⑥利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒的植株時；并非全程都需要光照，如脫分化等過程不需要光照，⑥錯誤。

故選B。8、A【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；生物安全問題：①轉基因植物擴散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉基因植物競爭能力強；可能成為“入侵的外來物種”；③轉基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體；④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。

【詳解】

A；該抗蟲毒蛋白的基因來自蘇云金芽孢桿菌；玉米中沒有相應的等位基因，無法誘變成功，A錯誤；

B、根據(jù)細胞質遺傳的特點可知，將抗蟲基因導入到玉米細胞的線粒體或葉綠體中可以防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的基因污染，B正確；

C；用PCR技術擴增抗蟲毒蛋白的基因需掌握其全部堿基序列；而只是檢測野生玉米中是否含有抗蟲毒蛋白基因，只需掌握部分特異性的序列即可檢測，C正確；

D；蘇云金芽孢桿菌和玉米細胞都是以DNA作為遺傳物質且共用一套遺傳密碼；遵循中心法則，故其抗蟲毒蛋白基因能在玉米細胞中表達，D正確。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)9、A:C:D【分析】【分析】

現(xiàn)代生物工程技術主要包括基因工程；細胞工程、胚胎工程、生態(tài)工程等。

系統(tǒng)整體性原理即“1+1>2”；指系統(tǒng)各組分之間要有適當?shù)谋壤P系，才能順利完成能量；物質、信息等的轉換和流通，并實現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果；整體性原理即進行生態(tài)工程建設時，不但要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，更重要的是考慮到經(jīng)濟和社會等系統(tǒng)的影響力，即要考慮自然、經(jīng)濟、社會的整體影響。

設計試管嬰兒是指通過體外受精獲得較多胚胎后；利用植入前胚胎遺傳學診斷技術，選擇合適的胚胎進行移植。

由于科學發(fā)展水平的限制；科學家對基因的結構；相互作用、調控機制等的了解相當有限，且轉移的基因不少是異種基因，其插入宿主基因組的部位往往是隨機的，轉基因生物的安全性在食物安全、生物安全和環(huán)境安全三個方面存在爭論。

【詳解】

A；在進行林業(yè)工程建設時；一方面要號召農民種樹，另一方面要考慮貧困地區(qū)農民的生活問題，如果農民生計得不到保障，隨時會發(fā)生“前面造林，后面砍林”的現(xiàn)象，故該現(xiàn)象違背了整體性原理，A錯誤；

B；設計試管嬰兒若是進行遺傳病基因檢測；則有利于預防遺傳病的發(fā)生，但單純選擇胎兒性別是違法的，會引起性別比例失調，并違背倫理道德，B正確；

C；中國政府禁止生殖性克隆人；堅持“四不原則”（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），但是不反對治療性克隆人，C錯誤；

D；大田種植轉基因抗旱、抗除草劑農作物也可能存在生物安全性問題；如產(chǎn)生新的病原體、威脅其他生物的生存、產(chǎn)生“超級雜草”等，D錯誤。

故選ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對待轉基因技術的利弊；正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

我國對轉基因技術的方針是一貫的；明確的；不會隨著國家的政治、經(jīng)濟、科學發(fā)展水平的提升不斷變化的，就是研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴格，堅持依法監(jiān)管，A錯誤，BCD正確。

故選BCD。11、A:D【分析】【分析】

1；胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質；胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

2；胚胎干細胞的特點：具有胚胎細胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。

【詳解】

A；精子在獲能液中培養(yǎng)的目的是使精子獲能；不是獲取能量，A錯誤；

B；注射到囊胚腔中的胚胎干細胞可以分化形成各種組織；因此可以參與個體器官的發(fā)育，B正確；

C；小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)；注射相關激素（促性腺激素）有促進超數(shù)排卵的作用，C正確；

D；分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質；由于生物體的性狀還受環(huán)境因素的影響，因此發(fā)育成的個體可能會存在形態(tài)學差異，D錯誤。

故選AD。

【點睛】12、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的實驗原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點，選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精．利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性．洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；檸檬酸鈉可以防止血液凝固；因此獲取雞血時，容器中應先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固，加入適量的NaCl溶液目的是維持血細胞的形態(tài)，A錯誤；

B；DNA對高溫的耐受性比蛋白質強；DNA不溶于冷酒精，而其他雜質可溶于酒精，則用體積分數(shù)為95%的冷酒精能提純DNA，B錯誤；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白質；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNA，C正確；

D；當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，直至析出物不再增加為止，D錯誤。

故選ABD。13、C:D【分析】【分析】

植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞；進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。在進行植物體細胞雜交時需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，使用化學方法（聚乙二醇）或物理方法誘導原生質體融合，不能用滅活的病毒誘導?？筛鶕?jù)植物細胞的質壁分離和復原鑒定雜種細胞是否再生細胞壁，從而確定原生質體融合是否完成。植物體細胞雜交的意義：在克服遠源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅蚊草是把天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體進行誘導融合培育而成的；采用了植物體細胞雜交技術，屬于細胞工程育種，其優(yōu)點是能克服遠緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體的融合可采用化學法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術，因此有細胞脫分化和再分化的過程，C錯誤；

D；驅蚊草培育利用了植物體細胞雜交技術；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯誤。

故選CD。14、B:D【分析】【分析】

1；分離菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的篩選:

①依據(jù)：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求；到相應的環(huán)境中去尋找。

②實例：PCR技術過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶；就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取出來的。

(2)實驗室中目的菌株的篩選:

①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)；溫度、pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。

2；統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：

(1)稀釋涂布平板法（間接）：

①當樣品的稀釋庋足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。

②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

(2)利用顯微鏡直接計數(shù)。

【詳解】

A；富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基；不應含有瓊脂，A錯誤；

B；分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源；B正確；

C；轉接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時保存；對于需要長期保存的菌種，可用甘油管藏的方法，C錯誤；

D；如果對白色污染進行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會，D正確。

故選BD。15、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構成了嚴重威脅。

2；轉基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；轉基因要注意基因安全；對外源DNA要進行認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質，B正確；

C；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克隆；禁止進行克隆人的實驗，C錯誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉基因生物出現(xiàn)了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。16、A:B:D【分析】【分析】

PCR原理：在高溫作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

A；PCR所需引物是一小段DNA；體內DNA復制所需引物是一小段RNA，A正確；

B；由于引物的序列具有特異性；所以PCR擴增的特異性一般是由引物的特異性決定的，當復性溫度高時，只有引物與模板堿基匹配程度高，才能結合到模板上，而引物與模板匹配度低的區(qū)域則不能結合，所以引物長度和復性溫度均會影響PCR擴增的特異性，B正確；

C；PCR產(chǎn)物電泳時的遷移速率與DNA分子的大小有關和凝膠的濃度有關；C錯誤；

D；在循環(huán)之前；常要進行一次預變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率，D正確。

故選ABD。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉錄法化學合成法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2019、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性20、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭，則可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。21、略

【分析】【詳解】

我國是一個愛好和平的國家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國家，如在抗日戰(zhàn)爭中就遭受到了日軍發(fā)動的細菌戰(zhàn)的傷害，由于生物武器致病能力強、攻擊范圍廣，因而我們深知生物武器不僅能對我國、甚至會對整個人類造成毀滅性的災難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散?！窘馕觥课覈且粋€愛好和平的國家，由于生物武器致病能力強、攻擊范圍廣，生物武器不僅能對我國、甚至會對整個人類造成毀滅性的災難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為：

在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。22、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學研究，掌握防范的措施和防范，實現(xiàn)最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。四、實驗題(共3題，共12分)23、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的具體過程：取胚胎或幼齡動物的器官或組織--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個細胞--制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

（1）

動物細胞培養(yǎng)過程中；接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的抗生素，以防止污染；當培養(yǎng)的運動神經(jīng)細胞達到一定數(shù)量時，使用胰蛋白酶處理，進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）

①分析表格可知；A組的GDNF濃度為0，作為實驗的對照組。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知；與對照組比較可知，實驗組中的細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都更大，在一定范圍內，且隨GDNF濃度增加，細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都在增加，因此由表格中的數(shù)據(jù)可知，GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有促進作用；在一定范圍內，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯。

③從實驗可知；GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有一定的促進作用，因此在治療運動神經(jīng)細胞損傷時，可以通過藥物/注射治療；基因治療、動物細胞融合制備單抗等方法治療運動神經(jīng)細胞損傷。

【點睛】

本題考查了動物細胞工程的有關知識，要求考生能夠識記動物細胞培養(yǎng)過程，能夠利用對照實驗的觀點分析表格數(shù)據(jù)，難度適中?！窘馕觥浚?）抗生素胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

（2）A組GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有促進作用；在一定范圍內，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯藥物/注射治療、基因治療、動物細胞融合制備單抗等24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達載體上除有復制原點；啟動子、終止子、目的基因外；還有標記基因（便于篩選目的基因）；

②農桿菌Ti質粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細胞；

④先誘導生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上，進一步誘導形成試管苗；

⑤在個體生物學水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設計引物，擴增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進行檢測；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因為沒有導入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因為導入植物細胞的目的基因不能轉錄或轉錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質沒有活性等。【解析】(1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標記基因攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細胞先誘導生芽，再誘導生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導入植物細胞的目的基因不能表達（或不能轉錄，轉錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質沒有活性等，合理即可）沒有導入目的基因25、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導其表達水平升高，當用兩種調控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結合；突變型探針不能與NF-Y結合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結合；根據(jù)第2組和第3組結果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結合位點野生型探針能與NF-Y結合，根據(jù)第4組結果，突變型探針不能與NF-Y結合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結合。故可以解釋為：結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標記探針；NF-Y和NF-