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關(guān)鍵詞:AnnexinV/ANXA5蛋白,RecombinantHumanAnnexinV(ANXA5),重組人AnnexinV新手必看|AnnexinV/ANXA5重組蛋白在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。AnnexinV作為鈣離子依賴型磷脂結(jié)合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV常作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。早期凋亡檢測利用特征,通過熒光素(AbFluor405、488、555、647)或者生物素標記AnnexinV即可簡單快速地直接檢測出細胞早期凋亡情況。AnnexinV-AbFluor?488/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Cat#PRP3003)對誘導凋亡的Hela細胞熒光顯微鏡檢測效果。實驗結(jié)果分析根據(jù)上圖熒光染色結(jié)果,我們可以判斷,只有綠色熒光的細胞,為凋亡早期細胞,此時僅發(fā)生膜外翻,仍具有完整的細胞膜結(jié)構(gòu),PI無法穿透細胞膜對核染色。只有紅色熒光的細胞為凋亡晚期的死細胞,此時細胞膜結(jié)構(gòu)消失,PI將核染為紅色。同時含有紅綠兩種熒光的細胞為凋亡中晚期細胞,此時細胞膜通透性發(fā)生改變,但其結(jié)構(gòu)仍然存在AnnexinV-AbFluor?488結(jié)合至外翻的磷脂酰絲氨酸(PS)對膜標記綠色熒光,PI可以進入細胞對核標記紅色熒光。將AnnexinV與AbFluor?488熒光染料結(jié)合,可以對活細胞和死細胞進行區(qū)分。可以用于檢測藥物誘導、病毒感染等引起的細胞凋亡。此外,AnnexinV還參與許多其他生物過程,包括炎癥反應、免疫應答、血管生成等。例如,AnnexinV可以通過調(diào)節(jié)細胞骨架結(jié)構(gòu),影響細胞的運動和遷移;通過調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導通路,影響細胞的生長和分化等。Abbkine重組人膜連蛋白A5(AnnexinV/ANXA5)產(chǎn)品優(yōu)勢特點配套復溶buffer每管凍干粉產(chǎn)品配套一支復溶buffer(1mL),讓實驗操作簡便快捷。高純度使用SDS檢測,純度在98%以上。低內(nèi)毒素通過LAL法測定,每微克蛋白內(nèi)毒素含量<1EU。凍干粉形式產(chǎn)品由無菌的PBS(pH7.4)凍干,易于儲存,穩(wěn)定性好。來源明確來自人源AnnexinV(P08758)(Met1-Asp320)E.coli表達蛋白。AnnexinV檢測早期凋亡原理在正?;罴毎?,PS位于細胞膜的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡的早期,PS可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。利用早期凋亡這一特征,通過熒光素(AbFluor405、488、555、647)或者生物素標記AnnexinV即可簡單快速地直接檢測出細胞早期凋亡
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