第十九章中藥及其制劑分析概論沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)院80K藥物分析概述1中藥的鑒別2中藥的檢查項(xiàng)目與內(nèi)容3中藥及制劑中成分的含量測(cè)定和質(zhì)量整體控制4目錄CONTENTS沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論概述1第一節(jié)CONTENTS沈陽藥科大學(xué)沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策中藥及其制劑的生產(chǎn)和使用有中醫(yī)理論的指導(dǎo)中藥及其制劑的質(zhì)量有多環(huán)節(jié)多因素的影響中藥及其制劑的成分有復(fù)雜多變的特點(diǎn)中藥不同工藝和不同制劑中同一成分的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有不同要求沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策1中藥及其制劑的生產(chǎn)和使用有中醫(yī)理論的指導(dǎo)中藥是以中醫(yī)學(xué)理論體系的術(shù)語表達(dá)其性味、功效和使用規(guī)律，并且按中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)其臨床應(yīng)用的傳統(tǒng)藥物。中藥制劑分析是以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，應(yīng)用現(xiàn)代分析理論和方法，研究中藥制劑質(zhì)量的一門應(yīng)用學(xué)科。

1）運(yùn)用整體觀理論對(duì)中藥進(jìn)行化學(xué)成分的定性輪廓分析；

2）運(yùn)用組方的“君臣佐使”理論對(duì)制劑中君藥及貴重藥中的主要成分進(jìn)行定量分析；

3）運(yùn)用中藥藥性理論，針對(duì)中藥藥性的化學(xué)表征發(fā)展科學(xué)的分析方法。沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策2中藥及其制劑的質(zhì)量有多環(huán)節(jié)多因素的影響中藥材的種類繁多、成分復(fù)雜、產(chǎn)地分散、替代品（代用品）多，加之生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)、加工炮制等因素，造成其所含化學(xué)成分及臨床療效的差異；而中藥制劑又受到生產(chǎn)工藝、包裝運(yùn)輸、貯藏等因素的影響，質(zhì)量控制環(huán)節(jié)更為復(fù)雜。因此，我們不僅要從中藥的品種基源、生長(zhǎng)環(huán)境、采收時(shí)間、加工炮制、生產(chǎn)工藝、包裝材料、貯藏運(yùn)輸?shù)雀鱾€(gè)方面進(jìn)行嚴(yán)格把關(guān)，還要建立健全科學(xué)的中藥質(zhì)量分析體系來滿足實(shí)際生產(chǎn)、市場(chǎng)流通及臨床應(yīng)用的需要。沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策3中藥及其制劑的成分有復(fù)雜多變的特點(diǎn)單一植（動(dòng)）物中含有多類不同結(jié)構(gòu)的多種成分

植（動(dòng)）物由于發(fā)生二次代謝過程，通過不同生物合成途徑產(chǎn)生了多類不同結(jié)構(gòu)的多種成分。如：1）大黃中包括蒽醌類衍生物、蒽酮類衍生物、二苯乙烯類、鞣質(zhì)類等多種類型化合物；2）人參中含有幾十種三萜皂苷類成分，它們都有相同或類似的母核，同事人參中又有黃酮類、多糖及揮發(fā)油等多類成分。中藥成分的復(fù)雜性構(gòu)成了中藥功效的多樣性，這是中藥常具有多方面功效或多種藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是中藥與化學(xué)合成藥品的根本區(qū)別。沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策3中藥及其制劑的成分有復(fù)雜多變的特點(diǎn)不同來源中藥中的同一待測(cè)成分含量差異巨大

由生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)、生長(zhǎng)年限及部位差異等因素造成。1）不同植物來源中藥的相同成分含量差異顯著：如大黃、麻黃、黨參、百部、細(xì)辛等均有三種植物來源，而不同植物種間化學(xué)成分的含量有差異；2）不同產(chǎn)地中藥的相同成分含量差異顯著：中藥普遍存在的問題；

3）不同采收期中藥的相同成分含量差異顯著：不同采收期植物代謝水平不同，如丹參中丹參酮11、12月含量最高，薄荷中薄荷腦在秋季葉變黃時(shí)含量最高；

4）不同生長(zhǎng)年限和不同藥用部位中藥的相同成分含量差異顯著：人參中的野山參生長(zhǎng)年限很長(zhǎng)，而栽培的園參生長(zhǎng)年限短。沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策3中藥及其制劑的成分有復(fù)雜多變的特點(diǎn)中藥在煎煮炮制和制劑過程中化學(xué)成分有質(zhì)和量的變化

1）方劑在水煎煮過程中，有些成分會(huì)結(jié)合形成單味藥中不含的新成分，有些成分會(huì)分解；2）某些難溶或微溶于水的成分隨水溫升高溶解度增大；

3）某些藥材中的黃酮苷和香豆素苷均極微溶于水，但隨水溫升高溶解度增大；

4）當(dāng)群藥共煎時(shí)，某些溶出的成分會(huì)相互作用而產(chǎn)生各種化學(xué)反應(yīng)；

5）當(dāng)含鞣質(zhì)的中草藥與含生物堿的藥材共煎煮時(shí)，除少數(shù)特殊生物堿外，大多數(shù)生物堿皆能與鞣質(zhì)發(fā)生反應(yīng)生成大分子鹽而發(fā)生沉淀。沈陽藥科大學(xué)一、中藥的特色與分析特點(diǎn)和對(duì)策4中藥不同工藝和不同制劑中同一成分的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有不同要求制劑工藝及輔料會(huì)對(duì)有效成分產(chǎn)生影響。中藥制劑的劑型繁多，有丸、散、片、合、酒、酊、膏、露、栓等多種劑型，使用的輔料各不相同，多種輔料的應(yīng)用增加了分析的復(fù)雜度和難度。針對(duì)不同劑型，應(yīng)制定相應(yīng)合理的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。沈陽藥科大學(xué)二、中藥及其制劑的分類與質(zhì)量分析要點(diǎn)1中藥材和飲片藥材是中藥的生產(chǎn)原料，藥材質(zhì)量控制是中藥生產(chǎn)過程中質(zhì)量保證的首要環(huán)節(jié)。飲片系指藥材經(jīng)過炮制后可直接用于中醫(yī)臨床或制劑生產(chǎn)的處方藥。顯微鑒定是藥材和飲片的特色鑒別方法，是簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)的直接分析方法。ChP2010收載?；瘜W(xué)顯色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、光譜鑒別不適于中藥的鑒別，不作為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。藥材和飲片的含量測(cè)定應(yīng)強(qiáng)調(diào)專屬性，不要選擇廣泛存在于多種藥材中的成分。質(zhì)量控制手段：指紋譜和特征譜

中藥指紋圖譜：色譜指紋圖譜（HPLC|、GC、TLC等），光譜指紋圖譜及脫氧核糖核酸指紋圖譜等。沈陽藥科大學(xué)二、中藥及其制劑的分類與質(zhì)量分析要點(diǎn)2植物油脂和提取物植物油脂和提取物系指從植物、動(dòng)物中制得的揮發(fā)油、油脂、有效部位和有效成分。用水或乙醇作溶劑提取制成的流浸膏、浸膏或干浸膏、含有一類或數(shù)類有效成分的有效部位和含量達(dá)到90%以上的單一有效成分均稱為提取物。僅有少部分直接用于臨床，大部分用于中藥制劑的原料。一般是針對(duì)中藥中的某一類或單一成分提取而得到，因此分析方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)專屬性。沈陽藥科大學(xué)二、中藥及其制劑的分類與質(zhì)量分析要點(diǎn)3中藥成方和單方制劑丸劑

1）含有處方中某些藥材細(xì)粉，可采用顯微組織觀察作為鑒別方法之一。

2）檢查項(xiàng)目：水分(過多易霉變)、重(裝)量差異、溶散時(shí)限、微生物限度檢查

3）含量測(cè)定：按君臣佐使方劑配伍原則，選擇君藥、貴重藥、毒性大等藥物中的成分測(cè)定，注意蜂蜜等輔料對(duì)測(cè)定的影響。散劑

1）散劑為藥材的粉末，適宜采用顯微鑒別的方法；

2）檢查項(xiàng)目：粒度、外觀均勻度、水分和裝量差異、裝量、無菌、微生物限度檢查等；

3）理化鑒別或含量測(cè)定時(shí)，需用溶劑將有效成分提取出后進(jìn)行；

4）分析方法可與藥材相同。沈陽藥科大學(xué)二、中藥及其制劑的分類與質(zhì)量分析要點(diǎn)3中藥成方和單方制劑顆粒劑

1）只有含藥材細(xì)粉的顆粒劑才可采用顯微組鑒別的方法；

2）檢查項(xiàng)目：粒度、水分、溶化性、裝量差異、裝量、微生物限度檢查；

3）含量測(cè)定：HPLC等色譜方法。合劑與口服劑

1）ChP2010規(guī)定，合劑不得有酸敗、異臭、產(chǎn)生氣體或其他變質(zhì)現(xiàn)象；

2）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一般應(yīng)制訂相對(duì)密度、pH檢查項(xiàng)目，單劑量罐裝的合劑(口服液)應(yīng)進(jìn)行裝量檢查；

3）合劑中溶劑水和矯味劑蔗糖及其他附加劑對(duì)檢查常有干擾，測(cè)定前用有機(jī)溶劑從制劑中萃取出待測(cè)組分再檢查；

4）若其他共存組分有干擾，用柱色譜或其他純化方法處理。其他中藥制劑沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法1取樣與樣品保存多采用估計(jì)取樣，即將整批中藥抽出一部分具有代表性的供試贗品進(jìn)行分析、觀察，得出規(guī)律性“估計(jì)”的方法。取樣注意：

1）取樣要具有一定的代表性：基本原則是均勻、合理；

2）嚴(yán)格按照規(guī)定取樣方法進(jìn)行取樣沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法1取樣與樣品保存中藥材和飲片取樣法

1）抽樣前，核對(duì)品名、產(chǎn)地、規(guī)格等級(jí)及包件式樣，檢查包裝完整性、清潔程度及有無水跡、霉變或其他物質(zhì)污染等情況；2）從同批藥材包件中抽取供檢驗(yàn)樣品的原則：總包件數(shù)＜5，逐件取樣；5-99件，隨機(jī)抽取5件；100-1000件，按5%比例取樣；超過1000，超過部分按1%比例取樣；貴重藥材，不論多少逐件取樣。

3）每一包件至少在2-3個(gè)不同部位各取樣品1份；

4）將抽取樣品混勻，即為抽取樣品總量（超過檢驗(yàn)用量數(shù)倍時(shí)，可按四分法再取樣）；

5）最終抽取供檢驗(yàn)樣品量不少于檢驗(yàn)所需用量的3倍，1/3用于實(shí)驗(yàn)室分析，1/3用于復(fù)核，1/3留樣保存。沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法1取樣與樣品保存中藥制劑取樣法取樣量至少為檢測(cè)用量的3倍，貴重藥可酌情取樣。1）粉狀中藥制劑：取樣100g，混勻，按四分法取供試量；

2）液體中藥制劑：于洋200ml；

3）固體中成藥：片劑200片，丸劑10丸，膠囊不得少于20個(gè)；

4）注射劑：2次取樣，配置后在灌注、熔封、滅菌前取樣1次，滅菌后1次，已封好的安瓿取樣200支；

5其他視情況而定隨機(jī)取樣。沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

1）超聲提取法超聲波具有助溶作用，操作簡(jiǎn)便，不需加熱，速度快，僅需數(shù)十分鐘。①由于超聲提取過程中溶劑可能會(huì)有一定的損失，所以用作含量測(cè)定時(shí)，應(yīng)于超聲振蕩前先稱定重量，提取完畢后，放冷至室溫，再稱重，并補(bǔ)足減失的重量，濾過后，取續(xù)濾液備用。②用于藥材粉末的提取時(shí)，由于組分是由細(xì)胞內(nèi)逐步擴(kuò)散出來，速度較慢，加溶劑后宜先放置一段時(shí)間，再超聲振蕩提取。沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

2）回流提取法①在加熱條件下組分溶解度增大，溶出速度加快，有利于提取。②主要用于固體制劑的提取，但不利于熱不穩(wěn)定或具有揮發(fā)性的組分。③提取速度快但操作稍繁瑣。3）連續(xù)回流提取法：使用索氏提取器連續(xù)進(jìn)行提取，提取效率高。索氏提取器沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

4）萃取法：主要用于液體制劑中測(cè)定組分的提取分離，注意防止和消除乳化。

①萃取溶劑的選擇：正丁醇用于皂苷類，醋酸乙酯用于黃酮類，氯仿用于生物堿類，乙醚、石油醚用于揮發(fā)油；②水相pH的選擇：酸性成分——比其pKa低1～2個(gè)pH單位，堿性成分——比其pKa高1～2個(gè)pH單位。

5）水蒸氣蒸餾法：適用于揮發(fā)性組分的提取，組分應(yīng)對(duì)熱穩(wěn)定。

6）超臨界流體萃取法沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

6）超臨界流體萃取法超臨界流體：是指當(dāng)壓力和溫度物質(zhì)的臨界點(diǎn)時(shí)，所形成的單一相態(tài)。常用的超臨界流體

物質(zhì)臨界溫度(℃)臨界壓力(kPa)優(yōu)點(diǎn)CO2317390較低的臨界溫度、惰性、無毒、純凈、價(jià)廉N2O367290NH313211300沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

6）超臨界流體萃取法裝置圖：沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品提取

6）超臨界流體萃取法超臨界流體特點(diǎn)：

①具有與液體相似的密度：具有與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力；

②溶質(zhì)在其中擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似：具有傳質(zhì)快，提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，提取完全一般僅需數(shù)十分鐘；

③表面張力為零：很容易滲透到樣品的里面，帶走測(cè)定組分；

④選擇性強(qiáng)：通過改變萃取的條件，如溫度、壓力等，可以選擇性的萃取某些組分；

⑤在通常狀態(tài)下即成為氣體：萃取后溶劑立即變?yōu)闅怏w而逸出，容易達(dá)到濃集的目的。沈陽藥科大學(xué)三、中藥分析用樣品制備方法2中藥分析用樣品的制備樣品的分離和純化提取后作進(jìn)一步處理，以除去干擾組分的干擾。主要方法有：萃取法，柱色譜法等中藥的鑒別2第二節(jié)CONTENTS沈陽藥科大學(xué)沈陽藥科大學(xué)鑒別試驗(yàn)的重要性：中藥及其制劑的鑒別可以通過確認(rèn)其中所含藥味的存在或某些特征成分的檢出而達(dá)到鑒別的目的。目前部分中藥尚無含量測(cè)定項(xiàng)目，因此，鑒別就成為中藥制劑質(zhì)量控制的一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。中藥及其制劑鑒別藥味的選取原則

1）單一制劑直接選取單一藥味進(jìn)行鑒別，復(fù)方制劑按君臣佐使依次選擇；

2）藥味較多時(shí)，首選君藥、臣藥、貴重藥、毒性藥進(jìn)行鑒別研究；

3）凡有原粉入藥者應(yīng)做顯微鑒別，有顯微鑒別的可同時(shí)進(jìn)行其它方法鑒別；

4）原則上處方中每一藥味均應(yīng)鑒別，選擇盡量多的藥味制訂在標(biāo)準(zhǔn)中，最少超過處方的1/3藥味。鑒別方法沈陽藥科大學(xué)顯微鑒別法性狀鑒別法010203理化鑒別法04色譜鑒別法沈陽藥科大學(xué)利用外觀、形狀及感官性質(zhì)等特征作為鑒別的依據(jù)。如藥材和飲片的形狀、大小、色澤、表面特征、質(zhì)地、折斷面特征以及氣味等；中藥制劑的外觀及內(nèi)容物的形狀、顏色、氣味等，均可作為描述的內(nèi)容。性狀鑒別是評(píng)價(jià)藥材及其制劑質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。一、性狀鑒別法掌握各類藥材的一般形態(tài)規(guī)律和形態(tài)特一點(diǎn)，并參照國(guó)家藥典、藥品標(biāo)準(zhǔn)和中藥鑒定學(xué)等有關(guān)專著所描述的性狀遵循藥材鑒定通則規(guī)定操作，就能正確鑒定藥材真?zhèn)巍Ｉ蜿査幙拼髮W(xué)二、顯微鑒別法光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡鑒別：

1）應(yīng)用：①藥材及炮制品的外形鑒別特征不明顯或外形相似難于鑒別而組織構(gòu)造不同時(shí)；②藥材破碎或呈粉末不易用肉眼辨認(rèn)或區(qū)分時(shí)；③含原藥材粉末的中藥制劑；④處方中主要藥味及化學(xué)成分不清楚或尚無化學(xué)鑒別法。

2）處方中多味藥物共同具有的顯微特征不能作為鑒別特征。多來源藥材應(yīng)選擇其共有的顯微特征。顯微鑒別法系指用顯微鏡對(duì)藥材切片、粉末、解離組織或表面制片及含飲片粉末的制劑中飲片的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。顯微特征應(yīng)明顯、易查見，否則可能做出假陰性的判定。沈陽藥科大學(xué)二、顯微鑒別法顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法：

1）一般可取藥材切片或粉末，中成藥取粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀物，以及特殊的顏色變化，作為鑒別特征。

2）該法可以確定基礎(chǔ)品種中特殊化學(xué)成分的存在及在組織中的分布。例1：黃連：纖維素鮮黃色左金丸均含石細(xì)胞：不能采用吳茱萸：腺毛例2：例：黃連粉末+水+稀鹽酸黃色結(jié)晶沈陽藥科大學(xué)微量升華法適宜于一些具有升華性成分的中藥材及其制劑的鑒別?；瘜W(xué)鑒別反應(yīng)

1）礦物藥的主要成分為無機(jī)化合物，可用化學(xué)方法鑒別

2）含有莨菪堿的顛茄草、華山參等的鑒別

3）有機(jī)成分的鑒別三、理化鑒別法顯色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)易被植物中眾多成分干擾，現(xiàn)被薄層色譜法代替；但在礦物藥及一些特殊鑒別反應(yīng)中仍有使用。沈陽藥科大學(xué)薄層板：最多的是硅膠G板，也可另加0.2%～0.5%的CMC作為黏合劑，可用軟鋁筆在板上做標(biāo)記；能經(jīng)受一般的化學(xué)試劑處理，如用含濃硫酸的顯色劑處理后，可將酸在水中洗去，然后烘干保存。四、色譜鑒別法色譜鑒別法具有分離度好，靈敏度高，專屬性強(qiáng)，應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)，特別適用于中藥及其制劑的鑒別。色譜法常用的方法有紙色譜法，薄層色譜法，氣相色譜法，高效液相色譜法和高效毛細(xì)管電泳法等。薄層色譜法沈陽藥科大學(xué)薄層色譜法顯色方法：紫外燈下觀察熒光斑點(diǎn)；選用顯色劑供試品溶液的制備一份：+鹽酸至pH3樣品粉末濾液+乙醚

一份：+碳酸鈉至pH11

提取液殘?jiān)?乙醇供試品溶液三、理化鑒別法粉碎煮沸水過濾回收乙醚溶解沈陽藥科大學(xué)薄層色譜法色譜條件的選擇考慮如何在規(guī)定條件下將檢品制成清晰、圓整、比移值穩(wěn)定和可重復(fù)的色譜圖以便比較。

1）固定相選擇：使用最多的是硅膠G、硅膠GF254等，生物堿類（氧化鋁板）、黃酮類和酚類（聚酰胺板）、氨基酸（纖維素板）；

2）展開系統(tǒng)選擇：無水乙醇-苯（1：4）、苯-氯仿（1：3）、丙酮-甲醇（1：1）；

3）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：應(yīng)達(dá)到規(guī)定的檢測(cè)靈敏度、分離度和重復(fù)性要求。

三、理化鑒別法沈陽藥科大學(xué)薄層色譜法對(duì)照物的選擇

1）原則：①有對(duì)照品的用對(duì)照品作對(duì)照；②無對(duì)照品的用對(duì)照藥材；③無對(duì)照品和對(duì)照藥材的用藥材作對(duì)照；

2）對(duì)照物：有效成分、有效部位或?qū)φ账幉?。顯色與檢視方法三、理化鑒別法沈陽藥科大學(xué)薄層色譜法測(cè)定方法

1）鑒別：分別取適宜濃度供試品、對(duì)照品或?qū)φ账幉娜芤?，在同一薄層板點(diǎn)樣，展開檢視，供試品溶液所顯主斑點(diǎn)顏色(或熒光)位置與對(duì)照溶液一致；

2）限度檢查：①采用定量配置的對(duì)照品對(duì)照或?qū)φ掌废♂寣?duì)照；②供試品溶液中待檢查的斑點(diǎn)應(yīng)與相應(yīng)的對(duì)照品溶液或系列對(duì)照品溶液的相應(yīng)斑點(diǎn)比較，顏色(或熒光)不得更深；或照薄層色譜掃描法操作，峰面積值不得大于對(duì)照品的峰面積值。一、雜質(zhì)檢查中藥的檢查項(xiàng)目與內(nèi)容3第三節(jié)CONTENTS沈陽藥科大學(xué)010203040506雜質(zhì)檢查法.有關(guān)雜質(zhì)的檢查.農(nóng)藥殘留量測(cè)定法.水分測(cè)定法總灰分和酸不溶性灰分測(cè)定法重金屬及有害元素測(cè)定法沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論沈陽藥科大學(xué)一、雜質(zhì)檢查中藥的雜質(zhì)檢查法中所指的雜質(zhì)為中藥材中混存的雜質(zhì)；包括：①來源與規(guī)定相同但其性狀或部位與規(guī)定不符；②來源與規(guī)定不同的有機(jī)雜質(zhì)和無機(jī)雜質(zhì)，如砂石、泥塊、塵土等。沈陽藥科大學(xué)二、水分測(cè)定法中藥及其制劑、提取物都要檢查水分，因?yàn)樗趾窟^高，可引起結(jié)塊、霉變或有效成分的分解。中國(guó)藥典（2010年版一部）附錄收載以下四種方法：烘干法，甲苯法（69.3℃），減壓干燥法，GC法。烘干法：不含或少含揮發(fā)性成分的藥品甲苯法：含揮發(fā)性成分的藥品減壓干燥法：含揮發(fā)性成分的貴重藥GC法：簡(jiǎn)便、快速、靈敏，無論樣品是否含揮發(fā)性成分、含水量從微量到常量均不影響測(cè)定。甲苯法測(cè)定水分的裝置沈陽藥科大學(xué)三、總灰分和酸不溶性灰分測(cè)定法總灰分是指藥材或制劑經(jīng)加熱熾灼灰化遺留的無機(jī)物，包括藥物本身所含無機(jī)鹽（稱為生理灰分）、泥土、砂石等藥材外表黏附的無機(jī)雜質(zhì)。

酸不溶性灰分：主要是外來雜質(zhì)，如泥土、砂石。測(cè)定目的：①控制藥材中泥土、沙土的量；②反映藥材生理灰分的量?？偦曳譁y(cè)定法酸不溶性灰分測(cè)定法

水浴過濾水洗濾紙殘?jiān)鼮V紙熾灼恒重殘?jiān)和鈦黼s質(zhì)碳酸鹽生理灰分溶解，而泥砂（硅酸鹽）不溶總灰分+稀鹽酸沈陽藥科大學(xué)四、重金屬及有害元素測(cè)定法重金屬：鉛、汞、鉻、銅等。與化學(xué)合成藥物不同的是，檢查前必須對(duì)樣品進(jìn)行有機(jī)破壞，破壞方法有干法和濕法兩種。

1）鉛鹽檢查方法：二硫腙比色法、原子吸收分光光度法

2）砷鹽檢查方法：古蔡法、Ag-DDC法、原子吸收分光光度法重金屬及有害元素限度：鉛≤5ppm；鉻≤0.3ppm；砷≤2ppm；汞≤0.2ppm；銅≤20ppm。沈陽藥科大學(xué)五、農(nóng)藥殘留量測(cè)定法常用的農(nóng)藥：1）有機(jī)氯類：艾氏劑、氯丹、六六六等；

2）有機(jī)磷類：三硫磷、氯硫磷、蠅毒磷等；

3）擬除蟲菊酯類：氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。檢查原則：1）農(nóng)藥不明的樣品測(cè)定總氯量、總磷量；

2）已知農(nóng)藥的樣品可采用GC法測(cè)定某個(gè)農(nóng)藥的量?？偮攘繙y(cè)定樣品細(xì)粉乙腈-水(65:35)攪拌過濾濾液+石油醚萃取萃取液氧瓶燃燒濃縮吸收液：硫氰酸銨比色法沈陽藥科大學(xué)五、農(nóng)藥殘留量測(cè)定法總磷量測(cè)定GC測(cè)定取樣萃取農(nóng)藥柱純化GC測(cè)定

1）測(cè)定有機(jī)氯時(shí)，使用電子捕獲檢測(cè)器（ECD）；

2）測(cè)定有機(jī)磷時(shí)，使用火焰光度檢測(cè)器（FPD）。上法得的石油醚萃取液柱層析洗脫液濃縮氧瓶燃燒吸收液：磷鉬酸比色法沈陽藥科大學(xué)六、有關(guān)雜質(zhì)的檢查吡咯里西啶類生物堿-阿多尼弗林堿（肝毒性成分）銀杏酸（免疫毒性和胚胎毒性）雙黃連注射液的Ph，蛋白質(zhì)等（過敏反應(yīng)）附子的雙酯性生物堿土大黃苷復(fù)方苦參腸炎康片中莨菪堿（麻疹，過敏性休克）速效牛黃丸中雄黃沈陽藥科大學(xué)七、其他黃曲霉素測(cè)定法：HPLC乙醇量測(cè)定法

1）GC法：20℃測(cè)定含量（%）（ml/ml）

2）蒸餾法：蒸餾后測(cè)定相對(duì)密度測(cè)含量（%）（ml/ml）膨脹度測(cè)定法主要用于含黏液質(zhì)、膠質(zhì)和半纖維素類的天然藥品的檢查。酸敗度測(cè)定法通過測(cè)定酸值、羰基值和過氧化值檢查藥材和飲片中油脂的酸敗度。中藥及制劑中成分的含量測(cè)定和質(zhì)量整體控制4第四節(jié)CONTENTS沈陽藥科大學(xué)指標(biāo)成分選擇的原則高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜掃描法含量測(cè)定主要方法多指標(biāo)成分的含量測(cè)定中藥一測(cè)多評(píng)的含量測(cè)定方法沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定選擇多指標(biāo)成分進(jìn)行含量測(cè)定，力求更客觀地表征其內(nèi)在質(zhì)量。沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定（一）指標(biāo)成分選擇的原則復(fù)方制劑首選君藥及貴重藥建立含量測(cè)定方法，其次臣藥或其他藥味進(jìn)行含量測(cè)定；有毒藥物必須建立含量測(cè)定項(xiàng)目，若含量太低無法測(cè)定時(shí)，應(yīng)在檢查項(xiàng)下規(guī)定限度檢查項(xiàng)(或應(yīng)指定含量限度范圍);應(yīng)選擇中藥中專屬性強(qiáng)的有效成分或指標(biāo)成分測(cè)定含量；測(cè)定成分應(yīng)盡量與中醫(yī)理論、用藥的功能主治相近；測(cè)定成分需考慮與生產(chǎn)工藝的關(guān)系；測(cè)定成分應(yīng)歸屬于某單一藥味，若兩味及以上藥材均含有的成分則不應(yīng)選為定量指標(biāo)；若確實(shí)無法進(jìn)行含量測(cè)定的，可測(cè)定藥物的總固體量。高效液相色譜法01氣相色譜法02薄層色譜掃描法03一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論（二）中藥及其制劑化學(xué)成分含量測(cè)定主要方法首選，具分離功能，分析速度快，應(yīng)用范圍廣，重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度優(yōu)于TLCS。主要用于測(cè)定藥材和飲片、制劑中含揮發(fā)油及其他揮發(fā)性成分的含量，也用于中藥提取物及中藥制劑中含水量或含醇量的測(cè)定。分離效能高，簡(jiǎn)便快速，適于中藥制劑的分析，可作為HPLC的補(bǔ)充，用于無紫外吸收或不能采用HPLC分析的組分。沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定高效液相色譜法首選1）色譜條件選擇：多用反相高效液相色譜法，非極性固定相，極性流動(dòng)相，其中以十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）應(yīng)用最多；

①流動(dòng)相：黃酮類、酚酸類（乙腈-水-酸）皂苷類（乙腈-水）生物堿類（乙腈-水-三乙胺）②混合體系復(fù)雜的多組分同時(shí)分析，可用梯度洗脫與波長(zhǎng)梯度的分析方法分離弱酸性成分：加適量醋酸作改性劑抑制其解離酸性較強(qiáng)的組分：離子對(duì)色譜法，加反離子試劑氫氧化四丁銨等堿性較強(qiáng)的組分：反相離子對(duì)色譜法，在酸性流動(dòng)相中加入烷基磺酸鹽、有機(jī)酸鹽等③檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器（UVD）-靈敏度高，線性范圍寬，適于在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì)；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）-可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品，適于無生色團(tuán)物質(zhì)的檢測(cè)。

沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定高效液相色譜法（HPLC）首選2）供試品溶液的制備：分析前需對(duì)樣品進(jìn)行提取分離預(yù)處理①組成復(fù)雜的制劑純化處理方法：萃取法、柱色譜法②中藥制劑多含糖等附加劑：制備供試品時(shí)，用高濃度醇或其他有機(jī)試劑提取測(cè)定組分3）測(cè)定方法的選擇：外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法①外標(biāo)法：采用UVD時(shí)多用外標(biāo)一點(diǎn)法，ELSD時(shí)用外標(biāo)二點(diǎn)法（因組分含量波動(dòng)范圍大，外標(biāo)法最好采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量）②內(nèi)標(biāo)法：一般不用，當(dāng)制劑組成相對(duì)簡(jiǎn)單、雜質(zhì)不干擾內(nèi)標(biāo)峰時(shí)可用

沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定氣相色譜法（GC）1）內(nèi)標(biāo)法：最常用，適于樣品所有組分不能全部流出色譜柱，或檢測(cè)器不能對(duì)每個(gè)組分都產(chǎn)生信號(hào)或只需測(cè)定樣品中某幾個(gè)組分含量時(shí)的情況。優(yōu)點(diǎn)：①對(duì)進(jìn)樣量一致性、進(jìn)樣速度等要求不高，適于某些有效成分或微量雜質(zhì)的含量測(cè)定；

②可抵消儀器穩(wěn)定性差、進(jìn)樣量不夠準(zhǔn)確等帶來的誤差；缺點(diǎn)：樣品配置比較麻煩，有些內(nèi)標(biāo)物不易找到。2）外標(biāo)法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，計(jì)算方便，不需校正因子，不論樣品其他組分是否出峰均可對(duì)被測(cè)組分定量；缺點(diǎn)：要求進(jìn)樣量準(zhǔn)確且實(shí)驗(yàn)條件恒定。3）歸一化法優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，定量結(jié)果與進(jìn)樣重復(fù)性無關(guān)，操作條件略變對(duì)結(jié)果影響??；缺點(diǎn)：要求所有組分均要產(chǎn)生色譜峰，不適于微量雜質(zhì)的含量測(cè)定。沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定薄層色譜掃描法（TLCS）分為薄層吸收掃描法和薄層熒光掃描法實(shí)驗(yàn)室條件選擇

1）色譜條件：選定條件下組分完全分離，斑點(diǎn)對(duì)稱、均勻、不拖尾

2）測(cè)定方式：反射法（應(yīng)用較多）和透射法反射法：吸收法（在紫外-可見區(qū)有吸收的組分）熒光法（有熒光的組分）：專屬性強(qiáng)、靈敏度高、線性范圍寬

3）掃描方法：直線式掃描、鋸齒狀掃描（定量分析多采用）單波長(zhǎng)掃描、雙波長(zhǎng)掃描(定量，可消除薄層不均勻的影響)4)散射參數(shù)(SX):與博層厚度、散射系數(shù)有關(guān)。測(cè)定時(shí)需輸入SX值。沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定薄層色譜掃描法（TLCS）定量方法的選擇：保證供試品斑點(diǎn)的量在線性范圍內(nèi)必要時(shí)可調(diào)整點(diǎn)樣量

1）外標(biāo)法：最常用，簡(jiǎn)單但點(diǎn)樣必須準(zhǔn)確

2）內(nèi)標(biāo)法：應(yīng)用較少

3）注意事項(xiàng)：①薄層厚度應(yīng)均勻，表面均勻平整；②點(diǎn)樣量必須準(zhǔn)確，原點(diǎn)大小應(yīng)一致；③噴灑顯色劑應(yīng)均勻、量適中；④掃描時(shí)應(yīng)沿展開方向掃描，不得橫向掃描；⑤本法線性范圍一般較窄，應(yīng)在其線性范圍內(nèi)測(cè)定。沈陽藥科大學(xué)第十九章中藥及其制劑分析概論一、中藥及制劑中化學(xué)成分的含量測(cè)定（四）中藥一測(cè)多評(píng)的含量測(cè)定方法“一測(cè)多評(píng)”法（QAMS）:很多成分有相似的母核結(jié)構(gòu)，可考慮在大量實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，計(jì)算出各成分吸收系數(shù)間穩(wěn)定的相關(guān)數(shù)值，僅測(cè)定1個(gè)有對(duì)照品的目標(biāo)成分，通過計(jì)算得出其他待測(cè)有效成分的含量，使其計(jì)算值和實(shí)測(cè)值符合定量方法學(xué)的要求的質(zhì)量控制方法。適用范圍：對(duì)照品難得、制備成本高或不穩(wěn)定的情況下同類多成分的同時(shí)測(cè)定。原理：在一定線性范圍內(nèi)，成分的量與檢測(cè)器響應(yīng)成正比。質(zhì)控指標(biāo)：①選擇藥材中有效成分或指標(biāo)性成分，做內(nèi)參物的對(duì)照品相對(duì)易得；②待測(cè)成分應(yīng)有相對(duì)較高的含量≥1mg/g。中藥指紋圖譜研究的技術(shù)關(guān)鍵研究對(duì)象的確定樣品的選擇與收集供試品的制備參照物的制備研究方法的選擇和方法驗(yàn)證指紋特征的選擇與技術(shù)參照中藥指紋圖譜的含義和研究意義含義研究意義類別及特點(diǎn)0