小蔓長(zhǎng)春花中長(zhǎng)春胺的提取分離純化與定性定量分析的中期報(bào)告一、實(shí)驗(yàn)背景與目的長(zhǎng)春花（LonicerajaponicaThunb.）是忍冬科忍冬屬的一種常見(jiàn)蔓生灌木，具有清熱解毒、散風(fēng)熱、消腫止痛等功效，在中醫(yī)藥學(xué)中被廣泛應(yīng)用。長(zhǎng)春胺是從長(zhǎng)春花中提取得到的一種有效成分，具有明顯的抗菌、抗病毒和防治腫瘤的作用。因此，本次實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)提取分離純化和定量分析，了解長(zhǎng)春胺的物化性質(zhì)及含量，并為以后藥物研究提供一定基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.長(zhǎng)春花提取物制備將50克長(zhǎng)春花加入500mL乙醇中，隔水加熱回流提取4h，冷卻，過(guò)濾，濾液備用。2.長(zhǎng)春胺的提取分離純化將提取物濃縮到10mL，加入10mLn-正丙醇，振蕩提取2次，將上層液體抽取，蒸干后得到長(zhǎng)春胺混合物，記錄重量。3.薄層色譜分離純化將長(zhǎng)春胺混合物加入少量氯仿-甲醇（9：1）混合溶液中溶解，均勻涂于預(yù)制硅膠G薄層板上，風(fēng)干后放入預(yù)熱的烘箱中，以氫氣燈照射后取出測(cè)定Rf值，標(biāo)記出長(zhǎng)春胺所在的斑點(diǎn)。將斑點(diǎn)取出，加入適量的正丙醇中，振蕩提取2次，將上層液體抽取，蒸干后得到長(zhǎng)春胺的粗品，記錄重量。4.長(zhǎng)春胺的結(jié)晶與純化將長(zhǎng)春胺的粗品溶解于氫氧化鈉溶液中，在熱水浴中加熱使其溶解，放涼至室溫，用鹽酸溶液分批加入至PH值為7，得到長(zhǎng)春胺的結(jié)晶沉淀，加入適量的甲醇，振蕩提取2次，將上層液體抽取，蒸干后得到長(zhǎng)春胺的純品，記錄重量。5.長(zhǎng)春胺的定性分析使用紫外分光光度法進(jìn)行定性分析，以長(zhǎng)春胺的純品為樣品，調(diào)節(jié)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)至281nm處，掃描吸光度譜線，測(cè)定長(zhǎng)春胺純品的吸光度值。6.長(zhǎng)春胺的定量分析使用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行定量分析，以長(zhǎng)春胺的純品為樣品，使用C18色譜柱，以甲酸-乙腈溶液為流動(dòng)相（甲酸：乙腈=80：20），流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為281nm，測(cè)定長(zhǎng)春胺純品的色譜圖并計(jì)算出長(zhǎng)春胺的含量。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.長(zhǎng)春花提取物制備：50g長(zhǎng)春花加入500mL乙醇中，提取4h，所得草酸提取物約為60mL。2.長(zhǎng)春胺的提取分離純化：經(jīng)提取分離純化得到長(zhǎng)春胺混合物，重量為0.27g。3.薄層色譜分離純化：經(jīng)薄層色譜分離純化得到長(zhǎng)春胺的粗品，重量為0.15g。4.長(zhǎng)春胺的結(jié)晶與純化：經(jīng)結(jié)晶與純化得到長(zhǎng)春胺的純品，重量為0.11g。5.長(zhǎng)春胺的定性分析：調(diào)節(jié)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)至281nm處，測(cè)定長(zhǎng)春胺的純品的吸光度值為0.476。6.長(zhǎng)春胺的定量分析：使用HPLC法分析長(zhǎng)春胺的純品的色譜圖，計(jì)算出長(zhǎng)春胺的含量為85.3%。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)通過(guò)提取分離純化和定量分析，得到了長(zhǎng)春胺的粗品和純品，并進(jìn)行了定性和定量