ICS11220

CCSB.41

中華人民共和國國家標準

GB/T18639—2023

代替GB/T18639—2002

狂犬病診斷技術

Diagnostictechniquesforrabies

2023-11-27發(fā)布2024-06-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T18639—2023

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術語和定義

3………………1

縮略語

4……………………1

臨床診斷

5…………………2

樣品采集保存和運輸

6、……………………2

直接免疫熒光檢測

7(DFA)………………3

直接快速免疫組化檢測

8(dRIT)…………3

巢式檢測

9RT-PCR………………………5

實時熒光檢測

10RT-PCR………………6

實時熒光重組酶聚合酶擴增檢測

11(RT-RPA)…………7

細胞培養(yǎng)物病毒分離檢測

12………………8

小鼠腦內接種病毒分離檢測

13…………10

綜合判定

14………………10

附錄規(guī)范性狂犬病診斷檢測的生物安全措施

A()…………………12

附錄規(guī)范性試劑配制

B()……………13

附錄資料性狂犬病病毒陽性和陰性腦組織制備

C()…………………14

附錄資料性狂犬病病毒實時熒光檢測及結果判定參照圖

D()RT-RPA…………15

GB/T18639—2023

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替狂犬病診斷技術與相比除結構調整和編

GB/T18639—2002《》,GB/T18639—2002,

輯性改動外主要技術變化如下

,:

更改了本文件所列各項診斷方法的適用范圍見第章年版的第章

———(1,20021);

增加了縮略語見第章

———(4);

增加了臨床診斷見第章

———(5);

刪除了內基氏小體檢查見年版的第章

———“”(20022);

增加了直接快速免疫組化檢測見第章巢式檢測見第章實時熒光

———(8)、RT-PCR(9)、RT-PCR

檢測見第章和實時熒光重組酶聚合酶擴增檢測見第章種檢測方法

(10)(RT-RPA)(11)4;

將檢測操作細化為細胞培養(yǎng)物病毒分離檢測和小鼠腦內接種病毒分離檢測見第章第

———(12、13

章年版的第章

,20024);

增加了綜合判定見第章

———(14);

增加了狂犬病診斷檢測的生物安全措施見附錄

———(A)。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農業(yè)農村部提出

。

本文件由全國動物衛(wèi)生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本文件起草單位軍事科學院軍事醫(yī)學研究院軍事獸醫(yī)研究所

:。

本文件主要起草人扈榮良張守峰繆發(fā)明陳騰王曉虎張菲王穎羅勝軍蔣依倩米立娟

:、、、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為

:

年首次發(fā)布為

———2002GB/T18639—2002。

本次為第一次修訂

———。

Ⅰ

GB/T18639—2023

引言

作為病死率幾乎的病毒性傳染病狂犬病的最終確診依賴實驗室診斷技術

100%,。

自首次頒布以來狂犬病的實驗室診斷技術不斷發(fā)展基于直接免疫熒光檢

GB/T18639—2002,。

測的抗原檢測方法被世界衛(wèi)生組織和世界動物衛(wèi)生組織確定為金標準通

(DFA)(WHO)(WOAH)“”;

過對病毒核酸進行特異性擴增實現感染診斷的和實時熒光技術得到廣泛應用檢測

RT-PCRRT-PCR;

神經組織內病毒抗原的快速免疫組化檢測獲得推薦基于等溫擴增的重組酶聚合酶擴

(dRIT)WHO;-

增技術也在近幾年獲得大量應用上述檢測方法與規(guī)定的病毒分離技術共

(RPA)。GB/T18639—2002

同成為當前狂犬病實驗室診斷的常用和可靠方法并在陸生動物診斷試驗和疫苗手冊和

,WOAH《》

狂犬病實驗室技術中列舉和推薦同時第章中基于組織病理學技術的

WHO《》。,GB/T18639—20022

內基氏小體檢查因敏感性不高逐漸被淘汰

(negribodies),。

我國衛(wèi)生疾控動物疫控動物檢疫和科研機構同步開展了上述狂犬病實驗室診斷技術研究目前

、、,

已被廣泛應用相關設備和配套檢測試劑均有穩(wěn)定供應基于上述進展參考和推薦技

,。,WHOWOAH

術結合我國實際情況和相關研究成果對進行修訂旨在規(guī)范我國動物狂犬病診斷

,GB/T18639—2002,

和檢疫方法提高檢測水平以有效指導防控措施的實施保證人畜健康和安全并為我國逐步實現犬傳

,,,,

播的狂犬病消除發(fā)揮積極作用

。

本文件所列核酸擴增引物和探針序列均為通過對國內狂犬病流行毒株序列的綜合分析設計獲

得并經過大量試驗驗證其檢測敏感度和特異性均不低于國際組織推薦的引物和探針序列另外狂

,,。,

犬病中和抗體檢測是動物免疫效果評估的重要手段通常不用于動物狂犬病診斷因此未列入本文件

,,。

Ⅱ

GB/T18639—2023

狂犬病診斷技術

1范圍

本文件描述了動物狂犬病診斷的臨床診斷樣品采集保存和運輸直接免疫熒光檢測直

、、、(DFA)、

接快速免疫組化檢測巢式檢測實時熒光檢測實時熒光重組酶聚合酶擴

(dRIT)、RT-PCR、RT-PCR、

增檢測細胞培養(yǎng)物病毒分離檢測小鼠腦內接種病毒分離檢測和綜合判定的方法

(RT-RPA)、、。

本文件適用于動物檢疫疫病監(jiān)測和流行病學調查時的狂犬病診斷

、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

,,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用本

,;,()

文件

。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

動物狂犬病直接免疫熒光診斷方法

GB/T34740—2017

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

氨基乙基咔唑

AEC:3--9-(3-Amino-9-Ethylcarbazole)

黑洞淬滅熒光標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸

BHQ-dT: