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分解纖維素的微生物的分離1本節(jié)課標(biāo):1.簡(jiǎn)述纖維素酶的種類(lèi)及作用。2.學(xué)習(xí)從土壤中分離出分解纖維素的微生物的方法。3.談?wù)撨@類(lèi)微生物的應(yīng)用價(jià)值。2纖維素是地球上含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì),是天然有機(jī)高分子化合物:自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物是棉花,含量達(dá)92%~95%,亞麻達(dá)80%,此外木材、作物秸稈也富含纖維素。許多商品纖維素都是由天然纖維素制得:如水溶性的羧甲基纖維素鈉(CMC---Na);不溶于水的微晶纖維素等食品添加劑。①纖維素含量一、基礎(chǔ)知識(shí)1、纖維素34纖維素:
葡萄糖②基本單位③簡(jiǎn)式(C6H10O5)n④應(yīng)用纖維素可用于紡織工業(yè),可造紙5⑤思考:纖維素是地球上含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì),植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸,但卻不會(huì)在地球上大量的積累,為什么?40~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶2、纖維素酶水解纖維素生成纖維二糖和葡萄糖的一類(lèi)酶的總稱(chēng)①定義②組分6纖維素酶不是單一酶,是復(fù)合酶,包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶。C1酶:(外切酶)從糖鏈的末端開(kāi)始切掉兩個(gè)葡萄糖分子,產(chǎn)生纖維二糖。葡萄糖苷酶:將纖維二糖分解為葡萄糖CX酶:(內(nèi)切酶)作用于糖鏈的內(nèi)部使之?dāng)嗔殉商擎溒巍?A、人能不能對(duì)纖維素消化吸收?為什么?答:不能,因?yàn)槿梭w不能合成纖維素酶。人以淀粉為主要的能量來(lái)源。③思考:B、食物中的纖維素有什么作用?答:食物中的膳食纖維可刺激胃腸蠕動(dòng)和分泌消化液,有助于食物的消化和排泄。8C、反芻動(dòng)物能利用纖維素嗎?為什么?答:能,在反芻動(dòng)物的瘤胃中生活著大量可以分解纖維素的微生物,能產(chǎn)生大量的纖維素酶9方法:濾紙崩潰法3、纖維素酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn):1011A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C下列生物能分解纖維素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌12二、纖維素分解菌的篩選2、篩選原理:1、篩選方法:剛果紅染色法剛果紅(CR)是一種染料,它可以與象纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)3、篩選過(guò)程:13通過(guò)產(chǎn)生的透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌加入剛果紅紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物無(wú)法形成出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈纖維素被分解纖維素14154、纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基①纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基16答:液體培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基中無(wú)凝固劑,利用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)以增加纖維素分解菌的濃度B、培養(yǎng)基具有選擇作用的原因答:能夠產(chǎn)生纖維素酶的微生物才能分解纖維素作為碳源和能源,并大量繁殖;不能分解纖維素的微生物由于缺乏碳源受到抑制而不能正常生長(zhǎng)繁殖,因此培養(yǎng)基具有選擇作用A、物理性質(zhì)上看選擇培養(yǎng)基的類(lèi)型及原因思考:17C、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用?答:用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與其對(duì)照D、為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?答:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速的繁殖。而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到濃縮的作用。18②纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基19三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)流程20①分布環(huán)境(1)土壤取樣:富含纖維素的環(huán)境中2、操作步
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