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觀察染色體的兩種細(xì)胞固定試劑2019版高中生物學(xué)必修一介紹,以15%的鹽酸和95%的酒精等量混合解離并固定細(xì)胞:必修二介紹,以卡諾氏液固定細(xì)胞:那么,這兩種固定細(xì)胞的試劑有什么區(qū)別?固定是借助理化方法迅速將組織細(xì)胞殺死,盡量保持其形態(tài)結(jié)構(gòu)及內(nèi)含物的真實(shí)生活狀態(tài)。因此,固定液必須迅速穿過細(xì)胞使蛋白質(zhì)變性,且不影響染色體的完整性,從而達(dá)到良好的染色效果??ㄖZ氏固定液是3份無水乙醇和一份冰醋酸混合制備而成,其中無水乙醇的功能是使細(xì)胞縮小、脆化;冰醋酸的功能是不改變細(xì)胞的原來結(jié)構(gòu)。所以卡諾氏液的功能是在不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的情況下使細(xì)胞瞬間死亡,起到固定的作用??ㄖZ氏固定液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,長時(shí)間放置影響固定的效果。固定時(shí)間為15~1440min,冰箱室溫均可。其適用于一般植物組織和細(xì)胞的固定,常用于根尖、花藥壓片等。在徐作英、王重力主編的《中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)論》第322頁“觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中,對“實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備”根尖取材與固定是這樣描述的:待根尖長到1~2cm時(shí)(注意不宜過長),根據(jù)各種植物細(xì)胞有絲分裂的高峰時(shí)期,剪取根尖浸泡于固定液中2~4h,取出后保存于70%酒精中備用。由此可見,觀察根尖有絲分裂實(shí)驗(yàn)也可以用卡諾氏液固定,但不是必需的。因?yàn)樵趯Ω膺M(jìn)行解離操作時(shí),加入鹽酸酒精混合液,其中鹽酸起解離作用,而酒精能起固定作用。該實(shí)驗(yàn)用酒精固定已經(jīng)起到了很好的作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果也比較理想,從簡化實(shí)驗(yàn)程序考慮就不必再單獨(dú)使用卡諾氏液固定。例1、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.
卡諾氏液固定細(xì)胞形態(tài)后需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗B.
生長素能與雙縮脲試劑發(fā)生作用產(chǎn)生紫色反應(yīng)C.
赫爾希等人用35S標(biāo)記的除菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn),證明DNA是遺傳物質(zhì)D.
質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)中需用顯微鏡觀察臨時(shí)裝片2次答案:A解析:A、在低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化實(shí)驗(yàn)中,利用卡諾氏液固定細(xì)胞形態(tài)后,需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗兩次,A正確;B、生長素的本質(zhì)不是蛋白質(zhì),是吲哚乙酸,其不能與雙縮脲試劑發(fā)生作用產(chǎn)生紫色反應(yīng),B錯誤;C、赫爾希等人分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體進(jìn)行侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn),證明了DNA是遺傳物質(zhì),C錯誤;D、質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)中需用顯微鏡觀察臨時(shí)裝片3次:第一次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蒸餾水中的正常狀態(tài),第二次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蔗糖溶液中的質(zhì)壁分離狀態(tài),第三次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蒸餾水中的質(zhì)壁分離復(fù)原狀態(tài),D錯誤。故選:A。
例2、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的說法正確的是() A.在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中,用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液進(jìn)行解離 B.在提取葉綠體色素的實(shí)驗(yàn)中,使用丙酮酸提取色素,使用層析液分離色素 C.探究醇母群數(shù)量變化時(shí),應(yīng)設(shè)空白對照排除無關(guān)變量干擾 D.將斐林試劑加入到麥芽糖溶液中時(shí),就會出現(xiàn)磚紅色沉淀解析:
1、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn),提取色素時(shí)需要加入無水乙醇(溶解色素)、石英砂(使研磨更充分)和碳酸鈣(防止色素被破壞);分離色素時(shí)采用紙層析法,原理是色素在層析液中的溶解度不同,隨著層析液擴(kuò)散的速度不同,最后的結(jié)果是觀察到四條色素帶,從上到下依次是胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍(lán)綠色)、葉綠素b(黃綠色).2、觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟:解離(解離液由鹽酸和酒精組成,目的是使細(xì)胞分散開來)、漂洗(洗去解離液,便于染色)、染色(用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料)、制片(該過程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層,使之不相互重疊影響觀察)和觀察(先低倍鏡觀察,后高倍鏡觀察).
3、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化實(shí)驗(yàn)的原理:
(1)酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng),培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān),我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做曲線,從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況.
(2)利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法,這種方法可以直接測定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目,所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測定,由于血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的,所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目.
4、斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀).斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉、蔗糖).在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中,用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液進(jìn)行解離,A正確;
在提取葉綠體色素的實(shí)驗(yàn)中,使用丙酮提取色素,丙酮酸不能提取色素,
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