肌苷酸產(chǎn)業(yè)及工藝第1頁/共16頁肌苷酸產(chǎn)業(yè)及生產(chǎn)工藝第2頁/共16頁

一、國內(nèi)外生產(chǎn)水平截至今日，日本的肌苷酸生產(chǎn)達到最高的水平，最高達可達到到20—27g/L，而在我國的生產(chǎn)水平達到16g/L。第3頁/共16頁二、成本、應用分析成本分析

肌苷酸過去一直靠進口，其價格高達每千克200元。從70年代開始，我國成功地利用細菌（如谷氨酸棒狀桿菌265和產(chǎn)氨短桿菌926）發(fā)酵法生產(chǎn)肌苷酸和烏苷酸，成本僅為每千克2～3元。而現(xiàn)在肌苷酸二鈉的價格在每千克260元。第4頁/共16頁二、成本、應用分析（一）調(diào)味是食品增鮮劑，其二鈉鹽與谷氨酸鈉（味精）混合使用，其呈味作用比單用味精高數(shù)倍，有“強力味精”之稱。（二）醫(yī)療適用于各種原因引起的白細胞減少癥、血小板減少癥、各種心臟疾患、急性及慢性肝炎、肝硬化等，此外尚可治療中心視網(wǎng)膜炎、視神經(jīng)萎縮等。

第5頁/共16頁三、國內(nèi)主要生產(chǎn)企業(yè)山東雙鳳股份有限公司

江陰市蔚爾生物科技有限公司南通秋之友生物科技有限公司南京同凱兆業(yè)生物技術有限責任公司廣東江門甘蔗化工股份有限責任公司武漢生科生物股份有限公司等第6頁/共16頁四、肌苷酸的生產(chǎn)（一）一步法

1.肌苷酸生產(chǎn)菌選育（1）解除微生物自身的反饋調(diào)節(jié)a.解除AMP、GMP對PRPP（

5-磷酸核糖-1-焦磷酸）轉(zhuǎn)酰胺酶的反饋抑制。b.切斷5‘-IMP繼續(xù)代謝生成GMP和AMP的途徑。第7頁/共16頁

因此，選擇可以產(chǎn)生核苷酸的產(chǎn)氨短桿菌（Brevibacteriumammoniagene）為出發(fā)菌株，誘變?yōu)橄汆堰嗜毕菪屯蛔冎?，再誘變?yōu)轼B嘌呤缺陷型突變株。第8頁/共16頁2.培養(yǎng)條件（1）因所用菌株為腺嘌呤缺陷型，所以添加適量腺嘌呤（加0.5%酵母膏或酵母水解液）。（2）Mn2+亞適量工業(yè)原料和工業(yè)用水含較多的Mn2+，難于控制Mn2+亞適量,有兩條途徑：

a.篩選對Mn2+不敏感的突變株

b.加抗生素或表面活性劑以解除過量Mn2+的影響。（3）添加較高濃度的磷鹽。第9頁/共16頁（二）二步法（肌苷酸生產(chǎn)主要方法）

發(fā)酵法肌苷肌苷酸原因：IMP對細胞膜的透性很差。微生物中普遍存在使IMP脫磷酸化的酶類。

磷酸化第10頁/共16頁肌苷生產(chǎn)菌的選育

常用：枯草桿菌（Bacillussubtilis）的腺嘌呤缺陷型。原因：

該菌磷酸酯酶活性強，有利于將IMP脫磷酸化形成肌苷，分泌至胞外，而產(chǎn)氨短桿菌的磷酸酯酶活性較弱。第11頁/共16頁2.培養(yǎng)條件（1）培養(yǎng)基：碳源：淀粉水解糖或糖蜜氮源：要充分（因肌苷含氮量高，20.9％）無機鹽：可溶性磷鹽有抑制作用（胞外磷酸化）生長因子：加適量含腺嘌呤的物質(zhì)，如酵母膏。

腺嘌呤的最適濃度：不影響菌體生長使肌苷大量積累第12頁/共16頁（2）發(fā)酵條件

通氣攪拌：供氧充足，促進肌苷生成，并可減少CO2對肌苷生成的抑制。（3）肌苷的提取

先過陽離子交換柱，再過活性炭柱（吸附），結晶。第13頁/共16頁3.肌苷的磷酸化（1）酶法：酶：核苷磷酸化酶磷酸的供體：對硝基苯磷酸難點：除5‘－磷酸化產(chǎn)物外，還有3’-、2‘-位異構體，收率85％。（2）化學法：用不同的磷酸化試劑（磷酰氯、磷酸、五氧化二磷等）。第14頁/共16頁4.肌苷酸的提取離子交換法除菌體除對硝基酚柱層析（過濾、離心）