學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日

學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的

基本技術(shù)第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理1.配制培養(yǎng)基時(shí)要注意原料的選擇和調(diào)節(jié)適宜的PH2.配制好的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌，滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物細(xì)胞、芽孢和孢子。3.對(duì)不同的材料，應(yīng)當(dāng)采取不同的滅菌方法：培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法，而接種環(huán)則用火焰灼燒法第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日方法步驟：一、細(xì)菌的培養(yǎng)技術(shù)：1、培養(yǎng)基的配制：1、稱量2、溶化

3、調(diào)PH

4、培養(yǎng)基的分裝5、加棉塞6、包扎加入材料（蛋白胨、牛肉膏、瓊脂等）加熱溶化1mol/L的NaOH溶液，PH試紙，7．4～7．6棉塞能防止雜菌污染，保證通氣良好。不能太松、不難太緊，2/3在管內(nèi)第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日1正確第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日2、滅菌開鍋加水放入待滅菌的材料：管口向上，豎放，不能太擠加蓋排出鍋內(nèi)冷空氣：達(dá)49Kpa時(shí)，排氣兩次維持：98Kpa，20min排氣：鍋內(nèi)壓力降為0時(shí)，才能排氣第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日3、擱置斜面將鍋內(nèi)試管等取出，在冷卻至50℃時(shí)，擱置斜面，斜面長度不能超過試管總長度的1/2第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日4、接種洗凈雙手，用酒精擦拭等手上酒精揮發(fā)以后，點(diǎn)燃酒精燈接種①左手夾住菌種試管和接種斜面試管，擰松棉塞第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日②接種環(huán)灼燒滅菌③右手無名指和小指夾住棉塞（不能放下），灼燒管口一周第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日④接種環(huán)伸入試管內(nèi)，在末長菌的部位冷卻，后挑取少量菌體，立即抽出第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日⑤在火焰旁迅速將接種環(huán)由斜面底部向外輕輕畫蛇形細(xì)線第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日⑥抽出接種環(huán)，再用火焰灼燒管口，并在火焰上方將棉塞塞上⑦熄滅酒精燈⑧填寫標(biāo)簽第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日5、培養(yǎng)25?C5——7天37?C24小時(shí)第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日1．不同微生物生長所要求的最適溫度不同。請(qǐng)就測定大腸桿菌生長最適溫度的實(shí)驗(yàn)回答下列問題：(1)配制的相應(yīng)培養(yǎng)基可屬于

。A．天然培養(yǎng)基B．半固體培養(yǎng)基C．液體培養(yǎng)基D．伊紅一美藍(lán)選擇培養(yǎng)基課堂練習(xí)AC第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日(2)依次按稱量、溶化、調(diào)pH、分裝(每管5ml)、

、包扎的順序，完成培養(yǎng)基的配制，再用

（方法）滅菌后，取8支試管，分別標(biāo)明20℃、28℃、37℃、45℃四種溫度，每種溫度2管。加棉塞高壓蒸氣滅菌法(3)向每管中接人處于

期的大腸桿菌菌液0．lml，混勻。在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)24h。對(duì)數(shù)(4)測定結(jié)果顯示，45℃下的菌體最少，因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)的

等發(fā)生了不可逆的破壞。蛋白質(zhì)和核酸第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日（2008理綜天津卷）31、（16分）莠去津是一種含氮的有機(jī)化合物，它是廣泛使用的除草劑之一。⑴莠去津的作用機(jī)理之一是阻斷光反應(yīng)中的電子傳遞過程，影響NADP＋形成

，進(jìn)而影響在

中進(jìn)行光合作用的暗反應(yīng)過程，最終抑制雜草生長。NADPH葉綠體基質(zhì)第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日⑵從使用莠去津農(nóng)田中，選到了能遺傳的耐莠去津雜草，將它與敏感莠去津植株雜交，結(jié)堅(jiān)果見下表：雜交親本后代中耐藥型植株比例（%）后代中敏感型植株比例（%）耐藥型♀×敏感型♂1000敏感型♀×耐藥型♂0100由表推斷，控制該耐藥性狀的基因位于

。細(xì)胞質(zhì)中第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了____和______。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_____和______。（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_______

。氮源碳源無機(jī)鹽水高壓蒸汽滅菌第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日（3）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于______中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種______作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（4）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_____種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_______。恒溫培養(yǎng)箱無菌水多高第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日（5）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_______細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為____

。鹽選擇性培養(yǎng)基第二十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日16．在光亮處用一種培養(yǎng)液分別培養(yǎng)綠藻和酵母菌，其結(jié)果如右圖，造成這種結(jié)果的原因是培養(yǎng)液中A．缺少無機(jī)鹽B．含氧量太高C．缺少有機(jī)養(yǎng)分D．不含二氧化碳C第二十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日17．右圖是細(xì)菌的生長速度曲線，根據(jù)曲線回答下列問題：(1)活細(xì)菌數(shù)量最多時(shí)對(duì)應(yīng)的是曲線中的

段。總菌數(shù)目(包括死菌和活菌)最多的時(shí)期對(duì)應(yīng)曲線中的

段。(2)3段中生長速度下降的原因是

。3

4營養(yǎng)物質(zhì)的消耗；有害代謝產(chǎn)物的積累，Ph值變化(3)調(diào)整期出現(xiàn)的原因是細(xì)菌接種到新的培養(yǎng)基上后，需要重新合成必需的酶，輔酶或某些必需中間代謝產(chǎn)物，以適應(yīng)新環(huán)境，這種調(diào)節(jié)方式屬

。酶合成的調(diào)節(jié)(4)處于對(duì)數(shù)期的微生物，代謝旺盛，生長迅速，如果用作菌種，可在短時(shí)間內(nèi)得到大量微生物，以縮短發(fā)酵周期，曲線中屬于這一時(shí)期的是

段。2第二十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日3（重慶）下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是