第二 分子生物學技PCR過程一般分為變性、退火、延伸三大步, A.94℃、55℃、72 B.72℃、55℃、94C.55℃、94℃、72 D.80℃、55℃、72解析:94℃(90~96℃)以上時,DNA解聚為單鏈,稱之為變性;當溫度50℃(40~60℃)左右時,DNA結合;當溫72℃(70~75℃)左右時,溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、C、G)TaqDNA聚合酶的作用下,DNA鏈,稱為延伸。答案DNA的需要引物,其主要原因是 可加快DNA的速DNA5'DNADNA解析:DNA的兩條鏈是反向平行的,DNA的方向,DNA的羥基(—OH)3'端,5'端。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,而只能從3'端延伸DNA鏈。因此,DNA需要引物。當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后,DNA3'DNA鏈,DNA的合成方5'3'端延伸。答案下列有關PCR反應的敘述正確的是( A.PCR反應所需要的引物只是RNAB.PCR反應所需要的材料是核糖核苷酸C.PCR60℃會變性解析:PCRDNARNA,反應所需要的材料是脫氧核苷酸,PCR所需要的酶是耐高溫的,60℃不會變性。答案有關PCR技術,下列敘述不正確的是 PCR15~40在用PCR技術擴增DNA時,DNA的過程與細胞內DNA的類PCR反應只需一定的緩沖溶液、DNAPCR一般經歷三十多次循環(huán),解析:PCR反應中需要的條件有模板(DNA分子)、原料(4種脫氧核苷酸)、酶(TaqDNA聚合酶)、引物(DNARNA)答案 ①目的②引 ③四種脫氧核苷 ④DNA聚合酶等 ⑥核糖 B.①②③⑥ 解析:PCR技術需要目的作為擴增的模板,耐高溫DNA聚合酶催化反應的進行,而引DNA聚合酶起作用的需要,四種脫氧核苷酸是該過程的原料。答案多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。PCR過程一般經歷下述三十多次循環(huán);94℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下退火(引物與DNA模板鏈結合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關PCR過程的敘述中不正確 變性過破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實復性過引物與DNA模板鏈的結合依靠互補配對原則完延伸過需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷PCR與細胞內DNA相比,所需要酶的最適溫度較解析:變性過破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn);復性過引物與DNA模板鏈的結合依靠互補配對原則完成;延伸過需要DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸;PCR與細胞內DNA相比,所需要酶的最適溫度較高。下面關于DNA對高溫的耐受性的說法,不正確的是( A.DNA對高溫的耐受性一般要比蛋白質強B.80DNA將變性,即使恢復到常溫,解析:蛋白質一般受80℃以上的高溫,一旦達到此溫度,其結構往往會發(fā)生不可逆轉的破壞,DNA80℃以上情況下才會變性,一旦溫度降低,其在高溫下解開的答案關于PCR的說法不正確的是( A.PCR是體外DNA的技術B.TaqDNAC.DNAD.PCR利用的是DNA雙鏈原解析:DNA既可來源于動物、植物、微生物,答案PCR操作中,從第二輪循環(huán)開始擴增的DNA片段( 解析:R擴增產物可分為長產物片段和短產物片段兩部分。短產物片段的長度嚴格地5端之間,是需要擴增的特定片段。進入第二輪循環(huán)后,模板結合外,還要同新合成的鏈(即“長產物片段”)結合引物在與新鏈結合時,由于新鏈模5端序列是固定的,3端被固定了終點,保證了新片段的起點和終點都限定于引物擴增序列以內,形成長短一致的“短產物片段”。答案使用PCR儀的具體實驗操作順序應為 PCR儀的循環(huán)程序③用微量移液器在微量離心管中依次加入各組分④進行PCR反應 A.②③⑤④①B.①⑤③④②C.②③⑤①④解析:使用PCR儀進行DNA擴增前,首先按照PCR體系配方,依次將各組分加入微量離心管離心,使反應液集中于試管底部,然后再設計好PCR儀的循環(huán)程序進行PCR反應。11.(2014·山東高考理綜)玉米是重要的糧食作物,經深加工可生產、玉米胚芽油和果玉米秸稈中的纖維素經充分水解后的產物可被酵母菌利用發(fā)酵生產。培養(yǎng)酵母 。發(fā)酵過檢測酵母菌數(shù)量可采用 利用PCR技術擴增葡萄糖異構酶時,需用耐高溫的 解析:PCR技術中,DNA分解成單鏈,因而需耐熱的(Taq)DNA聚合酶;PCR技術中的每次循環(huán)都包括三個步驟:變性→復性→延伸。答案:(1)碳源(2)壓榨萃取(注:兩空可顛倒) 復性(或退火 延DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將 過堿基互補配對結合后,DNA聚合酶就能從引物的 開始延伸DNA鏈。PCRDNADNA雙鏈的問題,DNA聚合酶2080年代,Taq細菌中分離 假設在PCR反應中,只有一個DNA片段作為模板,請計算在5次循環(huán)后,反應物中大 個這樣的DNA片段。PCR。解析:(1)DNA3'羥基上,DNA母鏈RNA引物就提供這個羥基。(2)PCRDNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題,所以用于催化DNA過程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特性。在高溫環(huán)境中培養(yǎng)微生物,只有耐高溫的微生物才能生存,Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來。(3)DNA復制兩條鏈均作為模板,進行半保留,所以5次后得到的子代DNA分子數(shù)為25=32個。(4)PCRDNA分子進行擴增,所以可用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、克隆和DNA序列測定等方面。答案:(1)磷酸基團3'耐高溫的TaqDNA聚合 選擇培養(yǎng)病原體鑒定、遺傳學診斷、免疫學研究、癌探索及治療、刑偵破案、古生物學、克隆和DNA序列測定等定量測定;從原先只能擴增幾個kb(千堿基對)的到目前已能擴增長達幾十個kb的DNA片段?，F(xiàn)在PCR技術已有十幾種之多。它不僅可用于分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病的診斷等。PCRDNA、引物、脫氧核糖核DNA聚合酶、ATP等條件,其簡要過程如圖所示。請分析回答下列有關問題。PCR技術能把某一DNA片段進行擴增,依據(jù)的原理 。PCR與體內的不同之處主要表現(xiàn)在環(huán)境溫度的不同,在PCR中先用94℃高溫處理的目的 ,而這一過在細胞內是通過 若將1個DNA分子拷貝10次,則需要在緩沖液中至少加 個引物DNA子鏈的方向 ,這是由。PCR技術不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進了檢測細菌和的方法。若要檢測一個人是否了,你認為可以用PCR擴增血液中的 解析:PCR技術又稱多聚酶鏈式反應,擴增過遵循的原理就是DNA;分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,這個事實說明DNA分子的合成遵循堿基互補配對原則;在PCR中選用94℃高溫處理的目的是在解旋酶的催化下將DNA分子中的氫鍵斷裂,兩條鏈解開,使DNA分子變性。引物是一種單鏈DNA或RNA分子,它能與解開的DNA母鏈的3'端結合,為DNA聚合酶提供吸附位點,使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核糖核苷酸,從而決定了DNA子鏈的方向是從5'端到3'端。在DNA分子擴增時,需要兩種引物,由于新合成的子鏈都需要