ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPhytophthorasyringaeKleb.

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

GB/T31801—2015

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20159

*

書號

:155066·1-49875

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31801—2015

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局

:、。

本標準主要起草人杜洪忠羅加鳳吳品珊嚴進

:、、、。

Ⅰ

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了丁香疫霉菌的檢疫鑒定方法

。

本標準適用于針對丁香疫霉菌寄主的苗木枝條枝葉果實及其夾帶土壤和介質(zhì)中丁香疫霉菌的

、、、

鑒定

。

2儀器和用具

21儀器

.

生物顯微鏡超凈工作臺光照培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋冰箱擴增儀熒光

,,,(1/1000g),,,PCR,

擴增儀電泳儀凝膠成像儀高速冷凍離心機恒溫水浴鍋

PCR,,,,。

22用具

.

燒杯三角瓶量筒試管培養(yǎng)皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片塑料研杵

,,,,,,,,,,,,,

移液器移液器吸頭離心管液氮罐

,,,。

3試劑材料和培養(yǎng)基

、

31試劑

.

β谷甾醇匹馬霉素氨芐青霉素鈉鹽利福平鈉鹽五氯硝基

-,(pimaricin),(ampicillin),(rifampicin),

苯惡霉靈瓊脂糖乙二胺四乙

(pentachloronitrobenzene),(hymexazol),CaCO3,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,

酸四鈉鹽十六烷基三甲基溴化銨無水乙醇

(EDTA),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,(CTAB),TAE,(etha-

三氯甲烷異丙醇異戊醇核酸染料

nol),(chloroform),(isopropanol),(isoamylalcohol),SYBRGreenI,

蛋白酶Taq聚合酶通用引物和實時熒光引物和及

K,DNA,dNTP,ITS5ITS4,PCRPS-FPS-RTaq-

探針

Man-MGBPS-Pr。

32材料

.

瓊脂粉汁夏櫟葉片或蘋果或梨鮮橙皮或杜鵑葉片

,V8,,。

33培養(yǎng)基

.

培養(yǎng)基培養(yǎng)基鮮橙皮培養(yǎng)基杜鵑葉片培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基具

PDA,V8,V8,V8,PARPH-V8。

體配方參見附錄

A。

4檢疫鑒定方法

41癥狀檢查

.

檢查寄主植物的根莖葉果實等部位對有枯萎