ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofodontoglossumringspotvirus

2012-12-31發(fā)布2013-06-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T28981—2012

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)寧波出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫

:、

局中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人聞偉剛陳先鋒楊翠云郭立新魯潔張永江張明哲徐瑛崔俊霞張慧麗

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了齒蘭環(huán)斑病毒血清學(xué)和分子生物學(xué)特征的檢測(cè)方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于種子種球花卉和種苗等植物材料中齒蘭環(huán)斑病毒的檢測(cè)也適用于蚜蟲(chóng)等傳播媒

、、,

介中該病毒的檢測(cè)

。

2齒蘭環(huán)斑病毒基本信息

中文名齒蘭環(huán)斑病毒

:

學(xué)名

:odontoglossumringspotvirus

縮寫(xiě)

:ORSV

屬煙草花葉病毒屬Tobamovirus齒蘭環(huán)斑病毒其他信息參見(jiàn)附錄

(),A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

(Doubleantibodysandwichenzyme-linked

體外合成技術(shù)的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

immunosorbentassay,DAS-ELISA)、DNA(Reverse

實(shí)時(shí)熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

transcriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、(real-time

進(jìn)行檢測(cè)鑒定

fluorescentRT-PCR)。

4儀器設(shè)備用具和試劑

、

41儀器設(shè)備

.

儀實(shí)時(shí)熒光儀超凈工作臺(tái)電子天平感量電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)

PCR、PCR、、(:0.001g)、、、、

高速冷凍離心機(jī)超低溫冰箱高壓滅菌鍋小型食品加工機(jī)微波爐酶標(biāo)儀

、(-80℃)、、、、。

42用具

.

可調(diào)式微量移液器及相應(yīng)的無(wú)吸頭無(wú)

(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、

離心管管和研缽等

RNase、PCR。

43試劑

.

主要試劑和緩沖液見(jiàn)附錄和附錄

BC。

5檢測(cè)

51樣品制備

.

取種子種球鱗片或畸形變色癥狀的葉片等植物組織