ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T27535—2011

豬流感HI抗體檢測方法

Detectionmethodofhemagglutinationinhibitionantibody

againstswineinfluenza

2011-11-21發(fā)布2012-03-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

豬流感HI抗體檢測方法

GB/T27535—2011

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100013)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

/p>

年月第一版

20121

*

書號

:155066·1-44052

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T27535—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所

:。

本標準主要起草人喬傳玲楊煥良陳艷辛?xí)怨怅惢m

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27535—2011

豬流感HI抗體檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了豬流感病毒血凝和血凝抑制試驗的技術(shù)要求

(HA)(HI)。

本標準適用于豬流感血清抗體的檢測

HI。

2儀器

水浴箱冰箱等

、4℃。

3試驗材料

單道及多道微量移液器吸頭

、。

4試劑

41參見附錄中

.0.01mol/LpH7.2PBS(AA.1)。

42胰酶溶液參見附錄中

.(AA.2)。

43溶液參見附錄中

.0.01mol/LKIO4(AA.3)。

44丙三醇鹽水參見附錄中

.1%(AA.4)。

45阿氏液參見附錄中

.(Alsevers)(AA.5)。

46雞紅細胞懸液參見附錄中

.0.5%(AA.6)。

47試驗抗原和陰陽性血清參見附錄中

.HI、(AA.7)。

5血凝HA試驗

()

51用多道微量移液器在微量反應(yīng)板的孔均加入換吸頭

.1~120.05mLPBS,。

52吸取抗原加入第孔反復(fù)抽打次混勻

.0.05mL,1,3~5。

53從第孔吸取抗原加入第孔混勻后吸取加入第孔如此進行對倍稀釋至

.10.05mL2,0.05mL3,

第孔從第孔吸取棄之換吸頭第孔作為紅細胞對照

11,110.025mL,。12。

54每孔均加入體積分數(shù)雞紅細胞懸液將雞紅細胞懸液充分搖勻后加入

.0.05mL0.5%()()。

55輕輕混勻室溫下靜置后觀察結(jié)果如果環(huán)境溫度太高可置環(huán)境下

.,(20℃~25℃)20min(,4℃)。

對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結(jié)果

。

56結(jié)果判定將反應(yīng)板傾斜觀察紅細胞若沒有呈淚滴狀流淌則判為陽性完全血凝不流

.:45°,,HA;(

淌的病毒最高稀釋倍數(shù)代表個血凝單位

)1(HAU)。

6血凝抑制HI試驗

()

61操作步驟

.

611血清樣品的處理待檢血清樣品需經(jīng)