標準解讀

《GB/T 25170-2010 畜禽基因組BAC文庫構建與保存技術規(guī)程》是一項國家標準，旨在為畜禽基因組的細菌人工染色體（Bacterial Artificial Chromosome, BAC）文庫構建及保存提供一套科學、規(guī)范的技術指導。該標準適用于所有涉及畜禽遺傳資源保護、開發(fā)和利用的研究機構或個人。

根據(jù)此標準，BAC文庫構建過程包括但不限于以下幾個關鍵步驟：首先是對目標生物樣本進行高質量DNA提??；其次是通過限制性內切酶切割獲得適當大小的DNA片段；接著是將這些片段連接到載體上，并轉化進宿主細胞中；最后是篩選陽性克隆并進行擴增培養(yǎng)以形成穩(wěn)定的文庫。對于每一步驟，《GB/T 25170-2010》都給出了具體的操作指南和技術參數(shù)要求，比如推薦使用的試劑種類、反應條件設置等，確保實驗結果的一致性和可重復性。

此外，該標準還詳細規(guī)定了如何對已構建好的BAC文庫進行長期保存。這涉及到適宜的存儲介質選擇（如甘油凍存）、溫度控制以及定期復蘇檢測等內容，目的是保證文庫在長時間存放后仍能保持其完整性和活性。同時，也強調了記錄管理的重要性，要求對每個環(huán)節(jié)的信息都要有詳盡準確的文檔記載，以便于后續(xù)查詢使用。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2010-09-26 頒布
  • 2011-03-01 實施
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文檔簡介

ICS6502030

B40..

中華人民共和國國家標準

GB/T25170—2010

畜禽基因組BAC文庫構建與

保存技術規(guī)程

TechnicalregulationoffarmanimalsgenomeBAClibrary

constructionandpreservation

2010-09-26發(fā)布2011-03-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T25170—2010

前言

本標準由中華人民共和國農業(yè)部提出

。

本標準由全國畜牧業(yè)標準化技術委員會歸口

(SAC/TC274)。

本標準起草單位中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所

:。

本標準主要起草人關偉軍馬月輝劉長青潘春留劉洪坤甫亞斌余露露

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T25170—2010

畜禽基因組BAC文庫構建與

保存技術規(guī)程

1范圍

本標準規(guī)定了畜禽基因組文庫構建方法

BAC。

本標準適用于豬牛羊馬驢雞鴨鵝等畜禽的基因組文庫構建與保存

、、、、、、、BAC。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內容或修訂版均不適用于本標準然而鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標準

。,。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術語和定義

下列術語和定義適用于本標準

。

31

.

基因組文庫genomelibrary

用重組技術將某種生物細胞的核的全部片段隨機地連接到載體上再轉移至適當?shù)乃?/p>

DNADNA,

主細胞中通過細胞增殖而形成的各個片段的無性繁殖系的總集

,。

32

.

細菌人工染色體bacterialartificialchromosomeBAC

,

以大腸桿菌致育因子為基礎利用現(xiàn)代重組技術體外人工合成的具有容納高分子量外源

,DNA

的特性載體

DNA。

33

.

DNA連接DNAligation

在連接酶催化下靶片段與載體相鄰的端磷酸與端羥基之間形成磷酸二酯

DNA,DNADNA5’3’

鍵的過程

。

34

.

感受態(tài)細胞competentcells

在特定條件下細胞膜通透性發(fā)生改變允許外源進入細胞內的特殊狀態(tài)下的受體細胞

,DNA。

35

.

電轉化electrotransformation

在高壓脈沖的作用下將外源導入感受態(tài)細胞的過程

,DNA。

36

.

脈沖場凝膠電泳pulsefieldgelelectrophoresisPFGE

,

利用脈沖場電泳系統(tǒng)電場方向周期性交替變化的功能而分離和鑒定生物大分子的技術

。

37

.

重組體recombinant

兩種以上不同來源的

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