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文檔簡(jiǎn)介
抗體的人工制備
人工抗體有四類:多克隆抗體單克隆抗體基因工程抗體催化抗體1歡迎下載可修改第一節(jié)多克隆抗體一、概念:采用傳統(tǒng)免疫方法,將抗原物質(zhì)經(jīng)不同途徑注入動(dòng)物體內(nèi),數(shù)次免疫后采血,分離血清,由此獲得抗血清即為多克隆抗體。簡(jiǎn)稱多抗。2歡迎下載可修改二、多克隆抗體用途1.用于抗原物質(zhì)的鑒別、定位、分析和提純。2.作為疾病的診斷、檢疫試劑。3.作為人和動(dòng)物的某些疾病的治療制劑。3歡迎下載可修改三、多克隆抗體制備過(guò)程4歡迎下載可修改第二節(jié)單克隆抗體一、概念:
是指由一個(gè)B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞(漿細(xì)胞)產(chǎn)生的針對(duì)單一抗原決定簇的抗體,簡(jiǎn)稱單抗。
特點(diǎn):高特異性、高均一性5歡迎下載可修改二、單抗與多抗的比較
特性多抗
單抗
對(duì)免疫原的要求免疫原純度高,不純的抗原即可抗體純度才高產(chǎn)生高純度抗體
抗體產(chǎn)生細(xì)胞多克隆性單克隆性
同質(zhì)性高度異質(zhì)高度同質(zhì)
特異性較高,與抗原上高,與特定多種決定簇結(jié)合決定簇結(jié)合
穩(wěn)定性較好較差
標(biāo)準(zhǔn)化較難簡(jiǎn)單
交叉反應(yīng)很常見(jiàn)不常見(jiàn)
沉淀反應(yīng)有大多數(shù)沒(méi)有6歡迎下載可修改二、單抗與多抗的比較
特性多抗
單抗
適用的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)適用大多數(shù)需適當(dāng)選擇抗體純度才高產(chǎn)生高純度抗體
供應(yīng)量有限無(wú)限
有效抗體含量
0.1~1.0懸浮培養(yǎng):0.01~0.05
(mg/mL)中空纖維:1.0~5.0
小鼠腹水:1.0~5.0
無(wú)關(guān)Ig含量
10~15體外培養(yǎng)液:無(wú)
(mg/mL)小鼠腹水:0.5~1.0
其他血清蛋白有體外培養(yǎng):少量牛血清白蛋白小鼠腹水:少量雜蛋白7歡迎下載可修改三、建立B細(xì)胞雜交瘤與單克隆抗體生產(chǎn)基本過(guò)程8歡迎下載可修改四、單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)
高度均一性:純度很高的均一性抗體
高度專一性:只對(duì)抗原分子上某一抗原決定簇起反應(yīng)。
大量產(chǎn)生及穩(wěn)定性:雜交瘤細(xì)胞能在體內(nèi)外無(wú)限繁殖之傳代。
9歡迎下載可修改五、單克隆抗體的應(yīng)用(一)在血清學(xué)技術(shù)方面。(二)在免疫學(xué)基礎(chǔ)研究方面。(三)在腫瘤治療方面。如生物導(dǎo)彈。(四)在抗原純化方面。(五)用于制備抗獨(dú)特型抗體疫苗。10歡迎下載可修改9、人的價(jià)值,在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣,抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20234:46:50PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心,不寬余請(qǐng)。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來(lái)懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望,作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個(gè)人炫耀什么,說(shuō)明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義,不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個(gè)人即使已登上頂峰,也仍要自強(qiáng)不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/39、人的價(jià)值,在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣,抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20234:46:50PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心,不寬余請(qǐng)。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來(lái)懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望,作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個(gè)人炫耀什么,說(shuō)明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義,不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個(gè)人即使已登上頂峰,也仍要自強(qiáng)不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/3第三節(jié)基因工程抗體一、概念:利用基因工程技術(shù)制備的抗體分子,稱為基因工程抗體。這是分子水平的抗體。優(yōu)勢(shì):去除或減少無(wú)關(guān)結(jié)構(gòu),保留或增加天然抗體特異性和生物學(xué)活性。
13歡迎下載可修改9、人的價(jià)值,在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣,抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20234:46:50PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心,不寬余請(qǐng)。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來(lái)懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望,作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個(gè)人炫耀什么,說(shuō)明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義,不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個(gè)人即使已登上頂峰,也仍要自強(qiáng)不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/3
基本制備過(guò)程:15歡迎下載可修改
是指在同一抗體分子中含有不同種屬來(lái)源抗體分子片段的抗體。
嵌合抗體多為“鼠-人”類型。一、嵌合抗體:
16歡迎下載可修改
將鼠抗體超變區(qū)基因嵌入人抗體Fab骨架區(qū)編碼基因中,再將此DNA片段與人Ig恒定區(qū)基因相連,轉(zhuǎn)染雜交瘤細(xì)胞,并表達(dá)嵌合的V區(qū)抗體。
二、重構(gòu)抗體:
三、單鏈抗體:
是將Ig的H鏈和L鏈的V區(qū)基因相連,轉(zhuǎn)染大腸桿菌表達(dá)的抗體分子,又稱單鏈FV分子。
17歡迎下載可修改
如:Ig相關(guān)分子:將抗體分子部分片段連接到與抗體無(wú)關(guān)的序列上得到。
噬菌體抗體:將已知特異性的抗體分子的所有V區(qū)基因在噬菌體中構(gòu)建基因庫(kù),用噬菌體感染細(xì)菌,模擬免疫選擇過(guò)程,使具有相應(yīng)特異性的重鏈和輕鏈可變區(qū)在噬菌體表面呈現(xiàn)出來(lái)。四、其他基因工程抗體:
五、全套抗體基因庫(kù)
18歡迎下載可修改第四節(jié)催化抗體一、概念:是具有催化活性的免疫球蛋白,也叫抗體酶。具有抗體的高度選擇性和酶的高效催化性。優(yōu)點(diǎn):具有抗體的高度選擇性和酶的高效催化性。
19歡迎下載可修改
如:細(xì)胞融合法、基因工程抗體技術(shù)、引入輔助因子法等。
二、催化抗體的制備:
三、催化抗體的應(yīng)用:
如:在抗腫瘤方面的應(yīng)用。在戒毒上也有重要應(yīng)用價(jià)值。20歡迎下載可修改9、人的價(jià)值,在招收誘惑的一瞬間被決定。03-2月-2303-2月-23Friday,February3,202310、低頭要有勇氣,抬頭要有低氣。***2/3/20234:46:50PM11、人總是珍惜為得到。03-2月-23**Feb-2303-Feb-2312、人亂于心,不寬余請(qǐng)。***Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來(lái)懲罰自己。03-2月-2303-2月-23**03February202314、抱最大的希望,作最大的努力。03二月2023**03-2月-2315、一個(gè)人炫耀什么,說(shuō)明他內(nèi)心缺少什么。。二月23*03-2月-23*03February202316、業(yè)余生活要有意義,不要越軌。**2/3/202317、一
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