犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜２３８８１—２００９

飼用纖維素酶活性的測定

濾紙法

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２００９０５２６發(fā)布２００９１００１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜２３８８１—２００９

前言

本標準由全國飼料工業(yè)標準化技術(shù)委員會提出并歸口。

本標準起草單位：國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心（武漢）。

本標準主要起草人：何鳳琴、楊林、錢窻、劉小敏、屈利文、黃婷、顏克亮。

Ⅰ

書

犌犅／犜２３８８１—２００９

飼用纖維素酶活性的測定

濾紙法

１范圍

本標準規(guī)定了以濾紙為底物，用還原糖比色法測定飼用纖維素酶活性的方法。

本標準適用于飼用纖維素酶活性的測定，定量檢測限為０．０２Ｕ／ｍＬ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗用水規(guī)格和試驗方法

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣

ＧＢ／Ｔ２０１９５動物飼料試樣的制備

３術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標準。

３．１

濾紙纖維素酶活性單位犳犻犾狋犲狉狆犪狆犲狉犮犲犾犾狌犾犪狊犲犪犮狋犻狏犻狋狔狌狀犻狋

在３７℃，ｐＨ５．５，反應(yīng)６０ｍｉｎ的條件下，每分鐘降解濾紙釋放１μｍｏｌ葡萄糖所需的酶量，定義為

一個濾紙纖維素酶活性單位，以Ｕ表示。

４原理

纖維素酶水解濾紙產(chǎn)生的纖維二糖、葡萄糖等還原糖能將堿性條件下的３，５二硝基水楊酸還原，

生成棕紅色的氨基化合物，在５４０ｎｍ波長處有最大吸收，在一定范圍內(nèi)酶解產(chǎn)生的還原糖的量與反應(yīng)

液的吸光值成正比。

５試劑和材料

本標準使用的試劑均為分析純，水均為符合ＧＢ／Ｔ６６８２中規(guī)定的二級水。

５．１酒石酸鉀鈉（Ｃ４Ｈ４ＫＮａＯ６·４Ｈ２Ｏ）。

５．２苯酚。

５．３亞硫酸鈉。

５．４氫氧化鈉溶液（２００ｇ／Ｌ）：稱取氫氧化鈉２０．０ｇ，加１００ｍＬ水溶解。

５．５檸檬酸溶液（０．１ｍｏｌ／Ｌ）：稱取檸檬酸（Ｃ６Ｈ８Ｏ７·Ｈ２Ｏ）２．１０ｇ，加水溶解定容至１００ｍＬ。

５．６檸檬酸鈉溶液（０．１ｍｏｌ／Ｌ）：稱取檸檬酸鈉（Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７·２Ｈ２Ｏ）２．９４ｇ，加水溶解定容至

１００ｍＬ。

５．７檸檬酸鹽緩沖液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ５．５）：稱取檸檬酸（Ｃ６Ｈ８Ｏ７·Ｈ２Ｏ）１０．５ｇ