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文檔簡介
實驗微生物菌落的觀察第一頁,共十九頁,2022年,8月28日目的要求學會觀察、識別各種不同的微生物菌落的方法。掌握平板菌落計數(shù)的方法,運用所學的知識詳細的描述所分離平板上的各種微生物菌落。學習并掌握斜面接種的操作技術(shù)。第二頁,共十九頁,2022年,8月28日實驗原理
對于一些難區(qū)別的菌落還應(yīng)該借助顯微鏡來觀察其細胞形態(tài)以進一步做出正確的判斷。第三頁,共十九頁,2022年,8月28日實驗材料實驗三所作的平板培養(yǎng)物:
A,在細菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落;
B,在霉菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落。實驗二所作的試管斜面,酒精燈、接種環(huán)等。菌種:大腸桿菌E.coli枯草桿菌B.subtilis枯草桿菌B.subtilis第四頁,共十九頁,2022年,8月28日實驗程序Ⅰ(觀察描述菌落特征)運用所掌握的各種微生物菌落的特點,觀察、識別、描述所做樣品的兩個平板上的所有菌落,并將結(jié)果填入表1中。常用的菌落描述詞語:
大小:大、中、小、針尖狀形狀:圓形、隆起、扁平、假根狀、不規(guī)則狀等;
邊緣情況:整齊、波形、裂葉狀、鋸齒狀等
表面情況:干燥、濕潤、光滑、皺褶、顆粒狀、龜裂狀等;第五頁,共十九頁,2022年,8月28日樣品來源培養(yǎng)基類型菌落類型特征描述菌落數(shù)(近似值)大小形狀顏色表面情況邊緣情況aA1A2B3B4bA1A2B3B4表1平板菌落特征描述第六頁,共十九頁,2022年,8月28日某些有代表性的菌落圖片:細菌第七頁,共十九頁,2022年,8月28日第八頁,共十九頁,2022年,8月28日酵母菌啤酒酵母菌落一般較細菌菌落大且厚,表面濕潤,粘稠,易被挑起,多為乳白色、土黃色,少數(shù)呈紅色。
第九頁,共十九頁,2022年,8月28日常見的酵母菌的菌落第十頁,共十九頁,2022年,8月28日菌落形態(tài)較大,質(zhì)地一般比放線菌疏松,外觀干燥,不透明,呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀;菌落與培養(yǎng)基的連接緊密,不易挑取,菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致等。霉菌第十一頁,共十九頁,2022年,8月28日霉菌的菌落青霉屬毛霉屬
第十二頁,共十九頁,2022年,8月28日定義:根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征而設(shè)計的計數(shù)方法,即一個菌落代表一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù)目,即可計算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù),故又稱活菌計數(shù)。對土壤中的微生物進行計數(shù),將結(jié)果填入表2中。實驗程序Ⅱ(平板菌落計數(shù))第十三頁,共十九頁,2022年,8月28日表2土壤中微生物計數(shù)結(jié)果
稀釋度10-510-61g樣品活菌數(shù)12平均12平均細菌菌落數(shù)霉菌菌落數(shù)計數(shù)方法:每克土壤的菌數(shù)=同一稀釋度幾次重復的菌落平均數(shù)×10×稀釋倍數(shù)
計算結(jié)果時,常按下列標準從接種后的3個稀釋度中選擇一個合適的稀釋度,求出每克菌劑中的含菌數(shù)。
(1)同一稀釋度各個重復的菌數(shù)相差不太懸殊。
(2)細菌、放線菌、酵母菌以每皿30—300個菌落為宜,霉菌以每皿10—100個菌落為宜。選擇好計數(shù)的稀釋度后,即可統(tǒng)計在平板上長出的菌落數(shù),統(tǒng)計結(jié)果按下式計算。第十四頁,共十九頁,2022年,8月28日實驗程序Ⅲ(無菌操作技術(shù)
)
在酒精燈火焰旁操作,將所給的兩種菌種無菌操作,轉(zhuǎn)接到大試管斜面,并貼標簽,培養(yǎng)。點燃酒精燈左手夾住兩試管:斜面向上,45~0度角。灼燒接種環(huán)右手拔棉塞,管口過火取菌標記培養(yǎng)第十五頁,共十九頁,2022年,8月28日第十六頁,共十九頁,2022年,8月28日第十七頁,共十九頁,2022年,8月28日將觀察到的菌落
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