犐犆犛６５．０２０．３０

犅４４

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１４９２６．５８—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５８—２００１

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染性犬肝炎病毒檢測(cè)方法

犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔犪狀犻犿犪犾—犕犲狋犺狅犱犳狅狉犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳

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２００８１２０３發(fā)布２００９０３０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜１４９２６．５８—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１４９２６《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物》共５４個(gè)部分，為不同微生物和病毒檢測(cè)技術(shù)方法。

本部分自實(shí)施之日起代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５８—２００１《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染性犬肝炎病毒檢測(cè)方法》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１４９２６．５８—２００１相比主要技術(shù)差異如下：

ａ）傳染性犬肝炎是犬的主要烈性傳染病之一，在我國(guó)犬群中廣泛流行，是基礎(chǔ)級(jí)犬和ＳＰＦ犬的

必檢項(xiàng)目；

ｂ）“６結(jié)果判定”中增加了“６．３基礎(chǔ)級(jí)犬群體免疫抗體合格率：免疫抗體合格率＝（被檢動(dòng)物

抗體陽性數(shù)／被檢動(dòng)物總數(shù)）×１００％?；A(chǔ)級(jí)犬群體免疫抗體合格率大于等于７０％以上可判

為該犬群免疫合格”內(nèi)容。

本部分由全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。

本部分由全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)負(fù)責(zé)起草。

本部分主要起草人：田克恭、賀爭(zhēng)鳴、范薇。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１４９２６．５８—２００１。

Ⅰ

書

犌犅／犜１４９２６．５８—２００８

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染性犬肝炎病毒檢測(cè)方法

１范圍

ＧＢ／Ｔ１４９２６的本部分規(guī)定了傳染性犬肝炎病毒（ＩＣＨＶ）的檢測(cè)方法、試劑等。

本部分適用于犬ＩＣＨＶ的檢測(cè)。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過ＧＢ／Ｔ１４９２６的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文

件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成

協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本

部分。

ＧＢ／Ｔ１４９２６．５０實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

ＧＢ／Ｔ１４９２６．５４實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血凝抑制試驗(yàn)

３原理

根據(jù)免疫學(xué)原理，采用ＩＣＨＶ抗原檢測(cè)犬血清中ＩＣＨＶ抗體；或根據(jù)ＩＣＨＶ在一定的條件下，能凝

集人“Ｏ”型紅細(xì)胞，這種凝集紅細(xì)胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理，檢測(cè)犬血清中ＩＣＨＶ抗體。

４主要試劑和器材

４．１試劑

４．１．１ＥＬＩＳＡ抗原

４．１．１．１特異性抗原

用ＩＣＨＶ感染ＭＤＣＫ細(xì)胞，接種３ｄ～４ｄ后，當(dāng)病變達(dá)＋＋＋～＋＋＋＋（－陰性；＋輕；＋＋中；

＋＋＋重；＋＋＋＋嚴(yán)重，下同）時(shí)收獲。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液再

經(jīng)超速離心濃縮后制成ＥＬＩＳＡ抗原。

４．１．１．２正?？乖?/p>

ＭＤＣＫ細(xì)胞凍融破碎后，經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液。

４．１．２血凝素

ＩＣＨＶ接種ＭＤＣＫ細(xì)胞，培養(yǎng)３ｄ～４ｄ，當(dāng)病變達(dá)＋＋＋～＋＋＋＋時(shí)收獲培養(yǎng)物。凍融三次或

超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液分裝后低溫保存。

４．１．３陽性血清

ＩＣＨＶ實(shí)驗(yàn)感染或自然感染的犬血清。

４．１．４陰性血清