鉀磷鈣鎂礦質(zhì)元素對(duì)白靈側(cè)耳菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)的影響,農(nóng)業(yè)工程論文白靈側(cè)耳〔Pleurotusnebrodensis〕又名阿魏蘑、天山神菇，商品名白靈菇，是我們國(guó)家一種重要的食用菌,其子實(shí)體肥大潔白、營(yíng)養(yǎng)豐富，藥用價(jià)值高。1983年我們國(guó)家初次試驗(yàn)栽培獲得成功,1997年在北京實(shí)現(xiàn)規(guī)?；虡I(yè)栽培，此后規(guī)模和產(chǎn)量逐年提高，根據(jù)中國(guó)食用菌協(xié)會(huì)統(tǒng)計(jì)，2007年全國(guó)總產(chǎn)量已到達(dá)31萬(wàn)噸，產(chǎn)地普遍達(dá)到南北諸省，尤其京、津、冀、魯、豫省區(qū)。隨著白靈側(cè)耳生產(chǎn)發(fā)展，白靈側(cè)耳遺傳育種、栽培生理、加工技術(shù)以及營(yíng)養(yǎng)與藥用價(jià)值等方面遭到廣泛關(guān)注。但是從當(dāng)前的研究情況來(lái)看，更多的研究集中在白靈側(cè)耳遺傳多樣性以及栽培管理技術(shù)、培養(yǎng)基配方上,而與礦質(zhì)元素對(duì)白靈側(cè)耳生長(zhǎng)發(fā)育作用相關(guān)的研究很少.食用菌在生長(zhǎng)、發(fā)育經(jīng)過(guò)中，需要一定的礦質(zhì)元素，如P、S、K、Mg、Ca、Fe、Cu、Mo、Mn、Zn、Co等，在這些元素中，以P、S、K、Mg、Ca最重要.JONATHAN〔2001〕研究表示清楚，礦質(zhì)元素K、Mg、Ca能夠提高近裸香菇〔Lentinussubnudus〕和裂褶菌〔Schizophyllumcommune〕菌絲生長(zhǎng)速度,同年報(bào)道礦質(zhì)元素Ca和Mg是Psathyerellaatroumbonata的最佳大量元素，而Cu、Zn是最佳微量元素.WIREKO〔1988〕報(bào)道合成液體培養(yǎng)基補(bǔ)充磷、鉀、鎂等無(wú)機(jī)鹽有利于提高菌絲生長(zhǎng)速度，且KH2PO4濃度與干菌絲體產(chǎn)量呈線性關(guān)系；碗豆提取物培養(yǎng)基中則不需要補(bǔ)充鎂，但補(bǔ)充低濃度鎂〔0.1~0.15g/L〕時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度有少量增加.閆永亮研究表明150mg/kg鈣、3mg/kg鋅、20mg/kg鐵、200mg/kg銅是促進(jìn)香菇生長(zhǎng)發(fā)育的最佳配比。筆者通過(guò)向白靈側(cè)耳培養(yǎng)基質(zhì)中添加鉀、磷、鈣、鎂4種礦質(zhì)元素，重點(diǎn)分析其對(duì)菌絲生長(zhǎng)、子實(shí)體生長(zhǎng)的影響，以期為白靈側(cè)耳高產(chǎn)栽培提供參考。1材料與方式方法1.1供試菌株白靈側(cè)耳〔P.nebrodensis〕中農(nóng)翅鮑由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌工程技術(shù)研究中心提供。1.2培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)照培養(yǎng)料配方：80%棉籽殼，18%麥麩，2%石灰，料水比1∶1.3〔m/v〕.參試培養(yǎng)料配方：對(duì)照培養(yǎng)料中分別添加鉀〔以KCl為添加劑，K+濃度為0.05%、0.1%、0.2%、0.4%和0.6%〕、鎂〔以MgCl26H2O為添加劑，Mg2+濃度為0.005%、0.01%、0.02%、0.03%和0.04%〕、磷〔以NaH2PO4為添加劑，PO43-濃度為0.02%、0.04%、0.08%、0.10%和0.15%〕、鈣〔以CaCl22H2O為添加劑，Ca2+濃度為0.3%、0.6%、1.2%、2.4%和4.8%〕4種礦質(zhì)元素，共20個(gè)配方。試劑：KCl、MgCl26H2O、NaH2PO4、CaCl22H2O均為國(guó)產(chǎn)分析純。1.3菌絲培養(yǎng)試驗(yàn)30mm200mm大試管裝培養(yǎng)料80g〔濕重〕，121℃高溫滅菌2h,然后冷卻至室溫，接種麥粒種1小匙〔5粒〕，置于〔231〕℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)15d,每3d劃線，測(cè)定生長(zhǎng)速度〔mm/d〕，記錄菌絲生長(zhǎng)勢(shì)。每處理3個(gè)重復(fù)。1.4栽培試驗(yàn)17cm35cm0.04cm聚丙烯塑料袋裝料400g〔干重〕，121℃高溫滅菌，接種量麥粒種2小匙，〔231〕℃培養(yǎng)室內(nèi)發(fā)菌培養(yǎng)，菌絲滿袋后繼續(xù)培養(yǎng)50d,然后4~12℃菇房進(jìn)行低溫催蕾，12~16℃出菇管理,并記錄產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率。每處理30袋。生物學(xué)效率=子實(shí)體鮮重/培養(yǎng)料干重100%1.5統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件MicrosoftExcel與SPSS17.0進(jìn)行分析。各處理平均數(shù)間的多重比擬采用鄧肯氏新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)〔Duncansnewmultiplerangetest〕，差異顯著性水平定為=0.05,極差異顯著性水平定為=0.01.2結(jié)果與分析2.1礦質(zhì)元素對(duì)白靈側(cè)耳菌絲生長(zhǎng)速度的影響2.1.1K+對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響基質(zhì)中添加KCl,當(dāng)K+濃度在0.10%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，為〔12.10.85〕mm/d,高于對(duì)照組[〔11.20.14〕mm/d],但對(duì)照、K1、K2三個(gè)處理的生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)差異均不顯著；當(dāng)K+濃度超過(guò)0.2%時(shí)，與對(duì)照組相比，生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)均顯著下降〔表1〕。因而，基質(zhì)中補(bǔ)充鉀，濃度不宜過(guò)高，應(yīng)控制在0.1%以內(nèi)?！颈?】2.1.2Ca2+對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響研究結(jié)果〔表2〕顯示，基質(zhì)中添加CaCl22H2O,當(dāng)Ca2+濃度為0.3%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度略快于對(duì)照組，但對(duì)照、C1、C2三個(gè)處理的生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)差異均不顯著；而當(dāng)Ca2+濃度1.2%時(shí)則表現(xiàn)出顯著的抑制作用，當(dāng)Ca2+為2.4%時(shí)，菌絲不萌發(fā)。因而，基質(zhì)中補(bǔ)充CaCl22H2O時(shí)，Ca2+濃度應(yīng)不高于0.6%.2.1.3PO43-對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響當(dāng)基質(zhì)中添加PO43-離子濃度為0.02%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度的促進(jìn)效果顯著，為〔12.50.14〕mm/d;當(dāng)PO43-離子濃度為0.04%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度略高于對(duì)照；當(dāng)PO43-濃度0.08%時(shí)，菌絲的生長(zhǎng)速度與對(duì)照相比，呈現(xiàn)顯著受抑制。從生長(zhǎng)勢(shì)來(lái)看，P1、P2與對(duì)照生長(zhǎng)旺盛，而PO43-濃度0.08%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)較弱〔表3〕。因而，基質(zhì)中補(bǔ)充NaH2PO4時(shí)，PO43-離子濃度應(yīng)控制在0.04%以內(nèi)。【表2.3】2.1.4Mg2+對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響基質(zhì)中添加MgCl26H2O,在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，Mg2+濃度對(duì)白靈側(cè)耳菌絲生長(zhǎng)速度有較好促進(jìn)效果〔表4〕。當(dāng)Mg2+濃度為0.005%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度快于對(duì)照，且菌絲潔白、濃密；試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，隨著Mg2+濃度的升高，菌絲生長(zhǎng)速度雖逐步降低，但都高于對(duì)照處理。當(dāng)Mg2+濃度到達(dá)0.04%時(shí)，菌絲稀疏，生長(zhǎng)勢(shì)弱。因而，基質(zhì)中補(bǔ)充MgCl26H2O時(shí)，Mg2+離子濃度應(yīng)控制在0.04%以內(nèi)?！颈?】2.2礦質(zhì)元素對(duì)白靈側(cè)耳子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響4種礦質(zhì)元素對(duì)白靈側(cè)耳產(chǎn)量或生物學(xué)效率的影響差異較大，與對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響有大致類似性?；|(zhì)中補(bǔ)充KCl,K1、K2、K3三個(gè)處理〔濃度在0.05%~0.20%〕產(chǎn)量略高于對(duì)照，但統(tǒng)計(jì)分析差異不顯著；而高濃度K+導(dǎo)致產(chǎn)量顯著低于對(duì)照?；|(zhì)中補(bǔ)充CaCl22H2O,產(chǎn)量低于對(duì)照，十分是高濃度Ca2+處理〔C3,C4,C5〕，菌絲生長(zhǎng)緩慢或菌絲不萌發(fā)，無(wú)法出菇，因此無(wú)產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。基質(zhì)中補(bǔ)充NaH2PO4時(shí)，產(chǎn)量最高的是P1處理，但實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)差異不顯著。基質(zhì)中補(bǔ)充MgCl26H2O時(shí)，M1、M2、M3三個(gè)處理產(chǎn)量較高，但與對(duì)照差異不顯著〔表5〕。除此之外，高濃度礦質(zhì)元素處理的污染率和畸形率比擬高，即表中K5、P4、P5、M5畸形率較高。造成這種現(xiàn)象的原因可能是礦質(zhì)元素濃度過(guò)高，對(duì)子實(shí)體的生長(zhǎng)造成了毒害.對(duì)栽培周期的影響：總的看來(lái)，基質(zhì)補(bǔ)充K+、PO43-、Ca2+、Mg2+不能縮短白靈側(cè)耳現(xiàn)蕾時(shí)間，但適量K+和Mg2+能夠縮短生長(zhǎng)周期〔表5〕。與對(duì)照〔162.8d〕相比，M1〔Mg2+濃度0.005%〕、M2〔Mg2+濃度0.01%〕、M3〔Mg2+濃度0.02%〕和K1處理〔K+濃度0.05%〕栽培周期分別縮短了8.2、7.6、4.3和4.3d.PO43-和Ca2+的添加對(duì)白靈側(cè)耳栽培周期起到延遲作用?！颈?】3討論礦質(zhì)元素磷、鉀、鎂、鈣、鐵、鋅、錳等元素含量直接影響食用菌的生長(zhǎng)和生理活性，華而不實(shí)磷、鉀、鎂、鈣最重要，磷是核酸、酶、磷蛋白等的重要成分；鎂是ATP構(gòu)成經(jīng)過(guò)中磷酸轉(zhuǎn)移酶需要的元素，也是三羧酸循環(huán)經(jīng)過(guò)中異檸檬酸脫氫酶所需要的元素；鉀調(diào)節(jié)細(xì)胞浸透壓;鈣是細(xì)胞的第二信使，調(diào)控多種重要的生理生化防御反響，維持細(xì)胞的正常生理功能。食用菌礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)來(lái)源于栽培基質(zhì)，但不同食用菌對(duì)礦質(zhì)元素的營(yíng)養(yǎng)要求不同。從本研究結(jié)果來(lái)看，培養(yǎng)基添加K+0.10%、Mg2+0.005%~0.04%、PO43-0.02%~0.04%對(duì)菌絲生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，但基質(zhì)中補(bǔ)充CaCl22H2O時(shí)，Ca2+濃度0.60%時(shí)則表現(xiàn)出顯著的抑制作用，當(dāng)Ca2+為2.4%時(shí)，菌絲不萌發(fā)，廖星昊、梁宇斌等在Ca2+對(duì)金針菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響研究中有類似結(jié)論.生產(chǎn)實(shí)踐中，培養(yǎng)料中通常補(bǔ)充石灰1%~2%,并不影響菌絲生長(zhǎng)和子實(shí)體生長(zhǎng)，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果不一致，可能由于本實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充CaCl22H2O時(shí)，提高Ca2+濃度的同時(shí)引進(jìn)高濃度Cl-,抑制了菌絲生長(zhǎng)。揣測(cè)適宜鈣離子濃度與鈣化合物種類有關(guān)。從礦質(zhì)元素對(duì)子實(shí)體產(chǎn)量的影響來(lái)看，低濃度的鉀、磷、鎂均能夠提高子實(shí)體產(chǎn)量，但效果并不特別顯著。高濃度則抑制子實(shí)體生長(zhǎng)且畸形率較高，這可能是由于礦質(zhì)元素濃度過(guò)高，引起子實(shí)體生長(zhǎng)經(jīng)過(guò)中所需營(yíng)養(yǎng)不平衡，造成子實(shí)體畸形。對(duì)栽培周期的總體影響來(lái)看，低濃度的K+〔0.1%〕和Mg2+〔0.02%〕添加，會(huì)縮短白靈側(cè)耳的栽培周期；Ca2+添加和高濃度的Mg2+〔0.02%〕延長(zhǎng)白靈側(cè)耳的生長(zhǎng)周期。由此得出，提早進(jìn)入后熟期與縮短栽培周期不存在線性關(guān)系，揣測(cè)白靈側(cè)耳子實(shí)體的生長(zhǎng)需要的能量累積與進(jìn)入后熟期的時(shí)間先后沒(méi)有關(guān)系。綜合上述結(jié)果，基質(zhì)中補(bǔ)充KCl、NaH2PO4、MgCl26H2O時(shí)，K+、PO43-和Mg2+濃度以0.1%、0.08%和0.01%最佳，而CaCl22H2O不合適用作白靈側(cè)耳鈣源。由于不同培養(yǎng)基配方中，各種礦質(zhì)元素的背景值差異，因而，基質(zhì)中補(bǔ)充礦質(zhì)元素時(shí)不同配方，補(bǔ)充量亦不一樣。以下為參考文獻(xiàn)[1]戴玉成，周麗偉，楊祝良，等.中國(guó)食用菌名錄[J].菌物學(xué)報(bào)，2018,29〔1〕:1-21.[2]甘勇，呂作舟.阿魏蘑多糖理化性質(zhì)及免疫活性研究[J].菌物系統(tǒng)，2001,20〔2〕:28.[3]王波，唐利民，熊鷹，等.白靈側(cè)耳〔白靈菇〕種質(zhì)資源評(píng)價(jià)[J].菌物系統(tǒng)，2003,22〔3〕:502-503.[4]胡潤(rùn)芳，薛珠政，唐永暉.白靈側(cè)耳菌株間的RAPD分析[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2006,21〔4〕:346-349.[5]譚琦，ROMAINECP,SCHLAGENHAUFERC,等.中國(guó)六個(gè)白靈菇〔Pleurotusnebrodensis〕商業(yè)菌株的DNA指紋圖譜分析[J].食用菌學(xué)報(bào)，2006,13〔1〕：13-19.[6]馮作山，胡娟秀，管道平，等.混料設(shè)計(jì)優(yōu)化白靈側(cè)耳栽培配方[J].食用菌學(xué)報(bào)，2018,18〔2〕:27-29.