標(biāo)準解讀

《GB 15193.4-2003 鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗》相比于其前版《GB 15193.4-1994》，主要在以下幾個方面進行了更新與調(diào)整：

  1. 試驗原理的完善：2003版標(biāo)準對鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗（Ames試驗）的基本原理描述更加詳盡，加入了更多關(guān)于遺傳毒性測試機制和哺乳動物微粒體酶系統(tǒng)作用的科學(xué)解釋，提高了理論指導(dǎo)的精確性和全面性。

  2. 試驗方法的優(yōu)化：新版標(biāo)準細化了實驗操作步驟，包括培養(yǎng)基制備、菌株選擇、受試物處理及劑量設(shè)定等方面，增加了操作的規(guī)范性和可重復(fù)性。特別地，對于試驗中使用的哺乳動物微粒體酶S9混合液的制備和使用條件給出了更具體的要求，以確保試驗結(jié)果的準確性和可靠性。

  3. 結(jié)果判定標(biāo)準的修訂：2003版標(biāo)準對試驗結(jié)果的判定準則進行了明確和細化，包括正負對照的有效性判定、受試物的致突變活性判斷標(biāo)準等，使得實驗結(jié)論的得出更為嚴謹科學(xué)。

  4. 安全性和質(zhì)量管理的加強：新版本強調(diào)了實驗室生物安全措施和質(zhì)量控制的重要性，增加了對實驗環(huán)境、人員防護、樣品管理和實驗記錄等方面的具體要求，確保實驗過程的安全及數(shù)據(jù)的可信度。

  5. 適用范圍和術(shù)語定義的更新：標(biāo)準中對相關(guān)專業(yè)術(shù)語和定義進行了修訂和完善，使其更加符合國際通行標(biāo)準，并明確了該試驗方法的適用范圍，便于檢驗機構(gòu)和研究人員正確理解和執(zhí)行。

  6. 參考文獻和標(biāo)準引用的更新：2003版標(biāo)準引用了更多最新的科學(xué)研究成果和國際標(biāo)準，反映了該領(lǐng)域內(nèi)的最新進展，增強了標(biāo)準的權(quán)威性和實用性。


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  • 被代替
  • 已被新標(biāo)準代替
  • 2003-09-24 頒布
  • 2004-05-01 實施
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GB 15193.4-2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗_第1頁
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文檔簡介

CS07.100C53中華人民共和國國家標(biāo)準GB：15193.4一2003代替GB15193.4一1994鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗Salmonellatyphimurium/mammalsmicrosomalenzymetest(Amestest)2003-09-24發(fā)布2004-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標(biāo)準化管理委員會

GB15193.4—2003前本標(biāo)準全文強制。本標(biāo)準代替GB15193.4一1994《鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗》本標(biāo)準與GB15193.4一1994相比主要修改如下：a）在"范圍”中增加了受試物的具體內(nèi)容：食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學(xué)、生物和物理因素，檢驗對象包括食品添加劑(含營養(yǎng)強化劑）、食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設(shè)備、洗滌劑、消毒劑農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等;增加本標(biāo)準的不適用范圍：b增加對照組的設(shè)置；在“培養(yǎng)基制備及試劑的配制"中將-1.5%瓊脂培養(yǎng)基的配制方法中將“加蒸雷水400mL”改為“加蒸水至400mL"；-0.5mmol/L組氨酸-生物素溶液（誘變試驗用)配制方法中的L-組氨酸加入量由“17.4mg”改為"19.5mg”-頂層培養(yǎng)基制備方法中每100mL頂層瓊脂中"加10mL10.5mol/L”改為“加10mL0.5mmol/L";-將L-組氨酸溶液和0.5mol/LD-生物素溶液（鑒定菌株用)中的"0.5mol/L”改為“0.5mmol/L”,其后面內(nèi)容中的“0.5mol/L生物素”的濃度均改為“0.5mmol/L”。將原標(biāo)準"7受試物劑量、溶劑和特殊處理”標(biāo)題改為“試驗設(shè)計及受試物的特殊處理”.并增加對照組設(shè)置內(nèi)容；刪除"Ames試驗報告”的內(nèi)容e）本標(biāo)準的附錄A為規(guī)范性附錄。自本標(biāo)準實施之日起,GB15193.4—1994同時廢止。本標(biāo)準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標(biāo)準起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、北京醫(yī)科大學(xué)、浙江醫(yī)科大學(xué)，本標(biāo)準主要起草人：戴寅、丁蘭、金鐘初、郭世萍本標(biāo)準于1994年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。

GB15193.4—2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗范圍本標(biāo)準規(guī)定了Ames試驗的基本技術(shù)要求本標(biāo)準適用于評價食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學(xué)生物和物理因素的致突變作用，檢驗對象包括食品添加劑（含營養(yǎng)強化劑)食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設(shè)備、洗滌劑、消毒劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等。本標(biāo)準不適用于具有殺菌和/或抑菌作用的受試物.不適用于具有妨礙哺乳動物細胞復(fù)制系統(tǒng)的受試物2原理鼠傷寒沙門氏菌的突變型(即組氨酸缺陷型)菌株在無組氨酸的培養(yǎng)基上不能生長,在有組氨酸的培養(yǎng)基上可以正常生長。但如在無組氨酸的培養(yǎng)基中有致突變物存在時,則沙門氏菌突變型可回復(fù)突變?yōu)橐吧?表現(xiàn)型),因而在無組氨酸培養(yǎng)基上也能生長，故可根據(jù)菌落形成數(shù)量，檢查受試物是否為致突變物。某些致突變物需要代謝活化后才能使沙門氏菌突變型產(chǎn)生回復(fù)突變,代謝活化系統(tǒng)可以用多氯聯(lián)苯(PCB)誘導(dǎo)的大鼠肝勾漿（S-9)制備的S-9混合液3儀器實驗室常用設(shè)備3.1低溫高速離心機，低溫冰箱（-3.2(－80℃)或液氮罐，潔凈工作臺，恒溫培養(yǎng)箱，恒溫水浴，蒸氣壓力鍋.勺漿器等。4試劑培養(yǎng)基成分或試劑除說明外至少應(yīng)是化學(xué)純.無誘變性。避免重復(fù)高溫處理,選擇適當(dāng)保存溫度和期限，如肉湯保存于4℃不超過六個月，其他詳見下述各培養(yǎng)基及溶液說明。4.1營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基牛肉膏2.58陜陳(或混合蛋白陳)5.0g氯化鈉2.5g磷酸氫二鉀(K.HPO，·3H.O)1.3g蒸餡水500mL加熱溶解,調(diào)pH至7.4.分裝后0.103MPa20min滅菌,普通冰箱保存?zhèn)溆?，保存期不超過半年4.2營養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基用作基因型鑒定

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