歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！第九單元生物技術(shù)實(shí)踐專題二十三傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應(yīng)用考點(diǎn)1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.[2021陜西渭南六校聯(lián)考,15分]回答下列有關(guān)泡菜制作的問題:(1)制作泡菜時,所用鹽水需煮沸,其目的是。為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的作用是。(2)泡菜制作過程中,乳酸發(fā)酵的過程即乳酸菌進(jìn)行的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有、和等。(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi),泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是,原因是。2.[2020河北九校聯(lián)考,15分]請回答下列利用微生物發(fā)酵制作食品的相關(guān)問題:(1)果酒制作離不開酵母菌,酵母菌是兼性厭氧型微生物,在、呈的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(2)在變酸的酒的表面可以觀察到一層白色菌膜,其形成原因是。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)?再轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷?3)民間制作腐乳時,當(dāng)豆腐上長出毛霉后,要對豆腐進(jìn)行裝瓶,制作后期要加入酒和鹵湯,其中酒含量一般控制在左右,若酒精含量過高,會導(dǎo)致。(4)工業(yè)化生產(chǎn)以上食品,需要對微生物進(jìn)行純化。不同微生物培養(yǎng)的溫度和時間往往不同,可以每隔24小時統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目。在一定的培養(yǎng)條件下,依據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上形成菌落的(請寫出兩種)等特征可以區(qū)分不同的菌落。考點(diǎn)2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用3.[2021安徽示范高中聯(lián)考,15分]大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細(xì)菌,其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng),使菌落呈黑色。其培養(yǎng)基配方如表所示。成分蛋白胨乳糖磷酸二氫鉀瓊脂蒸餾水2%的伊紅水溶液0.5%的美藍(lán)水溶液含量10g10g2g20~30g1000mL20mL13mL回答下列問題:(1)該培養(yǎng)基中,蛋白胨為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)有和維生素。(2)在接種大腸桿菌前,需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,觀察是否有菌落生成,其目的是。(3)為了檢測嚴(yán)重污染的水體中大腸桿菌的數(shù)量,將水樣適當(dāng)稀釋后,取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中,應(yīng)選擇顏色為的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù),其原理是。(4)將1mL水樣稀釋1000倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。(5)除利用特定培養(yǎng)基選擇鑒定某種細(xì)菌外,還可以依據(jù)對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。4.[2020河北唐山模擬,15分]在日常生活中,人們非常重視食品安全問題。當(dāng)食品中的大腸桿菌數(shù)目超過某一限定值之后會對人體造成嚴(yán)重危害,因此,大腸桿菌含量是檢測食品衛(wèi)生狀況的重要指標(biāo)。以下是能夠檢測大腸桿菌數(shù)量的三種方法?；卮鹣铝袉栴}:(1)平板計(jì)數(shù)法:培養(yǎng)大腸桿菌通常使用(填“LB”或“查氏”)培養(yǎng)基,其成分有酵母膏、蛋白胨、NaCl、H2O、X,其中為大腸桿菌提供氮源的是,X代表。(2)濾膜法:將已知體積的水過濾后,將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)色。利用該方法所統(tǒng)計(jì)的樣品中的菌落數(shù)往往較實(shí)際值低的原因是。(3)多管發(fā)酵法:根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測水樣中的大腸桿菌。該方法使用的是乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,其乳糖可為大腸桿菌提供和。1.[2021四川綿陽一診,15分]米酒酒精含量低,口味香甜醇美,深受人們的喜愛。家庭制作米酒時,一般先把糯米淘凈,蒸熟,攤開冷透;然后再將酒曲浸水活化,直到冒出魚眼大小的氣泡;最后將冷卻的熟米與活化的酒曲混合后再進(jìn)行發(fā)酵。回答下列問題:(1)酒曲中的微生物主要是酵母菌,酵母菌的呼吸類型是。酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵的反應(yīng)式是。(2)酒曲浸水后會被活化的原因是酒曲中的微生物。(3)將冷卻的熟米與活化的酒曲混合后,裝入一個潔凈的泡菜壇里進(jìn)行發(fā)酵,(填操作)可保證無氧環(huán)境。(4)室內(nèi)溫度在10℃左右時,可用棉絮將泡菜壇包裹起來,因?yàn)榻湍妇M(jìn)行酒精發(fā)酵的最適溫度是。米酒酒精度數(shù)一般不會很高,原因是。2.[2021廣東廣州階段訓(xùn)練,15分]控制飲用水中的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施,回答下列與檢驗(yàn)飲用水中的大腸桿菌有關(guān)的問題。(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時,有時需要將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為。如圖所示為四種菌落分布圖,在這些菌落分布中,一般不能由該方法得到的是(填字母)。用上述方法檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(填“需要”或“不需要”)設(shè)置空白對照,原因是。(3)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時,一般選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因而遺漏菌落的數(shù)目。若分別取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基中大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為。(4)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比接種水樣中活菌的實(shí)際數(shù)目(填“高”或“低”),原因是。3.[2021長春質(zhì)量監(jiān)測,15分]豐富且不可食用的木質(zhì)纖維素被作為潛在原料用于生產(chǎn)乙醇,這首先需要獲得高產(chǎn)纖維素酶的纖維素分解菌。如圖是從腐殖土中篩選纖維素分解菌的流程,請分析回答:腐殖土溶液→選擇培養(yǎng)→①→將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(1)圖中步驟①為,鑒別培養(yǎng)基中應(yīng)加入。(2)纖維素分解菌可產(chǎn)生纖維素酶,纖維素酶至少包括三種組分,為進(jìn)一步確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行。纖維素酶活性的測定方法為。(3)利用纖維素生產(chǎn)乙醇時,發(fā)酵罐中還需要接種菌,發(fā)酵時應(yīng)控制溫度為℃,通氣情況為。4.[2021陜西部分學(xué)校摸底,15分]研究發(fā)現(xiàn)土壤中的一種極毛桿菌,能夠以3,4-二甲苯酚為碳源,對土壤殘留農(nóng)藥中的該成分有較好的降解作用。請回答:(1)某興趣小組欲從土壤中篩選出能高效降解3,4-二甲苯酚的極毛桿菌菌株,分離極毛桿菌的土樣應(yīng)來自土壤,在配制篩選極毛桿菌的培養(yǎng)基時對其碳源的選擇應(yīng),在實(shí)驗(yàn)室一般采用法對配制的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。(2)分離純化極毛桿菌時,首先需要用對土壤浸出液進(jìn)行梯度稀釋的理由是,該分離純化方法為。若采用平板劃線法分離土樣中的極毛桿菌,在進(jìn)行第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是。(3)為了統(tǒng)計(jì)土壤浸出液中極毛桿菌的總數(shù),他們選用稀釋倍數(shù)分別為104、105、106的稀釋液進(jìn)行涂布,每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。為了保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,還應(yīng)設(shè)置的一組對照實(shí)驗(yàn)是。5.[2021安徽合肥檢測,15分]研究顯示溶藻細(xì)菌對控制水華有非常重要的作用,研究人員從池塘中采集水樣,加入無菌錐形瓶中,用搖床在37℃下振蕩培養(yǎng)20min,使其均勻分散成菌懸液,再通過分離、純化、鑒定得到了溶藻細(xì)菌。請回答下列問題:(1)分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL,進(jìn)行梯度稀釋。梯度稀釋的目的是。再取每個稀釋度下的菌懸液0.1mL用法接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上,每個梯度做三組實(shí)驗(yàn),在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至長出菌落。(2)若將1mL菌懸液稀釋106倍,再取0.1mL接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上,分別形成了263、278、269個菌落,則每毫升原菌懸液中有細(xì)菌個,用該方法所得結(jié)果一般比實(shí)際值偏低的原因是。(3)水華為藍(lán)藻暴發(fā)所致。研究人員嘗試?yán)萌茉寮?xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量,相關(guān)實(shí)驗(yàn)如圖所示(圖中①~⑥表示實(shí)驗(yàn)步驟)。實(shí)驗(yàn)組做三個重復(fù)實(shí)驗(yàn)。為完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案,應(yīng)增設(shè)對照組,可采取的做法是。6.[2020湖北普通高中聯(lián)考,11分]紅酸湯是一種很有特色的火鍋底料,制作流程如圖所示。請分析回答以下問題:(1)密封發(fā)酵時,常在壇中加入成品紅酸湯,其目的是。乳酸發(fā)酵的過程即乳酸菌進(jìn)行的過程。(2)裝壇時壇口留有一點(diǎn)空間而不裝滿的目的是,紅酸湯制作過程的初期會有氣泡冒出,但氣泡的產(chǎn)生會逐漸停止,試分析原因:。(3)紅酸湯有利于人體腸道內(nèi)多種益生菌的生長。消化道炎癥往往與益生菌群減少、有害菌群增多有關(guān)。研究表明,治療消化道慢性炎癥時,不宜濫用抗生素,濫用抗生素的害處有。7.[2020安徽合肥調(diào)研,14分]某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時,不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在一起,得到混合菌。請你完善分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實(shí)驗(yàn)步驟,并回答有關(guān)問題。(1)主要步驟①制備兩種培養(yǎng)基:一種是培養(yǎng)基,另一種是加青霉素的培養(yǎng)基。分別分成兩份,依次標(biāo)上A、A'和B、B',備用。②分別向A、B培養(yǎng)基中接種。③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種,接種到A'、B'培養(yǎng)基中。⑤接種后,把A'、B'培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。(2)回答問題在步驟①中,為保證無雜菌污染,實(shí)驗(yàn)中應(yīng)采用的主要措施有:對培養(yǎng)基進(jìn)行、將在酒精燈火焰上滅菌、接種過程在附近進(jìn)行。在步驟④中,A培養(yǎng)基上生長良好的菌種是。④⑤兩個步驟的目的是獲得。1.[乳酪制作,社會責(zé)任][15分]如圖表示乳酪(有酸甜味的一種食品)的生產(chǎn)流程,已知牛奶中含有乳糖,乳糖可被水解為葡萄糖和半乳糖。請回答下列有關(guān)問題:新鮮牛奶(Ⅰ)巴斯德消毒法(Ⅱ)溫度恢復(fù)至培養(yǎng)溫度(Ⅲ)發(fā)酵(加入兩種細(xì)菌)(Ⅳ)在37℃下培養(yǎng)包裝和儲存注:巴斯德消毒法是將原料加熱至68~70℃,并保持此溫度30min以后急速冷卻到4~5℃;新鮮牛奶沒有甜味。(1)生產(chǎn)流程中進(jìn)行步驟Ⅱ的目的是,步驟Ⅲ中加入的兩種細(xì)菌中包括用(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基擴(kuò)大化培養(yǎng)后獲得的乳酸菌,在培養(yǎng)過程中必須控制的環(huán)境因素有(至少回答兩個)。(2)在發(fā)酵過程中,新鮮牛奶中的(填具體物質(zhì)名稱)被分解導(dǎo)致乳酪有甜味,乳酸菌進(jìn)而分解產(chǎn)生乳酸,使乳酪有酸味。(3)在生產(chǎn)乳酪的過程中加入新鮮草莓碎片就能制作出草莓乳酪,已知草莓中含有豐富的糖,在(填羅馬數(shù)字)階段后加入草莓碎片最合適,原因是。2.[新情境,社會責(zé)任][11分]約2.5億年前二疊紀(jì)末期,無數(shù)物種由于無法及時適應(yīng)當(dāng)時氣候變化而滅絕。但細(xì)菌X得到快速大量繁殖,細(xì)菌X快速大量繁殖的原因包括:細(xì)菌X能利用海洋沉積層的二氧化碳和氫氣合成并釋放甲烷,顯著改變氣候和海洋化學(xué)成分;火山噴發(fā)導(dǎo)致鎳元素迅速增多,這種至關(guān)重要的營養(yǎng)物質(zhì)幫助微生物(細(xì)菌X)繁殖。鎳污染是由鎳及其化合物所引起的環(huán)境污染,鎳對環(huán)境是一種潛在的危害物。請回答:(1)X細(xì)菌的代謝類型最可能是,該細(xì)菌的遺傳信息主要存在于(填細(xì)胞結(jié)構(gòu))中。(2)鑒于細(xì)菌X在高濃度鎳污染廢水的生物處理中能發(fā)揮很大作用,某同學(xué)欲篩選高效緩解鎳污染的細(xì)菌X,他應(yīng)從采集土樣。(3)篩選細(xì)菌X的培養(yǎng)基從功能上講屬于培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中(填“需要”或“不需要”)添加有機(jī)碳源,(填“需要”或“不需要”)添加含鎳化合物。(4)在純化細(xì)菌X時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有。為了進(jìn)行計(jì)數(shù),該同學(xué)吸取菌液1mL稀釋1000倍,然后吸取稀釋后的菌液0.2mL,接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。一段時間后觀察菌落并計(jì)數(shù),實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次,得到3個培養(yǎng)皿中菌落數(shù)分別為70、80、90,則該菌液的濃度是個細(xì)菌/mL。答案專題二十三傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應(yīng)用1.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量(2)無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)(3)溫度(1分)腌制時間(1分)食鹽用量(1分)(三空順序可顛倒)(4)乳酸菌數(shù)量增多,雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更耐酸2.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)缺氧(1分)酸性(1分)(2)酒表面氧氣濃度較大,醋酸菌會大量繁殖形成菌膜(3分)乙醛(3)12%腐乳成熟時間延長(4)菌落數(shù)相對穩(wěn)定形狀、大小、隆起程度、顏色【解析】(1)在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(2)因?yàn)榫频谋韺友鯕鉂舛容^大,醋酸菌會大量繁殖形成菌膜,所以在變酸的酒的表面可以觀察到一層白色菌膜。當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌可以將糖分解為醋酸;當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰?再將乙醛轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷?3)制作腐乳后期要加入酒和鹵湯,其中酒的含量一般控制在12%左右,加酒可以抑制微生物的生長,同時使腐乳具有獨(dú)特的香味。若酒精含量過高,會使腐乳成熟的時間延長。(4)不同微生物所需培養(yǎng)溫度和時間往往不同,可以每隔24小時統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,為防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目,應(yīng)該選取菌落數(shù)相對穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。在一定的培養(yǎng)條件下,依據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上形成菌落的形狀、大小、顏色等特征可以區(qū)分不同的菌落。3.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)碳源、氮源(2)檢測培養(yǎng)基制備是否合格(或滅菌是否徹底,3分)(3)黑色當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌(3分)(4)3.8×108(3分)(5)菌落的形狀、大小等菌落特征【解析】(1)蛋白胨可為大腸桿菌提供碳源、氮源和維生素。(2)為了檢測培養(yǎng)基制備是否合格(或滅菌是否徹底),在接種大腸桿菌前,需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,觀察是否有菌落生成。(3)大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與培養(yǎng)基中的染料伊紅美藍(lán)反應(yīng),使菌落呈黑色,因此,為了檢測嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌的數(shù)量,將水樣適當(dāng)稀釋后,取樣涂布在題述平板培養(yǎng)基中,應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌,因此可通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)。(4)將1mL水樣稀釋1000倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為(39+38+37)÷3÷0.1×1000×1000=3.8×108。(5)一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征,因此可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。4.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)LB(1分)酵母膏、蛋白胨瓊脂(2)伊紅美藍(lán)黑當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落(答案合理即可)(3)碳源能量【解析】(1)培養(yǎng)大腸桿菌通常使用LB培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基中的酵母膏和蛋白胨可為大腸桿菌提供氮源。用平板計(jì)數(shù)法檢測大腸桿菌數(shù)量時,所用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基,故該LB培養(yǎng)基中還應(yīng)含有瓊脂。(2)在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈黑色,統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目,就可估算出單位體積樣品中大腸桿菌的數(shù)目。但由于兩個或多個大腸桿菌細(xì)胞連在一起時,平板上只能觀察到一個菌落,故用濾膜法得到的統(tǒng)計(jì)值往往要比實(shí)際值低。(3)多管發(fā)酵法是根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測水樣中大腸桿菌的方法。乳糖可為大腸桿菌提供碳源和能量。1.(1)兼性厭氧型(2分)C6H12O6→2C2H5OH+2CO2(3分)(2)得到更多的水分,新陳代謝增強(qiáng)(3分)(3)向壇蓋邊緣的水槽中注滿水(2分)(4)18~25℃(2分)酵母菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酒精對酵母菌細(xì)胞有毒害作用(3分)【解析】(1)酵母菌的呼吸類型為兼性厭氧型。在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵,反應(yīng)式為C6H12O6→2C2H5OH+2CO2。(2)酒曲浸水后會被活化的原因是酒曲中的微生物獲得了更多的水分,新陳代謝增強(qiáng)。(3)可以向壇蓋邊緣的水槽中注滿水,以保證酵母菌發(fā)酵的無氧環(huán)境。(4)酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵的最適溫度為18~25℃。酵母菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酒精對酵母菌細(xì)胞有毒害作用,因此,米酒酒精度數(shù)一般不會很高。2.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)稀釋涂布平板法D(2)需要需要檢測培養(yǎng)基是否被污染(答案合理即可)(3)培養(yǎng)時間不足(答案合理即可)5.6×108(4)低(1分)當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落【解析】(1)分析題干信息可知,對微生物計(jì)數(shù)時,采用的接種方法是稀釋涂布平板法。得到圖D所示結(jié)果的接種方法是平板劃線法,其他三個圖都是利用稀釋涂布平板法接種得到的結(jié)果。(2)對微生物進(jìn)行培養(yǎng)時,需要設(shè)置一個不接種細(xì)菌的空白培養(yǎng)基,可以檢測培養(yǎng)基是否被污染。(3)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時,一般選擇菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,從而可以避免因培養(yǎng)時間不足等而遺漏菌落數(shù)目。三個培養(yǎng)基中大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57,其平均值是56,每升原水樣中的大腸桿菌數(shù)量為56÷0.1×103×103=5.6×108。(4)當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比實(shí)際值低。3.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)梯度稀釋剛果紅(1分)(2)C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)測定纖維素完全分解所需時間(測定單位時間產(chǎn)生葡萄糖的量或?qū)ζ咸烟堑漠a(chǎn)生量進(jìn)行定量測定,答出纖維素分解情況、葡萄糖產(chǎn)生量給1分)(3)酵母18~25先通氣后密封【解析】(1)由于選擇培養(yǎng)之后菌群的密度較大,需要進(jìn)行梯度稀釋之后再將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上,才能形成單個菌落,便于鑒別。剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,因此鑒別培養(yǎng)基中應(yīng)加入剛果紅。(2)纖維素酶至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分,為進(jìn)一步確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)?？梢酝ㄟ^測定纖維素完全分解所需的時間測定纖維素酶活性的大小。(3)酵母菌通過無氧呼吸可將葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇,一般情況下,要先通氣后密封,使酵母菌數(shù)量達(dá)到一定程度后再進(jìn)行酒精發(fā)酵。發(fā)酵溫度應(yīng)控制在18~25℃。4.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)3,4-二甲苯酚含量高的以3,4-二甲苯酚為唯一碳源高壓蒸汽滅菌(2)無菌水(1分)土壤浸出液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落,同時用無菌水可以防止雜菌污染稀釋涂布平板法將聚集的菌種逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)未接種的空白培養(yǎng)基【解析】(1)篩選目的菌時,應(yīng)從富含該菌的土壤中采集土樣,極毛桿菌對土壤殘留農(nóng)藥中的3,4-二甲苯酚有較好的降解作用,因此應(yīng)從該物質(zhì)含量高的土壤取樣。篩選某種微生物的選擇培養(yǎng)基應(yīng)有利于該種微生物生存,而不利于其他微生物生存,極毛桿菌能夠以3,4-二甲苯酚為碳源,因此配制篩選極毛桿菌的培養(yǎng)基時應(yīng)以3,4-二甲苯酚為唯一碳源,實(shí)驗(yàn)室對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。(2)分離純化極毛桿菌時,首先需要用無菌水對土壤浸出液進(jìn)行梯度稀釋,這樣既可避免雜菌污染,又可將極毛桿菌分散開,以便在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。利用系列梯度稀釋的方法對微生物進(jìn)行分離純化屬于稀釋涂布平板法。利用平板劃線法分離該菌時,在進(jìn)行第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣可以將聚集的菌種逐步稀釋以便得到單個菌落。(3)通過稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)該菌時,需要設(shè)置一組空白對照組,即未接種的空白培養(yǎng)基。5.(每空3分)(1)使水樣中的各種微生物分散成單個細(xì)胞(稀釋)涂布平板(2)2.7×109當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落(3)在對照組的每個培養(yǎng)皿中,各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)液【解析】(1)梯度稀釋的目的是使水樣中的各種微生物分散成單個細(xì)胞,以便在固體培養(yǎng)基表面形成單個菌落。對微生物進(jìn)行分離并計(jì)數(shù)通常采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)每毫升原菌懸液中有細(xì)菌(263+278+269)÷3×106÷0.1=2.7×109(個),由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,故用稀釋涂布平板法所得的結(jié)果一般比實(shí)際值偏低。(3)為了排除培養(yǎng)液對藍(lán)藻的影響,應(yīng)該在對照組每個培養(yǎng)皿中各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)液。6.(除標(biāo)明外,每空2分)(1)增加乳酸菌含量無氧呼吸(2)防止西紅柿發(fā)酵后發(fā)酵液外溢剛?cè)雺瘍?nèi),西紅柿表面的雜菌(酵母菌等)呼吸產(chǎn)生CO2,隨著乳酸積累抑制了雜菌的生長,乳酸菌產(chǎn)生乳酸的過程不產(chǎn)生CO2(合理即可,3分)(3)濫用抗生素會殺死腸道內(nèi)多種益生菌、抗生素對有害菌產(chǎn)生選擇作用(合理即可)【解析】(1)成品紅酸湯中乳酸菌的含量比較高,在壇中加入成品紅酸湯的目的是增加乳酸菌的含量,從而縮短發(fā)酵時間。乳酸發(fā)酵是乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸的過程。(2)在發(fā)酵過程中,由于細(xì)胞呼吸會產(chǎn)生熱量,同時壇中存在某些發(fā)酵過程中能產(chǎn)生CO2的雜菌,上述兩種情況都可能導(dǎo)致發(fā)酵液外溢,所以裝壇時需在壇口留一點(diǎn)空間。裝壇發(fā)酵的初期,西