1、中藥現(xiàn)代化新技術(shù)及應(yīng)用研究負(fù) 責(zé) 人：王升啟 高月 王小紅負(fù)責(zé)單位：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所參加單位：第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院一、研究內(nèi)容、技術(shù)路線、最終目標(biāo)、成果表達(dá)形式 及技戰(zhàn)術(shù)指標(biāo)二、專題/分題設(shè)置、協(xié)作攻關(guān)的組織及任務(wù)落實(shí)情況三、2001年度主要研究進(jìn)展及今后工作計(jì)劃四、對加強(qiáng)重大課題管理工作的意見和建議一、研究內(nèi)容、技術(shù)路線、最終目標(biāo)、 成果表達(dá)形式及技戰(zhàn)術(shù)指標(biāo)1. 研究內(nèi)容1)基因芯片和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在中藥復(fù)方作用機(jī)理 研究中的應(yīng)用；2)“ 多維色譜差異顯示”技術(shù)的建立及在中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用；3)“ 超高通量篩選”技術(shù)的建立及在中藥篩選中的應(yīng)用；4)乙肝病毒感染相關(guān)基因?yàn)?/p>

2、靶的抗乙肝病毒中藥篩選。2. 技術(shù)路線2)“ 多維色譜差異顯示”技術(shù)的建立及在中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用3)“ 超高通量篩選”技術(shù)的建立及在中藥篩選中的應(yīng)用3.最終目標(biāo)第一階段（2001.01-2003.12）利用基因芯片、蛋白質(zhì)組學(xué)及多維色譜差異顯示技術(shù)建立中藥現(xiàn)代化研究的技術(shù)平臺(tái)。闡明補(bǔ)血中藥復(fù)方四物湯的作用靶分子及有效成分；發(fā)現(xiàn)23個(gè)與HBV感染靶細(xì)胞有關(guān)的抗HBV中藥靶分子并篩選出一些有效中藥或其組分；篩選出35種能夠調(diào)控細(xì)胞因子表達(dá)的中藥或其成分。第二階段(2003.01-2005.12)完成中藥四物湯作用靶分子的功能分析并提出其主要機(jī)理和有效成分；發(fā)現(xiàn)2-3個(gè)抗HBV、促進(jìn)造血及

3、細(xì)胞因子表達(dá)調(diào)控中藥先導(dǎo)成分及其組合并完成其實(shí)驗(yàn)室研究。4.成果表達(dá)形式及技戰(zhàn)術(shù)指標(biāo)實(shí)物：藥物篩選芯片2種；發(fā)現(xiàn)具有促進(jìn)造血、抗乙肝病毒及對某類細(xì)胞因子有表達(dá)調(diào)控作用的中藥成分或其組合2-3種。專利：34項(xiàng)論文：1015篇；其中國外發(fā)表23篇成果：國家或軍隊(duì)二等以上科研成果1項(xiàng)專題1：基因芯片和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在中藥作用機(jī)理研究中的應(yīng)用高 月 副研究員：負(fù)責(zé)組織實(shí)施及藥理評價(jià)陳蘇紅 碩 士：中藥基因組學(xué)研究馬增春 博士生：中藥蛋白組學(xué)研究管偉、孫偶軍 實(shí)驗(yàn)員：實(shí)驗(yàn)技術(shù)專題2：“ 多維色譜差異顯示技術(shù)”的建立及在中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用馬百平 副研究員：負(fù)責(zé)組織實(shí)施及成分分離梁乾德 博士生：質(zhì)譜指

4、紋譜的建立及成分鑒定楊秉呼 博士生：“ 多維色譜差異顯示技術(shù)”的建立 專題4：乙肝病毒感染相關(guān)基因?yàn)榘械目挂腋尾《局兴幍暮Y選王小紅 副研究員、陳忠斌博士：負(fù)責(zé)組織實(shí)施及基因 結(jié)構(gòu)和功能研究石 崗 博士：HBV感染差減文庫構(gòu)建及抗HBV篩選芯片 的制備并進(jìn)行篩選；楊 靜 碩士生：抗HBV中藥的篩選。三、2001年度主要研究進(jìn)展及今后工作計(jì)劃專題1：基因芯片和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在中藥作用機(jī)理研究中的應(yīng)用1)制備了四物湯作用前后小鼠骨髓差異表達(dá)cDNA文庫和基因芯片，發(fā)現(xiàn)了幾種差異表達(dá)基因。 2)制備了小鼠造血相關(guān)基因寡核苷酸芯片，初步檢測了血虛小鼠四物湯及其各部分提取物治療前后基因表達(dá)的差異3)初步熟

5、悉了蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，訂購了一套價(jià)值100余萬元用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究的儀器專題2：“ 多維色譜差異顯示技術(shù)”的建立及在中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用1) 初步建成了四物湯HPTLC指紋圖譜方法學(xué)，并獲得了四物 湯及其提取物的HPTLC指紋圖譜2)初步建立了四物湯質(zhì)譜指紋圖譜的方法3)訂購了自動(dòng)點(diǎn)樣儀器、HPTLC掃描和成像儀及配套分析軟件 專題3：“ 超高通量篩選”技術(shù)的建立及在中藥篩選中的應(yīng)用1) 建立了人細(xì)胞因子基因探針庫， 制成了細(xì)胞因子基因芯片2)利用上述芯片對四物湯誘導(dǎo)后的T淋巴細(xì)胞和PBMC的細(xì)胞因 子基因表達(dá)變化作了初步檢測。3)此外，正在設(shè)計(jì)、制備人細(xì)胞因子寡核苷酸基因芯片。專題4：病

6、毒感染相關(guān)基因?yàn)榘械目共《局兴幒Y選1)收集了一些病人肝組織和血清標(biāo)本2)構(gòu)建了差異表達(dá)cDNA文庫專題2：“ 多維色譜差異顯示技術(shù)”的建立及在中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用四物湯不同成分多維色譜分離及差異分析四物湯活性成分結(jié)構(gòu)分析專題3：“ 超高通量篩選”技術(shù)的建立及在中藥篩選中的應(yīng)用制備含100200個(gè)基因探針的寡核苷酸芯片，確定中藥作用靶基因?qū)τ绊懠?xì)胞因子基因表達(dá)中藥進(jìn)行多靶位篩選四、對加強(qiáng)重大課題管理工作的意見和建議 加大科研項(xiàng)目的監(jiān)管力度，實(shí)行滾動(dòng)資助的制度。隨著形勢的發(fā)展和科學(xué)的進(jìn)步，要注意吸收進(jìn)來新的好項(xiàng)目；完成不好或者已無先進(jìn)性的項(xiàng)目要淘汰；進(jìn)展好的項(xiàng)目要增加資助強(qiáng)度。感 謝各 位 專

7、 家(1) 現(xiàn)狀中藥有其臨床基礎(chǔ)中藥有其作用的物質(zhì)基礎(chǔ)中藥有其作用的靶標(biāo)中藥有其巨大的市場中藥研究已引起國內(nèi)、外 廣泛關(guān)注一、研究的必要性及目的意義(2) 問題西藥化的研究策略相對落后的技術(shù)手段學(xué)科交叉和融合不夠重開發(fā)不重基礎(chǔ)中藥貿(mào)易出現(xiàn)赤字1. 必要性2. 目的意義目 的 1. 探索中藥現(xiàn)代化研究新方法和新思路：利用基因芯片、蛋白質(zhì)組學(xué)、抑制差減cDNA文庫構(gòu)建等現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)、現(xiàn)代色譜和化學(xué)分析技術(shù)，建立一系列中藥物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理研究的新技術(shù)平臺(tái)，為中藥現(xiàn)代化研究探索一條切實(shí)可行的新思路。3. 尋找新藥先導(dǎo)組分：利用該技術(shù)平臺(tái)對細(xì)胞因子調(diào)控、抗肝炎病毒及促進(jìn)造血中藥和復(fù)方作用機(jī)理及物

8、質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)輻射防護(hù)、促進(jìn)造血、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等先導(dǎo)組分意 義 該課題不僅對中藥及復(fù)方基礎(chǔ)理論的研究如藥性理論、配伍理論等具有非常重要的理論意義，而且對于創(chuàng)新中藥的研究和開發(fā)具有重要的應(yīng)用價(jià)值。 選擇補(bǔ)血中藥為實(shí)例進(jìn)行研究，對于重建放療及化療引起的造血系統(tǒng)損傷藥物的研究和開發(fā)不僅具有重要的民用價(jià)值而且對放射病的治療具有重要的軍用價(jià)值。 選擇抗病毒中藥為實(shí)例進(jìn)行研究，不僅對病毒感染性疾病的治療具有重要的民用價(jià)值，而且為生物戰(zhàn)劑防治創(chuàng)新藥物的研究和開發(fā)提供了一個(gè)新思路。細(xì)胞因子調(diào)控中藥的篩選對于腫瘤、病毒、炎證及放射病等疾病治療新藥的研究和開發(fā)具有主要的軍用和民用價(jià)值。五、創(chuàng)新點(diǎn)采用基因芯片及蛋白質(zhì)組學(xué)等技術(shù)研究中藥作用機(jī)理為中藥現(xiàn)代化，特別是中藥基礎(chǔ)理論研究現(xiàn)代化研究提供了一個(gè)全新的思路。選擇常用補(bǔ)血中藥復(fù)方四物湯為例，應(yīng)用多維色譜差異顯示技術(shù)研究中藥補(bǔ)血的作用靶分子及物質(zhì)基礎(chǔ)也屬開拓性研究。細(xì)胞因子芯片的制備及在中藥超高通量篩選中的應(yīng)用也未見報(bào)導(dǎo)?？笻BV作用靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)及以HBV感染特異相關(guān)基因?yàn)榘械目共《舅幬镅芯渴遣《拘约膊〉闹委煹男滤悸贰?1.良好的工作基礎(chǔ) 在國家“ 863”、國家“ 973”、國家自然科學(xué)基金、軍隊(duì)“ 8.5”、“ 9.5”等重點(diǎn)項(xiàng)目、軍隊(duì)杰出人才基金及軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院創(chuàng)新基金等項(xiàng)目的資助下，本實(shí)驗(yàn)室通過2