1、Plant tissue culture 2019年春學期阜陽師范學院生物與食品工程學院QQ群 110953973第二章第二章植物組織培養(yǎng)實驗室的設計與植物組織培養(yǎng)實驗室的設計與設備設備 植物組織培養(yǎng)實驗室的設計植物組織培養(yǎng)實驗室的設計 植物組織培養(yǎng)實驗室的設備植物組織培養(yǎng)實驗室的設備新建組培室地址的選擇：新建組培室地址的選擇：1 1、首先要保證水電供應；、首先要保證水電供應；2 2、為節(jié)省能源，充分利用自然光，實驗室應向南建設，使、為節(jié)省能源，充分利用自然光，實驗室應向南建設，使采光面積和時數(shù)達到最大；采光面積和時數(shù)達到最大；3 3、對于商業(yè)性實驗室，交通條件是否便利是一個應該考慮、對于商業(yè)

2、性實驗室，交通條件是否便利是一個應該考慮因素。因素。 4 4、組培室最好避免建立在繁忙的交通線的附近；、組培室最好避免建立在繁忙的交通線的附近；5 5、避免與溫室、微生物實驗室、昆蟲實驗室、種子或其他、避免與溫室、微生物實驗室、昆蟲實驗室、種子或其他植物材料儲藏室相鄰，以免由于空氣流通造成難以克服植物材料儲藏室相鄰，以免由于空氣流通造成難以克服的污染。的污染。 l植物組織培養(yǎng)實驗室設計應遵守的原則：植物組織培養(yǎng)實驗室設計應遵守的原則：l 保證絕對清潔保證絕對清潔 l植物組織培養(yǎng)一般需要光照和控溫，為節(jié)省能源，應充分植物組織培養(yǎng)一般需要光照和控溫，為節(jié)省能源，應充分利用自然光，同時房間設計要便于

3、控溫。利用自然光，同時房間設計要便于控溫。l實驗室的設計按自然工作程序的先后安排成一條連續(xù)的生實驗室的設計按自然工作程序的先后安排成一條連續(xù)的生產(chǎn)線，避免環(huán)節(jié)倒排。產(chǎn)線，避免環(huán)節(jié)倒排。l實驗室設置防止昆蟲、鳥類、鼠類等動物進入的設施。實驗室設置防止昆蟲、鳥類、鼠類等動物進入的設施。 l實驗室內(nèi)的地面、墻壁和頂棚等，要采用最小的產(chǎn)生灰塵實驗室內(nèi)的地面、墻壁和頂棚等，要采用最小的產(chǎn)生灰塵建筑材料。建筑材料。 l實驗室內(nèi)安裝的洗手池、下水道的位置要適宜，不得對培實驗室內(nèi)安裝的洗手池、下水道的位置要適宜，不得對培養(yǎng)帶來污染。養(yǎng)帶來污染。 l實驗室應有消防火栓、報警裝置等安全設施。實驗室應有消防火栓、報

4、警裝置等安全設施。2、標準組織培養(yǎng)室組成、標準組織培養(yǎng)室組成準準 備備 室室洗滌室洗滌室接種室接種室培養(yǎng)室培養(yǎng)室滅菌室滅菌室組培實驗室組培實驗室馴化室馴化室 分體式分體式- -研究性質實驗室，分開的若干房間將研究性質實驗室，分開的若干房間將準備室分解為藥品貯藏室、培養(yǎng)基配制與洗滌室準備室分解為藥品貯藏室、培養(yǎng)基配制與洗滌室和滅菌室等，功能明確，便于管理，但不適于大和滅菌室等，功能明確，便于管理，但不適于大規(guī)模生產(chǎn)。規(guī)模生產(chǎn)。 通間式通間式- -規(guī)?；瘜嶒炇遥话阍O計成大的通間規(guī)?；瘜嶒炇遥话阍O計成大的通間，試驗操作的各個環(huán)節(jié)在同一房間內(nèi)按程序完成，試驗操作的各個環(huán)節(jié)在同一房間內(nèi)按程序完成。便

5、于程序化操作與管理，減少各環(huán)節(jié)間的銜接。便于程序化操作與管理，減少各環(huán)節(jié)間的銜接時間，提高工作效率。還便于培養(yǎng)基配制、分裝時間，提高工作效率。還便于培養(yǎng)基配制、分裝和滅菌的自動化操作程序設計，減少規(guī)模化生產(chǎn)和滅菌的自動化操作程序設計，減少規(guī)模化生產(chǎn)的人工勞動，更便于無菌條件的控制和標準化操的人工勞動，更便于無菌條件的控制和標準化操作體系的建立。作體系的建立。培養(yǎng)室培養(yǎng)室 培養(yǎng)室培養(yǎng)室 培養(yǎng)室培養(yǎng)室 門門 廳廳 走廊走廊接種室接種室 滅菌室滅菌室 洗滌室洗滌室準備室準備室案例案例1 1：實驗室平面設計：實驗室平面設計準備室準備室滅菌室滅菌室洗滌室洗滌室 馴化室馴化室走廊走廊 觀察室觀察室培養(yǎng)室培

6、養(yǎng)室接種室接種室培養(yǎng)室培養(yǎng)室案例案例2 2：實驗室構成：實驗室構成1 1、準備室、準備室 功能：又叫化學實驗室，進行一切與實驗有關的功能：又叫化學實驗室，進行一切與實驗有關的準備工作：器皿洗滌、完成所使用的各種藥品的貯備、準備工作：器皿洗滌、完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養(yǎng)材料的預處理等。稱量、溶解、配制、培養(yǎng)材料的預處理等。 要求：最好有要求：最好有2020平方米左右。要求寬敞明亮、以平方米左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關設備，方便多人同時工作；便于放置多個實驗臺和相關設備，方便多人同時工作；同時要求通風條件好，便于氣體交換；實驗室地面應同時要求通風條件好，便

7、于氣體交換；實驗室地面應便于清潔，并應進行防滑處理。便于清潔，并應進行防滑處理。 設備：準備室應具備工作臺、天平，柜櫥、水池、設備：準備室應具備工作臺、天平，柜櫥、水池、儀器、蒸餾水器，磁力攪拌器，冰箱等。儀器、蒸餾水器，磁力攪拌器，冰箱等。 藥品柜藥品柜冰箱冰箱天平天平磁力攪拌器磁力攪拌器恒溫水浴鍋恒溫水浴鍋l功能：完成各種器具的洗滌、枯功能：完成各種器具的洗滌、枯燥、保管、材料預處理，同時兼燥、保管、材料預處理，同時兼顧試管苗出瓶等。顧試管苗出瓶等。l要求：需安裝一個較大的水池，要求：需安裝一個較大的水池，水泥制作，白瓷磚砌內(nèi)外表面，水泥制作，白瓷磚砌內(nèi)外表面，池底放一張橡膠墊，以減少玻璃

8、池底放一張橡膠墊，以減少玻璃器皿的破損。下水道應暢通，以器皿的破損。下水道應暢通，以免妨礙工作。免妨礙工作。l設備：玻璃器皿、塑料器皿、周設備：玻璃器皿、塑料器皿、周轉箱、洗滌刷、洗瓶機、洗滌劑轉箱、洗滌刷、洗瓶機、洗滌劑、晾干臺等。、晾干臺等。 功能：培養(yǎng)基配制、分裝、功能：培養(yǎng)基配制、分裝、 高壓滅菌，無菌高壓滅菌，無菌水的制備以及其它物品的高壓滅菌等。水的制備以及其它物品的高壓滅菌等。 要求：要求：20 平方米左右，亮堂，通風。配置大平方米左右，亮堂，通風。配置大型工作臺型工作臺1張。張。 設備：高壓滅菌器、電爐、不銹鋼鍋、培養(yǎng)設備：高壓滅菌器、電爐、不銹鋼鍋、培養(yǎng)基分注器、物品櫥基分注

9、器、物品櫥1-3個，用以放置線繩、封個，用以放置線繩、封口材料等。此外還應有烘箱、天平、酸度計、口材料等。此外還應有烘箱、天平、酸度計、盆與桶等。盆與桶等。 3、培養(yǎng)基制作與滅菌室區(qū)）、培養(yǎng)基制作與滅菌室區(qū)） 功能：主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉移、試管苗的繼代以及一切需要進行無菌操作的技術程序。 要求：接種室要求干爽安靜，清潔明亮。接種室宜小不宜大，一般1020平米，要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑，易于清潔和消毒，地面及內(nèi)墻壁都應采用防水和耐腐蝕材料，室內(nèi)物品越少越好。配置拉動門，以減少開關門時的空氣擾動；室外設有緩沖間。 主要設備：紫外光源、超凈工作臺、消毒器、酒精燈、接種

10、器械接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針）、紫外線滅菌燈、空調(diào)等。 4、無菌操作室接種室）、無菌操作室接種室）緩沖間緩沖間 功能：是進入無菌室前的一個緩沖場地，減少人體功能：是進入無菌室前的一個緩沖場地，減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能進入無菌室和培養(yǎng)室。服、拖鞋，戴上口罩，才能進入無菌室和培養(yǎng)室。 要求：可建在準備室外需要求：可建在準備室外需3-53-5平方米或無菌操平方米或無菌操作室外面積作室外面積1 1平方米為宜），應保持清潔無菌；備有平方米為宜），應保持清潔無菌；備有鞋架和衣帽掛鉤，并有清潔的實驗用拖

11、鞋、已滅菌過鞋架和衣帽掛鉤，并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服；墻頂用的工作服；墻頂用1-21-2盞紫外燈定時照射，對衣物進行盞紫外燈定時照射，對衣物進行滅菌。滅菌。 設備：設備：1-21-2盞紫外燈、滅菌后的工作服、拖鞋、口盞紫外燈、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。罩。5 5、培養(yǎng)室區(qū)）、培養(yǎng)室區(qū)） 功能：對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進行功能：對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養(yǎng)，無論是研究性實驗室還是生產(chǎn)性實控制條件下的培養(yǎng)，無論是研究性實驗室還是生產(chǎn)性實驗材料進行培養(yǎng)的場所。驗材料進行培養(yǎng)的場所。 要求：約需要求：約需10-2010-20平方米左右?；疽笫?/p>

12、能夠控制平方米左右。基本要求是能夠控制光照和溫度，并保持相對的無菌環(huán)境，因此，培養(yǎng)室應光照和溫度，并保持相對的無菌環(huán)境，因此，培養(yǎng)室應保持清潔和適度干燥；為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體保持清潔和適度干燥；為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體的需要，還應安裝排風窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置的需要，還應安裝排風窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置；為節(jié)省能源和空間，應配置適宜的培養(yǎng)架，并安裝日；為節(jié)省能源和空間，應配置適宜的培養(yǎng)架，并安裝日光燈照明。光燈照明。 設備：培養(yǎng)架控溫控光控濕）、溫濕度計、搖床、設備：培養(yǎng)架控溫控光控濕）、溫濕度計、搖床、培養(yǎng)箱、光源、除濕機、換氣扇、紫外光源等。培養(yǎng)箱、光源、除濕機、換氣

13、扇、紫外光源等。 6.6.觀察室觀察室 設備：生物顯微鏡，切片機，酶聯(lián)免疫檢測儀，設備：生物顯微鏡，切片機，酶聯(lián)免疫檢測儀，PCRPCR擴增儀等。擴增儀等。功能：觀察并研究培養(yǎng)材料的生長分化情況及其形功能：觀察并研究培養(yǎng)材料的生長分化情況及其形態(tài)發(fā)生規(guī)律；檢查培養(yǎng)材料是否脫毒和發(fā)生變異。態(tài)發(fā)生規(guī)律；檢查培養(yǎng)材料是否脫毒和發(fā)生變異。要求：室內(nèi)清潔、亮堂、安靜，設備先進。要求：室內(nèi)清潔、亮堂、安靜，設備先進。 要求：能夠控溫調(diào)濕、控光通風。要求：能夠控溫調(diào)濕、控光通風。 面積：據(jù)規(guī)模來定。面積：據(jù)規(guī)模來定。 功能：提供組培苗煉苗的環(huán)境。功能：提供組培苗煉苗的環(huán)境。l、烘箱、烘箱l陳列于洗滌室陳列于

14、洗滌室l作用：干燥洗后的器皿作用：干燥洗后的器皿l高溫干熱滅菌高溫干熱滅菌l測定培養(yǎng)物的干重測定培養(yǎng)物的干重l氣浴氣浴l各種維生素和激素類藥品以及培養(yǎng)基母各種維生素和激素類藥品以及培養(yǎng)基母液均需低溫保存，某些試驗還需植物材液均需低溫保存，某些試驗還需植物材料進行低溫處理，普通冰箱即可。料進行低溫處理，普通冰箱即可。l陳列于準備室中陳列于準備室中3 3、加熱器、加熱器 用于培養(yǎng)基的配制。研究性實驗室一般選用帶磁用于培養(yǎng)基的配制。研究性實驗室一般選用帶磁力攪拌功能的加熱器，規(guī)?；笮蛯嶒炇矣么蠊β始恿嚢韫δ艿募訜崞?，規(guī)模化大型實驗室用大功率加熱和電動攪拌系統(tǒng)。熱和電動攪拌系統(tǒng)。4 4、其它、其它

15、 純水器、分裝設備純水器、分裝設備 l其操作臺面是半開放區(qū)，具其操作臺面是半開放區(qū)，具方便、操作舒適優(yōu)點，通過方便、操作舒適優(yōu)點，通過過濾的空氣連續(xù)不斷吹出，過濾的空氣連續(xù)不斷吹出，大于大于0.03um直徑的微生物很直徑的微生物很難在工作臺的操作空間停留難在工作臺的操作空間停留，保持了較好的無菌環(huán)境。，保持了較好的無菌環(huán)境。由于過濾器吸附微生物，使由于過濾器吸附微生物，使用一段時間后過濾網(wǎng)易堵塞用一段時間后過濾網(wǎng)易堵塞，因此應定期更換。，因此應定期更換。l陳列于接種室中陳列于接種室中l(wèi)類型：垂直式和水平式類型：垂直式和水平式l作用：無菌操作用作用：無菌操作用 用于測定培養(yǎng)基及其它溶液的用于測定

16、培養(yǎng)基及其它溶液的pH，一般要求，一般要求可測定可測定pH范圍范圍1-14之間，精度之間，精度0.01即可。即可。陳列于滅菌室中陳列于滅菌室中PHS-802中文臺式酸度計中文臺式酸度計通用型或經(jīng)濟型酸度計通用型或經(jīng)濟型酸度計l陳列于觀察室中陳列于觀察室中l(wèi)類型：類型：l 倒置顯微鏡倒置顯微鏡 原生質體觀察原生質體觀察l 普通顯微鏡普通顯微鏡 染色體和葉片氣孔觀察染色體和葉片氣孔觀察l 熒光顯微鏡熒光顯微鏡 細胞活力觀察細胞活力觀察l 解剖顯微鏡解剖顯微鏡 立體觀察立體觀察l植物組織培養(yǎng)實驗室需要不同精度的天平。植物組織培養(yǎng)實驗室需要不同精度的天平。l 感量感量0.001g的天平分析天平和感量的

17、天平分析天平和感量0.0001g的天平電子天平用于稱量微量元素和一些的天平電子天平用于稱量微量元素和一些較高精確度的實驗用品。較高精確度的實驗用品。l感量感量0.01g和和0.1g的天平，用于大量元素母液配的天平，用于大量元素母液配制和一些用量較大的藥品的稱量。制和一些用量較大的藥品的稱量。 l陳列于滅菌室中陳列于滅菌室中9 9、高壓滅菌鍋、高壓滅菌鍋 用于培養(yǎng)基、玻璃器皿以及其它可高用于培養(yǎng)基、玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌，根據(jù)規(guī)模大小有手溫滅菌用品的滅菌，根據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不同規(guī)格。提式、立式、臥式等不同規(guī)格。10、干熱消毒柜、干熱消毒柜 用于金屬工具如鑷子、剪刀、

18、用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器皿的滅菌。一解剖刀，以及玻璃器皿的滅菌。一般選用般選用200左右的普通或遠紅外左右的普通或遠紅外消毒柜。消毒柜。1212、紫外燈、紫外燈 方便經(jīng)濟的控制無菌環(huán)境的裝置，緩沖間、接種方便經(jīng)濟的控制無菌環(huán)境的裝置，緩沖間、接種室和培養(yǎng)室必備。室和培養(yǎng)室必備。 11、過濾滅菌器、過濾滅菌器 用于一些酶制劑、激素以及某些維生素等不能用于一些酶制劑、激素以及某些維生素等不能高壓滅菌試劑的滅菌，主要有真空抽濾式和注射器高壓滅菌試劑的滅菌，主要有真空抽濾式和注射器式。式。1313、培養(yǎng)架、培養(yǎng)架 目前植物植物組織培養(yǎng)實驗室植株繁殖培養(yǎng)的通目前植物植物組織培養(yǎng)實驗室植株繁殖培養(yǎng)的通用設施。成本低、設計靈活、充分利用培養(yǎng)空間。一用設施。成本低、設計靈活、充分利用培養(yǎng)空間。一般有般有4-54-5層，層間間隔層，層間間隔30-40cm30-40cm，長，長1.01.01.31.3米，寬米，寬0.60.6米，光照強度可根據(jù)培養(yǎng)植物特性來確定，