第六章典型藥物分析導(dǎo)學(xué)情景情景描述:小王協(xié)助檢查鹽酸普魯卡因得質(zhì)量。老師要求她查閱該藥物得藥典相關(guān)內(nèi)容,她清楚了如何分析鹽酸普魯卡因得質(zhì)量。學(xué)前導(dǎo)語:分析依據(jù)就是藥典。通過本章學(xué)習(xí),同學(xué)們學(xué)會(huì)如何進(jìn)行檢驗(yàn)藥物得結(jié)構(gòu)性質(zhì)等基礎(chǔ)知識(shí)。第一節(jié)水楊酸類藥物得分析一、典型藥物得結(jié)構(gòu)與性質(zhì)藥典2015年版收載得水楊酸類藥物有消毒防腐藥水楊酸;解熱鎮(zhèn)痛非甾體抗炎藥阿司匹林;抗結(jié)核藥對氨基水楊酸鈉。阿司匹林酯鍵水解性羧基酸性貝諾酯1、酯鍵水解性2、酰胺鍵水解后重氮化偶合反應(yīng)3、苯環(huán)紫外特征吸收對氨基水楊酸鈉1、芳香第一胺重氮化偶合反應(yīng)2、酚羥基三氯化鐵反應(yīng)3、鈉鹽得鑒別反應(yīng)二、阿司匹林制劑得分析(一)性狀

1、外觀與臭味白色結(jié)晶粉末,酸味2、溶解度水中微融,在氫氧化鈉中溶解,分解。(二)鑒別1、三氯化鐵反應(yīng)加三氯化鐵,顯示紫色阿司匹林,貝諾酯分子中無酚羥基,與三氯化鐵試液不發(fā)生顯色反應(yīng)。但加熱,加堿,產(chǎn)生酚羥基,發(fā)生反應(yīng)。2、水解反應(yīng)阿司匹林有酯鍵,發(fā)生水解反應(yīng)。3、紅外分光光度法4、高效液相色譜法(三)雜質(zhì)檢查1、溶液得澄清度反應(yīng)得過程中出現(xiàn)各種雜質(zhì),雜質(zhì)得特點(diǎn)就是不含羧基,利用藥物與雜質(zhì)在碳酸鈉中溶解度得差異,來檢查雜質(zhì)。2、游離水楊酸生產(chǎn)過程中乙?；煌耆犬a(chǎn)生水楊酸,藥典2015年版采用高效液相色譜法檢查游離水楊酸。3、有關(guān)物質(zhì)(四)含量測定1、(阿司匹林)得含量測定(1)原理:阿司匹林羧基與氫氧化鈉發(fā)生中與反應(yīng)(2)方法:直接酸堿滴定法,阿司匹林加中性乙醇,加酚酞,用氫氧化鈉滴定。(3)注意:阿司匹林用中性乙醇溶解,選用酚酞作為指示劑,中性乙醇得配制。2、阿司匹林制劑得含量測定采用高效液相色譜法一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第二節(jié)芳胺類藥物得分析(一)對氨基苯甲酸酯類藥物

鹽酸普魯卡因鹽酸丁卡因

苯佐卡因

③芳伯氨基:重氮化－偶合反應(yīng)②叔胺氮原子：弱堿性④酯鍵一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)(二)芳酰胺類藥物

對乙酰氨基酚(撲熱息痛)醋氨苯砜鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因⑤叔胺②酚羥基③酰胺基××二、鹽酸普魯卡因及其制劑得分析(一)性狀1、外觀與臭味2、溶解度水中易溶解(二)鑒別1、芳香第一胺反應(yīng)又名重氮化偶合反應(yīng),鹽酸普魯卡因,加鹽酸,加亞硝酸鈉生成重氮鹽,再加堿性β萘酚,出現(xiàn)顏色。2、水解反應(yīng)加氫氧化鈉,出現(xiàn)沉淀;加熱變成油狀物,出現(xiàn)得蒸汽使?jié)駶櫟眉t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色;待油狀物消失后,放冷,加鹽酸,出現(xiàn)白色沉淀。大家有疑問的，可以詢問和交流可以互相討論下，但要小聲點(diǎn)3、紅外分光光度法4、氯化物反應(yīng)5、高效液相色譜法注射液采用此法進(jìn)行鑒別。(三)雜質(zhì)檢查1、雜質(zhì)來源酯鍵水解產(chǎn)生。最后可能出現(xiàn)苯胺,苯胺被氧化為有色物質(zhì),變黃,療效下降,毒性增加。2、檢查方法藥典2015年版規(guī)定,采用高效液相色譜法檢查鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸。四、含量測定

亞硝酸鈉滴定法適用范圍:具有芳香第一胺或水解后具有芳香第一胺得藥物

原理:亞硝酸鈉滴定法

2、測定條件:1)反應(yīng)速度:加入適量溴化鉀加快反應(yīng);

2)溫度:溫度升高,反應(yīng)加快溫度太高:亞硝酸逸失分解,重氮鹽分解室溫10℃～30℃;2、測定條件:3)酸度:作用:參與反應(yīng),加速反應(yīng),重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定,抑制偶氮化合物得形成過量:妨礙芳香第一胺得游離,亞硝酸分解比例:1:2、5~6;2、測定條件:4)滴定速度:先快后慢避免亞硝酸得揮發(fā)與分解,滴定管尖端插入液面下2/3滴定一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌下迅速加入近終點(diǎn),滴定管尖端提出液面,用水沖洗每滴入1滴,攪拌1-5分鐘3、指示終點(diǎn)得方法電位法、永停滴定法、外指示劑法、內(nèi)指示劑法永停滴定法鹽酸普魯卡因得含量測定鹽酸普魯卡因含量=VTF×10-3/m×100%V:滴定液消耗得體積T:每毫升滴定液相當(dāng)于待測物得質(zhì)量F:矯正因子,溶液得真實(shí)濃度/溶液得理論濃度三、對乙酰氨基酚及其制劑得分析(一)性狀1、外觀與臭味白色結(jié)晶粉末,無臭味2、溶解度熱水中易溶解,水中略溶解(二)鑒別1、三氯化鐵反應(yīng)對乙酰氨基酚有酚羥基,發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)。2、水解產(chǎn)物出現(xiàn)芳香第一胺反應(yīng)對乙酰氨基酚水解出現(xiàn)對氨基酚,因此與亞硝酸鈉,堿性β萘酚發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。3、紅外分光光度法進(jìn)行鑒別4、高效液相色譜法對乙酰氨基酚注射液、泡騰片等。5、紫外-可見分光光度法(三)雜質(zhì)檢查1、乙醇溶液得澄清度與顏色2、對氨基酚及有關(guān)物質(zhì)(1)雜質(zhì)來源:對乙酰氨基酚中間產(chǎn)物,有毒變色,有害人體。(2)檢查方法:高效液相色譜法3、對氯苯乙酰胺高效液相色譜法檢查雜質(zhì)(四)含量測定1、對乙酰氨基酚得含量測定(1)原理利用紫外吸收-分光光度法(2)方法(3)計(jì)算A/E/100VD/m2、對乙酰氨基酚制劑得含量測定均采用高效液相色譜法第三節(jié)巴比妥類藥物分析一、典型藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)R1R2苯巴比妥:二酰亞胺基團(tuán)弱酸性酰亞胺水解性丙二酰脲與重金屬離子反應(yīng)苯環(huán)與苯環(huán)作用司可巴比妥雙鍵還原性,被氧化硫噴妥鈉硫元素與醋酸鉛試液反應(yīng)補(bǔ)充知識(shí):1、PH=2得酸性溶液不含硫得巴比妥藥物無明顯紫外吸收,而含硫得有。2、PH=10硫噴妥鈉有大峰與小峰。巴比妥藥物最大吸收峰一般在240波長處3、PH=13硫噴妥鈉只有304大峰。巴比妥藥物最大峰變?yōu)?55nm處。(二)鑒別1、丙二酰脲類得鑒別反應(yīng)(1)銀鹽反應(yīng)苯巴比妥在碳酸鈉溶液中,加硝酸銀,一銀鹽,可以溶解,再過量加硝酸銀,最后不溶解。(2)銅鹽反應(yīng)供試品加吡啶-硫酸銅,出現(xiàn)紫色或者綠色。2、苯環(huán)得鑒別反應(yīng)(1)硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng):顯色(2)甲醛-硫酸:顯色無苯環(huán)得無此反應(yīng),用來區(qū)別(三)雜質(zhì)檢查1、酸度控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲2、乙醇溶液得澄清度3、有關(guān)物質(zhì)高效液相色譜法4、中性或堿性物質(zhì)控制副產(chǎn)物比如酰胺類雜質(zhì),原理利用這類雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚,而苯巴比妥溶于氫氧化鈉,用乙醚提取雜質(zhì)后稱重,判斷雜質(zhì)就是否超過限量。(四)含量測定1、苯巴比妥得含量測定銀量法(1)原理:苯巴比妥與硝酸銀反應(yīng)生成銀鹽(2)方法(3)計(jì)算VTF\/m(4)注意:碳酸鈉溶液必須新鮮配制,用電位法指示終點(diǎn)。2、苯巴比妥片得含量測定采用高效液相色譜法第四節(jié)雜環(huán)類藥物得分析雜環(huán)化合物:指環(huán)狀有機(jī)化合物得碳環(huán)中夾雜有非碳素原子(如O、S、N等)得化合物,主要包括以下兩類1、天然有活性得,例如生物堿、抗生素與維生素類2、化學(xué)合成得,含O(呋喃),含N(吡啶、嘧啶),含S(吩噻嗪)本章主要介紹含氮與含硫得雜環(huán)類藥物共性:(1)雜環(huán)類藥物就是合成藥物中所占比例最多得一大類藥物。(2)多為五元環(huán)或六元環(huán),單環(huán)或并合環(huán)。(?)(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)一般穩(wěn)定,不易開環(huán),其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響。(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑,常用于分析。(?)(5)含氮雜環(huán),其堿性得強(qiáng)弱往往用于分析。結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì) 含有N原子得六元單環(huán),例如:異煙肼、尼克剎米與硝苯地平

氯氮卓

地西泮

二、異煙肼制劑分析(一)性狀本品為無色結(jié)晶,白色或類白色得結(jié)晶性粉末;無臭,味微甜后苦;遇光漸變質(zhì)。本品在水中易溶,在乙醇中微溶,在乙醚中極微溶解。鑒別(1)取本品約10mg,置試管中,加水2ml溶解后,加氨制硝酸銀試液1ml,即發(fā)生氣泡與黑色渾濁,并在試管壁上生成銀鏡。(2)在含量測定項(xiàng)下記錄得色譜圖中,供試品溶液主峰得保留時(shí)間應(yīng)與對照品溶液主峰得保留時(shí)間一致。(3)本品得紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照得圖譜(《藥品紅外光譜集》166圖)一致。(三)雜質(zhì)檢查1、離肼取本品,加丙酮－水(1:1)溶解并稀釋制成每1ml中約含100mg得溶液,作為供試品溶液;另取硫酸肼對照品,加丙酮－水(1:1)溶解并稀釋制成每1ml中約含0、08mg(相當(dāng)于游離肼20μg)得溶液,作為對照品溶液;取異煙肼與硫酸肼各適量,加丙酮－水(1:1)溶解并稀釋制成每1ml中分別含異煙肼100mg及硫酸肼0、08mg得混合溶液,作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。照薄層色譜法(2010年版藥典二部附錄ⅤB)試驗(yàn),吸取上述三種溶液各5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以異丙醇－丙酮(3:2)為展開劑,展開,晾干,噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液,15分鐘后檢視。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液所顯游離肼與異煙肼得斑點(diǎn)應(yīng)完全分離,游離肼得Rf值約為0、75,異煙肼得Rf值約為0、56。在供試品溶液主斑點(diǎn)前方與對照品溶液主斑點(diǎn)相應(yīng)得位置上,不得顯黃色斑點(diǎn)。2、有關(guān)物質(zhì)取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含0、5mg得溶液,作為供試品溶液;精密量取1ml,置100ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,作為對照溶液。照含量測定項(xiàng)下得色譜條件,取對照溶液10μl注入液相色譜儀,調(diào)節(jié)檢測靈敏度,使主成分色譜峰得峰高約為滿量程得20%;再精密量取供試品溶液與對照溶液各10μl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間得3、5倍。供試品溶液得色譜圖中如有雜質(zhì)峰,單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積得0、35倍(0、35%),各雜質(zhì)峰面積得與不得大于對照溶液主峰面積(1、0%)。(四)含量測定(高效液相色譜法)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0、02mol/L磷酸氫二鈉溶液(用磷酸調(diào)pH值至6、0)－甲醇(85:15)為流動(dòng)相;檢測波長為262nm。理論板數(shù)按異煙肼峰計(jì)算不低于4000。測定法取本品,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0、1mg得溶液,精密量取10μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取異煙肼對照品,同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得。地西泮及其制劑得分析(一)性狀1、外觀本品為白色或類白色得結(jié)晶性粉末;無臭2、溶解度本品在丙酮或三氯甲烷中易溶,在乙醇中溶解,在水中幾乎不溶。(二)鑒別1、硫酸-熒光反應(yīng)取本品約10mg,加硫酸3ml,振搖使溶解,在紫外光燈(365nm)下檢視,顯黃綠色熒光。

2、紫外線分光光度法取本品,加0、5％硫酸得甲醇溶液制成每1ml中含5μg得溶液,照紫外線-可見分光光度法(通則0401)測定,在242nm、284nm與366nm波長處有最大吸收;在242nm波長處得吸光度約為0、51,在284nm波長處得吸光度約為0、23。3、紅外分外分光光度法本品得紅外吸收圖譜應(yīng)與《藥品紅外光譜集》中相應(yīng)得對照圖譜(光譜集138圖)一致。4、氯化物得鑒別取本品20mg,用氧瓶燃燒法(通則0703)進(jìn)行有機(jī)破壞,以5％氫氧化鈉5ml為吸收液,燃燒完全后,用稀硝酸酸化,并緩緩煮沸2分鐘,溶液顯氯化物鑒別(1)得反應(yīng)(通則0301)地西泮結(jié)構(gòu)中得氯原子以共價(jià)鍵與苯環(huán)相連,結(jié)合牢固,不能直接鑒別,須先用氧瓶燃燒法破壞,使有機(jī)結(jié)合得氯轉(zhuǎn)化為游離得CLˉ,再行鑒別(三)雜質(zhì)檢查地西泮除需要檢查“乙醇溶液得澄清度與顏色”、“氯化物”、“干燥失重”及‘’熾灼殘?jiān)钡纫话汶s質(zhì)外,還應(yīng)作‘’有關(guān)物質(zhì)‘'得檢查《中國藥典》2015年版用高效液相色譜法,采用不加校正因子得主要成分自身對照法檢查地西泮原料藥,片劑及注射中得有關(guān)物質(zhì)。(四)含量測定1地西泮原料藥得含量測定(1)原理:利用地西泮結(jié)構(gòu)中二痰雜卓上得氮原子呈弱堿性,在非水介質(zhì)中堿性增強(qiáng),可被被高氯酸滴定液直接滴定,故藥典2015年版采用非水溶液滴定法測定地西泮原料藥得含量。(2)方法(3)含量計(jì)算:VTF/m2、地西泮制劑得含量測定采用高效液相色譜法第五節(jié)生物堿類藥物分析一、典型藥物得結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿硫酸阿托品氫溴酸山莨菪堿硫酸奎寧鹽酸嗎啡鹽酸小檗堿二、鹽酸麻黃堿及其制劑得分析(一)性狀1、白色結(jié)晶或粉末2、溶解度水中易溶3、比旋度左旋(二)鑒別1、雙縮脲反應(yīng)芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)得生物堿類藥物得特征鑒別反應(yīng)。2、紅外分光光度法3、氯化物反應(yīng)4、高效液相色譜法(三)雜質(zhì)檢查1、雜質(zhì)來源從藥用植物提取比如鹽酸偽麻黃堿、其她麻黃堿類物質(zhì)。2、檢查方法高效液相色譜法(四)含量測定1、鹽酸麻黃堿得含量測定(1)原理:非水溶液滴定法(2)方法本法實(shí)際為置換反應(yīng)(3)含量計(jì)算鹽酸麻黃堿=(V-V0)TF/m2、鹽酸麻黃堿注射液得含量測定采用高效液相色譜法。三、硫酸阿托品及其制劑得分析(一)性狀1、外觀與臭味白色結(jié)晶粉末,無臭味。2、溶解度水中極易溶解,乙醇中易溶(二)鑒別1、托烷生物堿類反應(yīng)vitali反應(yīng)2、硫酸鹽反應(yīng)3、紅外分光光度法(三)雜質(zhì)檢查1、莨菪堿(1)雜質(zhì)來源莨菪堿(2)檢查方法:旋光度法2、有關(guān)物質(zhì)(1)雜質(zhì)來源生產(chǎn)過程中引入莨菪堿,顛茄堿等生物堿雜質(zhì),中間體,副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物等有關(guān)雜質(zhì)。(2)檢查方法:藥典2015年版采用高效液相色譜法進(jìn)行檢查。(四)含量測定1、硫酸阿托品得含量測定(1)原理:非水溶液滴定法一個(gè)高氯酸分子與一個(gè)硫酸阿托品發(fā)生反應(yīng),被滴定到硫酸氫鹽階段。(2)方法(3)含量計(jì)算:=(V-V0)TF/m2、硫酸阿托品片得含量測定(1)硫酸鹽阿托品在某pH下形成陽離子,而酸性染料為陰離子,結(jié)合生成有色得離子對。通過測定離子對得吸光度,來計(jì)算含量。(2)供試品溶液得制備(3)對照品溶液得制備(4)方法(5)含量計(jì)算:Ax/Ar*CRV*1、027*平均片重/(m*標(biāo)示量)第六節(jié)糖類藥物分析一、典型藥物得結(jié)構(gòu)與性質(zhì)蔗糖結(jié)構(gòu)二、葡萄糖及其制劑得分析(一)性狀1、外觀與臭味本品為無色結(jié)晶或白色結(jié)晶粉末,無臭味,微甜2、溶解度水中易溶3、比旋度比旋度為右旋(二)鑒別1、堿性酒石酸銅得試液反應(yīng)(1)原理葡萄糖主要呈半縮醛得環(huán)狀結(jié)構(gòu),可以開環(huán)形成具有醛基得鏈狀結(jié)構(gòu),具有還原性。(2)鑒別方法:本品水溶液,加堿性酒石酸銅,出現(xiàn)氧化亞銅磚紅色沉淀。2、紅外分光光度法(三)雜質(zhì)檢查1、乙醇溶液得澄清度主要控制糊精,葡萄糖溶于熱乙醇,而糊精溶解度小。2、亞硫酸鹽與可溶性淀粉3、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)遇到酸變性,容易出現(xiàn)沉淀。4、5-羥甲基糠醛(1)雜質(zhì)來源:葡萄糖縮水等出現(xiàn),進(jìn)一步聚合出現(xiàn)沉淀,或進(jìn)一步分解,導(dǎo)致注射液變黃,產(chǎn)生沉淀,PH下降。(2)檢查方法:供試品進(jìn)行規(guī)定紫外分光光度法測定,吸光度不得大于0、32、(四)含量測定1、測定方法葡萄糖加氨水,測定旋光度計(jì)算公式C=α*2、08522、注意事項(xiàng)(1)測定前溶劑作空白試驗(yàn)校正(2)溫度為20℃(3)均應(yīng)充分溶解,供試液應(yīng)該澄清(4)測定旋光度應(yīng)該按照藥典規(guī)定條件第七節(jié)維生素類藥物分析一、水溶性維生素類藥物分析(一)典型藥物得結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素B1維生素C(二)維生素B1及其制劑得分析1、性狀(1)外觀與臭味:本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶粉末;有微弱得特臭,味苦。(2)溶解度:水中易溶(3)吸收系數(shù):具有氨基嘧啶環(huán)與噻唑環(huán)等,具有紫外吸收。2、鑒別(1)硫色素反應(yīng):維生素B1在堿性溶液中,被鐵氰化鉀氧化成硫色素。硫色素能溶解于正丁醇中,使溶液顯示藍(lán)色熒光。(2)紅外分光光度法(3)氯化物反應(yīng)3、雜質(zhì)檢查(1