凝膠層析題庫及答案

單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.凝膠層析的分離原理主要是（）A.吸附作用B.分配系數(shù)C.分子大小D.離子交換2.下列哪種凝膠常用于凝膠層析（）A.硅膠B.葡聚糖凝膠C.氧化鋁D.活性炭3.凝膠層析中，分子量大的物質(zhì)（）A.先流出B.后流出C.與分子量小的同時(shí)流出D.不流出4.凝膠層析的洗脫液通常是（）A.有機(jī)溶劑B.緩沖溶液C.酸溶液D.堿溶液5.凝膠的交聯(lián)度越大，其孔徑（）A.越大B.越小C.不變D.不確定6.凝膠層析可用于（）A.蛋白質(zhì)純化B.測(cè)定蛋白質(zhì)分子量C.脫鹽D.以上都是7.以下關(guān)于凝膠層析柱說法錯(cuò)誤的是（）A.柱高與直徑比一般為20-100:1B.要垂直安裝C.柱床不能有氣泡D.柱內(nèi)凝膠可隨意填充8.凝膠層析中，樣品體積一般不超過柱床體積的（）A.1%B.5%C.10%D.20%9.新凝膠使用前需要進(jìn)行（）處理。A.活化B.干燥C.研磨D.加熱10.凝膠層析中，洗脫流速過快會(huì)導(dǎo)致（）A.分離效果變好B.分離效果變差C.不影響分離D.凝膠損壞多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.凝膠層析的優(yōu)點(diǎn)有（）A.操作簡(jiǎn)單B.分離效果好C.適用范圍廣D.樣品回收率高2.以下屬于凝膠層析常用凝膠的有（）A.瓊脂糖凝膠B.聚丙烯酰胺凝膠C.離子交換凝膠D.葡聚糖凝膠3.影響凝膠層析分離效果的因素有（）A.凝膠性質(zhì)B.柱長C.洗脫流速D.樣品濃度4.凝膠層析可用于分離的物質(zhì)有（）A.蛋白質(zhì)B.核酸C.多糖D.小分子有機(jī)化合物5.凝膠層析柱在裝填過程中需要注意（）A.避免產(chǎn)生氣泡B.凝膠要均勻分布C.柱床表面平整D.柱內(nèi)不能有雜質(zhì)6.凝膠的選擇需要考慮的因素有（）A.分離物質(zhì)的分子量范圍B.凝膠的機(jī)械強(qiáng)度C.凝膠的化學(xué)穩(wěn)定性D.凝膠的價(jià)格7.凝膠層析洗脫過程中，出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象可能的原因有（）A.凝膠裝填不均勻B.樣品過載C.洗脫液流速不穩(wěn)定D.凝膠被污染8.以下關(guān)于凝膠再生說法正確的是（）A.可以用適當(dāng)?shù)娜芤簺_洗B.可去除雜質(zhì)C.能恢復(fù)凝膠性能D.每次使用后都要再生9.凝膠層析在生物化學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用包括（）A.蛋白質(zhì)純度鑒定B.酶的分離純化C.抗體的制備D.藥物分析10.進(jìn)行凝膠層析實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要準(zhǔn)備的儀器有（）A.層析柱B.蠕動(dòng)泵C.收集器D.紫外檢測(cè)儀判斷題（每題2分，共10題）1.凝膠層析只能分離蛋白質(zhì)。（）2.凝膠的孔徑大小是固定不變的。（）3.洗脫液的離子強(qiáng)度對(duì)凝膠層析分離效果無影響。（）4.凝膠層析柱越長，分離效果一定越好。（）5.樣品的上樣量越大，分離效果越好。（）6.凝膠層析中，小分子物質(zhì)在柱內(nèi)停留時(shí)間長。（）7.不同類型的凝膠，其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)相同。（）8.凝膠使用后不需要進(jìn)行任何處理就可再次使用。（）9.凝膠層析可用于去除蛋白質(zhì)溶液中的鹽。（）10.凝膠層析的分離效果只取決于凝膠本身。（）簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述凝膠層析的基本原理。答案：凝膠層析基于分子大小不同進(jìn)行分離。凝膠內(nèi)部有許多大小不一的孔隙，當(dāng)樣品進(jìn)入層析柱，大分子物質(zhì)不能進(jìn)入孔隙，沿凝膠顆粒間隙先流出；小分子物質(zhì)進(jìn)入孔隙，在柱內(nèi)停留時(shí)間長，后流出，從而實(shí)現(xiàn)分離。2.選擇凝膠時(shí)主要考慮哪些因素？答案：主要考慮分離物質(zhì)的分子量范圍，要選擇能使目標(biāo)物質(zhì)處于合適分離區(qū)間的凝膠；還需考慮凝膠的機(jī)械強(qiáng)度、化學(xué)穩(wěn)定性等，以保證實(shí)驗(yàn)操作順利及凝膠性能穩(wěn)定。3.凝膠層析柱裝填過程有哪些注意事項(xiàng)？答案：要保證柱垂直，凝膠懸液均勻倒入柱中，避免產(chǎn)生氣泡，柱床表面平整，裝填過程中柱內(nèi)不能有雜質(zhì)，確保凝膠均勻分布，否則影響分離效果。4.簡(jiǎn)述凝膠層析洗脫液的選擇原則。答案：洗脫液應(yīng)不與凝膠和樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，要能維持樣品穩(wěn)定，保持其生物活性。其離子強(qiáng)度、pH等要適宜，通常選用緩沖溶液，以保證洗脫過程的穩(wěn)定性和分離效果。討論題（每題5分，共4題）1.在凝膠層析實(shí)驗(yàn)中，若分離效果不理想，可能有哪些原因及解決方法？答案：原因可能是凝膠選擇不當(dāng)、裝填不均勻、洗脫流速不合適、樣品過載等。解決方法為重新選擇合適凝膠，重裝層析柱保證均勻，調(diào)整洗脫流速，減少上樣量等。2.凝膠層析與其他分離技術(shù)相比，有哪些獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和局限性？答案：優(yōu)勢(shì)是操作簡(jiǎn)單、樣品回收率高、能按分子大小分離。局限性在于分離效率相對(duì)某些技術(shù)低，對(duì)分子量相近物質(zhì)分離效果有限，且柱容量較小，不適用于大量樣品分離。3.如何提高凝膠層析的分辨率？答案：選擇合適孔徑且均勻的凝膠，優(yōu)化柱長與直徑比例，控制合適洗脫流速，避免樣品過載，確保柱裝填均勻無氣泡，同時(shí)優(yōu)化洗脫液組成和條件，提高分離分辨率。4.凝膠層析在生物制藥領(lǐng)域有哪些重要應(yīng)用？答案：可用于生物藥物的分離純化，如蛋白質(zhì)類藥物、酶類藥物等的提純；還能測(cè)定藥物分子量輔助質(zhì)量控制；在藥物研發(fā)中對(duì)活性成分進(jìn)行分離鑒定，保障藥物質(zhì)量和藥效。答案單項(xiàng)選擇題1.C2.B3.A4.B5.B6.D7.D8.C9.A10.B多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABD3.ABC