152021-05-25發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定I北方主要牧草中17種霉菌毒素的的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰基-脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙酰基-脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、雜色GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格樣品中的霉菌毒素用乙腈和甲酸水溶液提取后，經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定，采用保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片及其離子豐度比定性，內(nèi)5.1除另有規(guī)外，本文件所用試劑均為分析純，水15.6氯化鈉。5.9標(biāo)準(zhǔn)品5.9.1霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品：黃曲霉毒素B1、B2、G1鐮刀菌烯醇、3-乙?；?脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙?；?脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、雜色曲霉素、伏馬毒素B1、B2、B3、玉米赤霉烯酮、青霉酸和展青霉素17種標(biāo)準(zhǔn)品，5.9.2霉菌毒素穩(wěn)定同位素標(biāo)準(zhǔn)品：黃曲霉毒素B1-13C17、脫氧雪腐5.10標(biāo)準(zhǔn)溶液配制5.11穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)溶液配制5.11.1穩(wěn)定同位素的單標(biāo)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱?。ň?0mL容量瓶中，用甲醇稀釋、定容，配制成穩(wěn)定同位素混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，避光保存于-18℃冰5.12基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)系列工作液），5.13鍵合硅固相萃取吸附劑：C18，15mm；PSA，0.15m6.1高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴2按照GB/T14699.1規(guī)定采集準(zhǔn)確稱取2g樣品(精確到0.01g)于50mL離心管中，加入20.0mL提取液（5.4渦旋振蕩1min，超聲提取10min，以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心（5.13）50mg，PSA（5.13）50mg，渦旋混合1min，以6000r/min0.1%的甲酸水溶液-甲醇（5.8）稀釋至1.0mL，再渦旋30s，過(guò)0.2μm微孔過(guò)濾膜，轉(zhuǎn)移至上機(jī)樣品取不含待測(cè)物的空白樣品，按8.1和8.2步驟液相色譜和質(zhì)譜參數(shù)可參考下列條件:——色譜柱：C18：100mm×2.1——流動(dòng)相：A：0.1%甲酸溶液（5.4B：乙腈（5.min3——進(jìn)樣量：1μL；——離子源：電噴霧（ESI——檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM——電離電壓：2500V；——錐孔氣流速：50L/h；——霧化氣流速：650L/h；——待測(cè)物定性定量離子對(duì)的錐孔電壓、碰撞能量見(jiàn)見(jiàn)附在±2.5%以內(nèi)，且樣品色譜圖中定性離子的相對(duì)離子豐度與濃度相近的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖中對(duì)應(yīng)的定性離子相對(duì)豐度進(jìn)行比較，相對(duì)偏差不超過(guò)表29結(jié)果計(jì)算樣品中待測(cè)物的測(cè)定結(jié)果可由儀器工作軟件計(jì)算或按式（1）計(jì)算，計(jì)算結(jié)果用平行1）4C——標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中待測(cè)物的濃度，μg/L；Ci——樣品中待測(cè)物的內(nèi)標(biāo)物的濃度，μg/L；A——樣品中的待測(cè)物的峰面積；V——樣品溶液定容體積，mL；Csi——標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中待測(cè)物對(duì)應(yīng)的內(nèi)標(biāo)物濃度，μg/L；m——樣品的稱樣量，g。V2——樣品溶液分取體積，mL。B3、玉米赤霉烯酮、青霉酸和展青霉素17種霉菌毒素的回收率，見(jiàn)附錄F中的表F.1。再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算數(shù)平均值的5AflatoxinB1AFB1AflatoxinB2AFB2AflatoxinG1AFG1AflatoxinG2AFG2醇AflatoxinB1-13C1713C17]-AFB113C15]-DON13C34]-FB113C18]-ZEN617種霉菌毒素及穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物的單標(biāo)17種霉菌毒素及穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物的單標(biāo)標(biāo)表B.117種霉菌毒素及穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物的單標(biāo)7表B.217種霉菌毒素及穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物的混11555522255258表C.117種霉菌毒素及內(nèi)標(biāo)物的定性、定量離子對(duì)的錐m/zm/zVV86666669表C.117種霉菌