人參多糖與膠陀螺多糖：小鼠體內(nèi)抗瘧作用的實(shí)驗(yàn)與機(jī)制探究一、引言1.1研究背景瘧疾是一種由瘧原蟲(chóng)感染引發(fā)的急性傳染病，主要通過(guò)按蚊叮咬進(jìn)行傳播，是全球范圍內(nèi)最嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。瘧疾的臨床癥狀表現(xiàn)多樣，常見(jiàn)的有周期性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱、大汗，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)引發(fā)貧血、肝脾腫大，若不及時(shí)治療，甚至?xí)＜吧?。?jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的《世界瘧疾報(bào)告2024》顯示，2023年全球瘧疾病例數(shù)約達(dá)2.63億例，相較于上一年增加了約1100萬(wàn)例。盡管自2020年起，全球瘧疾死亡病例數(shù)呈持續(xù)下降趨勢(shì)，2023年約為59.7萬(wàn)例，比上一年減少1.1萬(wàn)例，但瘧疾所造成的疾病負(fù)擔(dān)依然沉重，對(duì)人類(lèi)健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展構(gòu)成了極大威脅。長(zhǎng)期以來(lái)，人類(lèi)一直在與瘧疾進(jìn)行不懈的斗爭(zhēng)，并在防治方面取得了一定成果。然而，當(dāng)前瘧疾防治工作仍面臨諸多挑戰(zhàn)。一方面，在瘧疾流行地區(qū)，尤其是非洲和東南亞部分國(guó)家，醫(yī)療衛(wèi)生條件相對(duì)落后，防控資源匱乏，導(dǎo)致瘧疾的傳播難以得到有效遏制。另一方面，耐藥瘧原蟲(chóng)的不斷出現(xiàn)和擴(kuò)散，使得現(xiàn)有的抗瘧藥物療效大打折扣，給瘧疾的治療和防控帶來(lái)了新的難題。例如，一些亞洲國(guó)家的惡性瘧疾病人血樣中已發(fā)現(xiàn)對(duì)青蒿素等主要抗瘧藥物產(chǎn)生耐藥性的瘧原蟲(chóng)，這嚴(yán)重影響了瘧疾藥物治療的有效性，一旦這類(lèi)瘧原蟲(chóng)擴(kuò)散到更多地區(qū)，極有可能引發(fā)一場(chǎng)新的公共衛(wèi)生危機(jī)。面對(duì)耐藥瘧原蟲(chóng)帶來(lái)的挑戰(zhàn)，尋找新型抗瘧藥物已成為全球瘧疾防治領(lǐng)域的當(dāng)務(wù)之急。從天然產(chǎn)物中尋找具有抗瘧活性的成分，是開(kāi)發(fā)新型抗瘧藥物的重要途徑之一。人參多糖和膠陀螺多糖作為天然多糖，具有來(lái)源廣泛、生物活性多樣、低毒副作用等優(yōu)點(diǎn)，在免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗炎等方面展現(xiàn)出良好的效果，這為其在抗瘧領(lǐng)域的研究提供了理論基礎(chǔ)。因此，研究人參多糖及膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)抑制以及預(yù)防瘧疾的作用，具有重要的理論意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，有望為瘧疾的防治提供新的策略和方法。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究人參多糖和膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)對(duì)瘧疾的抑制和預(yù)防作用，明確這兩種多糖對(duì)感染瘧原蟲(chóng)小鼠的生存時(shí)間、瘧原蟲(chóng)血癥水平等指標(biāo)的影響，分析它們?cè)诓煌瑒┝亢徒o藥時(shí)間下的抗瘧效果差異，同時(shí)探討多糖與傳統(tǒng)抗瘧藥物聯(lián)合使用時(shí)是否具有協(xié)同增效作用，以及多糖發(fā)揮抗瘧作用可能涉及的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制等。瘧疾嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康，耐藥瘧原蟲(chóng)的出現(xiàn)使現(xiàn)有抗瘧藥物面臨困境，開(kāi)發(fā)新型抗瘧藥物迫在眉睫。人參多糖和膠陀螺多糖來(lái)源豐富、安全性高且具有多種生物活性，研究其抗瘧作用具有重要意義。一方面，若證實(shí)它們具有顯著抗瘧活性，將為瘧疾治療提供新的天然藥物選擇，或成為抗瘧藥物研發(fā)的先導(dǎo)化合物，有助于開(kāi)發(fā)低毒高效的新型抗瘧藥物，豐富瘧疾防治的藥物種類(lèi)；另一方面，有助于深入了解天然多糖的生物功能和作用機(jī)制，拓展多糖類(lèi)物質(zhì)在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用范圍，為從天然產(chǎn)物中尋找更多治療重大疾病的有效成分提供理論依據(jù)和研究思路，推動(dòng)天然藥物研究的發(fā)展，在全球瘧疾防治工作中發(fā)揮積極作用。二、相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1瘧疾及其免疫機(jī)制瘧疾是一種由瘧原蟲(chóng)感染引發(fā)的寄生蟲(chóng)病，在全球范圍內(nèi)，尤其是熱帶和亞熱帶地區(qū)廣泛流行。其傳播途徑主要是雌性按蚊叮咬，當(dāng)雌性按蚊叮咬感染瘧原蟲(chóng)的患者后，瘧原蟲(chóng)會(huì)在按蚊體內(nèi)發(fā)育繁殖，隨后按蚊再次叮咬健康人時(shí)，就會(huì)將瘧原蟲(chóng)注入人體，從而引發(fā)感染。此外，少數(shù)情況下，瘧疾也可通過(guò)輸入帶有瘧原蟲(chóng)的血液或經(jīng)母嬰傳播而發(fā)病。瘧疾的臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜，患者在初次感染時(shí)常出現(xiàn)前驅(qū)癥狀，如乏力、頭痛、四肢酸痛、食欲下降、不規(guī)則低熱等，這些前驅(qū)癥狀的持續(xù)時(shí)間會(huì)因疾病類(lèi)型的不同而有所差異。在發(fā)作期間，典型癥狀為突發(fā)性寒戰(zhàn)、高熱、大量出汗，同時(shí)可伴有貧血癥狀，嚴(yán)重影響患者的身體健康。此外，患者還可能出現(xiàn)咳嗽、胸部和腹部疼痛、厭食、嗜睡等癥狀。若病情進(jìn)一步發(fā)展，嚴(yán)重者甚至?xí)l(fā)生昏迷、代謝性酸中毒、低血糖、急性腎功能衰竭或急性肺水腫等危及生命的并發(fā)癥。人體對(duì)瘧疾的免疫應(yīng)答是一個(gè)復(fù)雜且精細(xì)的過(guò)程，涉及固有免疫和適應(yīng)性免疫兩個(gè)方面，二者相互協(xié)作，共同抵御瘧原蟲(chóng)的感染。固有免疫作為人體抵御病原體入侵的第一道防線(xiàn)，在瘧原蟲(chóng)感染初期發(fā)揮著關(guān)鍵作用。巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）和樹(shù)突狀細(xì)胞等固有免疫細(xì)胞，能夠通過(guò)識(shí)別病原體相關(guān)分子模式（PAMPs）和危險(xiǎn)相關(guān)分子模式（DAMPs），迅速啟動(dòng)免疫反應(yīng)。巨噬細(xì)胞可吞噬和清除瘧原蟲(chóng)，并分泌炎癥因子，激活其他免疫細(xì)胞；NK細(xì)胞能夠直接殺傷被瘧原蟲(chóng)感染的細(xì)胞，同時(shí)分泌細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答；樹(shù)突狀細(xì)胞作為抗原提呈細(xì)胞，攝取和處理瘧原蟲(chóng)抗原后，將其呈遞給T細(xì)胞，啟動(dòng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答。當(dāng)固有免疫無(wú)法完全清除瘧原蟲(chóng)時(shí)，適應(yīng)性免疫便被激活。適應(yīng)性免疫包括體液免疫和細(xì)胞免疫，具有特異性和記憶性。體液免疫主要由B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，B淋巴細(xì)胞在受到瘧原蟲(chóng)抗原刺激后，會(huì)分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞分泌特異性抗體，這些抗體能夠中和瘧原蟲(chóng)，阻止其進(jìn)一步感染紅細(xì)胞。例如，抗體可以識(shí)別瘧原蟲(chóng)表面的抗原，并與其結(jié)合，從而阻斷瘧原蟲(chóng)與紅細(xì)胞表面受體的結(jié)合，使其無(wú)法侵入紅細(xì)胞。細(xì)胞免疫則主要由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，T淋巴細(xì)胞包括輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）和細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）。Th細(xì)胞能夠分泌細(xì)胞因子，輔助B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，同時(shí)激活巨噬細(xì)胞和CTL等免疫細(xì)胞，增強(qiáng)免疫應(yīng)答。CTL能夠直接殺傷被瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞，清除體內(nèi)的病原體，有效控制瘧疾的發(fā)病和傳播。在瘧疾免疫應(yīng)答過(guò)程中，多種細(xì)胞因子和趨化因子參與其中，它們對(duì)免疫細(xì)胞的活化、增殖、分化和遷移起到重要的調(diào)節(jié)作用。γ干擾素（IFN-γ）可以激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)其殺傷被瘧原蟲(chóng)感染紅細(xì)胞的能力；白細(xì)胞介素-10（IL-10）則能夠抑制過(guò)度的免疫反應(yīng)，防止免疫病理?yè)p傷的發(fā)生。然而，瘧原蟲(chóng)具有復(fù)雜的抗原結(jié)構(gòu)和免疫逃避機(jī)制，這使得瘧疾的免疫預(yù)防和治療面臨諸多挑戰(zhàn)。瘧原蟲(chóng)在感染人體的過(guò)程中，會(huì)不斷改變自身的抗原，從而逃避人體免疫系統(tǒng)的識(shí)別和攻擊，導(dǎo)致瘧疾難以被徹底清除，容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)和慢性感染的情況。2.3瘧疾防治藥物研究現(xiàn)狀目前，臨床上用于瘧疾防治的藥物種類(lèi)繁多，根據(jù)其作用機(jī)制和用途，主要可分為治療藥物和病因性預(yù)防藥物。治療藥物是在瘧疾病人發(fā)病后使用，用于控制癥狀、殺滅瘧原蟲(chóng)，以達(dá)到治愈疾病的目的。常見(jiàn)的治療藥物包括青蒿素類(lèi)藥物、氯喹、奎寧等。青蒿素類(lèi)藥物是從青蒿中提取的有效成分，具有高效、速效、低毒等優(yōu)點(diǎn)，是目前治療瘧疾的首選藥物。青蒿琥酯和蒿甲醚等，它們能夠迅速降低瘧原蟲(chóng)血癥水平，緩解患者癥狀，使患者的體溫恢復(fù)正常，減少并發(fā)癥的發(fā)生。在一些瘧疾高發(fā)地區(qū)，使用青蒿琥酯進(jìn)行治療，患者的治愈率可達(dá)90%以上。然而，近年來(lái)隨著青蒿素類(lèi)藥物的廣泛使用，部分地區(qū)出現(xiàn)了瘧原蟲(chóng)對(duì)青蒿素產(chǎn)生耐藥性的現(xiàn)象，這給瘧疾的治療帶來(lái)了新的挑戰(zhàn)。氯喹是一種傳統(tǒng)的抗瘧藥物，對(duì)紅細(xì)胞內(nèi)期的瘧原蟲(chóng)有較強(qiáng)的殺滅作用，曾被廣泛用于瘧疾的治療。但由于長(zhǎng)期使用，瘧原蟲(chóng)對(duì)氯喹的耐藥性逐漸增加，尤其是在惡性瘧流行地區(qū)，氯喹的療效明顯下降，導(dǎo)致其應(yīng)用受到了一定限制?？鼘幨亲钤缬糜谥委煰懠驳乃幬镏?，雖然其療效不如青蒿素類(lèi)藥物，但在某些情況下仍被使用。它能抑制瘧原蟲(chóng)的核酸代謝，導(dǎo)致瘧原蟲(chóng)死亡，可用于治療對(duì)氯喹耐藥的惡性瘧患者。不過(guò)，奎寧的副作用較大，如會(huì)引起頭暈、耳鳴、聽(tīng)力減退等不良反應(yīng)，長(zhǎng)期使用還可能導(dǎo)致心臟毒性，因此在使用時(shí)需要密切監(jiān)測(cè)患者的生命體征。病因性預(yù)防藥物則是在瘧疾流行地區(qū)，用于預(yù)防瘧疾感染的藥物。乙胺嘧啶是常用的病因性預(yù)防藥物之一，它主要作用于進(jìn)行裂殖體增殖的瘧原蟲(chóng)，對(duì)已發(fā)育完成的裂殖體無(wú)效。乙胺嘧啶能抑制瘧原蟲(chóng)的葉酸代謝，從而阻止瘧原蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖。在瘧疾流行季節(jié)，給高危人群預(yù)防性服用乙胺嘧啶，可有效降低瘧疾的感染率。然而，乙胺嘧啶的起效較慢，需要提前服用一段時(shí)間才能發(fā)揮作用，且長(zhǎng)期使用也可能導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生。此外，還有一些其他類(lèi)型的抗瘧藥物，如咯萘啶、磺胺多辛乙胺嘧啶等。咯萘啶對(duì)各種瘧疾包括腦型瘧和兇險(xiǎn)瘧疾的危重患者有較好的治療效果，它能與瘧原蟲(chóng)的DNA結(jié)合，抑制其復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮抗瘧作用?；前范嘈烈野粪奏t是通過(guò)抑制瘧原蟲(chóng)的葉酸合成，達(dá)到抗瘧的目的，常用于治療對(duì)氯喹耐藥的惡性瘧和間日瘧。但這些藥物也都存在各自的局限性，如副作用、耐藥性等問(wèn)題。現(xiàn)有瘧疾防治藥物雖然在一定程度上控制了瘧疾的傳播和發(fā)病，但都存在一些不足之處。耐藥性問(wèn)題日益嚴(yán)重，這使得藥物的療效逐漸降低，增加了瘧疾治療的難度。許多藥物都有不同程度的副作用，會(huì)對(duì)患者的身體造成一定的損害，影響患者的生活質(zhì)量。因此，尋找新型、高效、低毒且不易產(chǎn)生耐藥性的抗瘧藥物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。2.4植物多糖預(yù)防治療瘧疾的潛在價(jià)值植物多糖作為一類(lèi)來(lái)源于植物的天然大分子化合物，在瘧疾預(yù)防治療領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的潛在價(jià)值，其作用涉及多個(gè)方面。從免疫調(diào)節(jié)角度來(lái)看，植物多糖能夠顯著調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)瘧原蟲(chóng)的抵抗力。巨噬細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在識(shí)別和清除瘧原蟲(chóng)的過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。研究表明，許多植物多糖可以激活巨噬細(xì)胞，使其吞噬能力大幅增強(qiáng)，從而更有效地清除瘧原蟲(chóng)。人參多糖能夠刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮（NO）等細(xì)胞毒性物質(zhì)，這些物質(zhì)可以直接殺傷瘧原蟲(chóng)，抑制其在體內(nèi)的生長(zhǎng)和繁殖。同時(shí)，植物多糖還能促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子可以進(jìn)一步激活其他免疫細(xì)胞，如T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答。TNF-α可以誘導(dǎo)被瘧原蟲(chóng)感染的細(xì)胞凋亡，阻止瘧原蟲(chóng)的進(jìn)一步擴(kuò)散；IL-1則能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能。植物多糖對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用也十分顯著。它可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖和分化，增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞對(duì)瘧原蟲(chóng)感染細(xì)胞的殺傷能力。還能刺激B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體，這些抗體能夠中和瘧原蟲(chóng)，阻止其侵入紅細(xì)胞，從而有效預(yù)防和控制瘧疾的發(fā)生和發(fā)展。在協(xié)同增效方面，植物多糖與傳統(tǒng)抗瘧藥物聯(lián)合使用時(shí)，具有明顯的協(xié)同增效作用。傳統(tǒng)抗瘧藥物雖然能夠有效殺滅瘧原蟲(chóng)，但長(zhǎng)期使用容易導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生，且存在一定的副作用。而植物多糖的加入，可以在一定程度上減少傳統(tǒng)抗瘧藥物的用量，降低藥物的毒副作用，同時(shí)提高治療效果。研究發(fā)現(xiàn)，將人參多糖與青蒿素聯(lián)合使用時(shí)，青蒿素的抗瘧活性得到了顯著增強(qiáng)。人參多糖可以調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，提高機(jī)體對(duì)青蒿素的敏感性，使青蒿素能夠更有效地發(fā)揮抗瘧作用。人參多糖還能減輕青蒿素對(duì)機(jī)體的毒副作用，提高患者的耐受性。這種協(xié)同增效作用不僅可以提高瘧疾的治療效果，還能延緩耐藥性的產(chǎn)生，為瘧疾的治療提供了新的思路和方法。植物多糖還具有低毒副作用的優(yōu)勢(shì)。與許多化學(xué)合成藥物相比，植物多糖來(lái)源于天然植物，一般不會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。在瘧疾的治療過(guò)程中，患者往往需要長(zhǎng)期服用藥物，因此藥物的安全性至關(guān)重要。植物多糖的低毒副作用特性，使得它在瘧疾防治中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，可以減少患者在治療過(guò)程中的不良反應(yīng)，提高患者的生活質(zhì)量。植物多糖還具有來(lái)源廣泛、成本相對(duì)較低的特點(diǎn)，這為其大規(guī)模應(yīng)用于瘧疾防治提供了有利條件。在瘧疾流行的地區(qū)，許多植物資源豐富，可以通過(guò)提取和加工獲得植物多糖，為當(dāng)?shù)氐寞懠卜乐喂ぷ魈峁┙?jīng)濟(jì)有效的手段。植物多糖在瘧疾防治中具有潛在的免疫調(diào)節(jié)、協(xié)同增效、低毒副作用等多方面的作用和優(yōu)勢(shì)，為瘧疾的防治提供了新的方向和策略。未來(lái)，隨著對(duì)植物多糖研究的不斷深入，有望開(kāi)發(fā)出更多基于植物多糖的抗瘧藥物或輔助治療手段，為全球瘧疾防治工作做出更大的貢獻(xiàn)。三、實(shí)驗(yàn)材料與方法3.1實(shí)驗(yàn)材料3.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用6-8周齡、體重為18-22g的SPF級(jí)雌性昆明小鼠，共120只。昆明小鼠具有繁殖能力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力好等優(yōu)點(diǎn)，且其遺傳背景相對(duì)穩(wěn)定，在生物醫(yī)學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用，尤其是在藥物藥效學(xué)和毒理學(xué)研究方面，能為實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供可靠的數(shù)據(jù)支持。這些小鼠購(gòu)自[供應(yīng)商名稱(chēng)]，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為[許可證編號(hào)]。小鼠運(yùn)抵實(shí)驗(yàn)室后，先在溫度為23±2℃、相對(duì)濕度為50±10%的環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，期間自由進(jìn)食和飲水，飼料為符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的嚙齒類(lèi)動(dòng)物專(zhuān)用飼料，飲用水為經(jīng)過(guò)高溫滅菌處理的純凈水。飼養(yǎng)環(huán)境保持清潔衛(wèi)生，每日定時(shí)更換墊料，每周對(duì)飼養(yǎng)籠具進(jìn)行徹底消毒，以確保小鼠處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài)，減少環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。3.1.2材料來(lái)源人參購(gòu)自吉林長(zhǎng)白山地區(qū)的[具體產(chǎn)地]，該地以其優(yōu)質(zhì)的人參資源而聞名，所產(chǎn)人參品質(zhì)上乘，有效成分含量高。采集時(shí)，選擇生長(zhǎng)年限為5-6年的人參，此時(shí)人參的藥用價(jià)值較高，多糖等有效成分積累較為充分。人參經(jīng)專(zhuān)業(yè)鑒定人員鑒定為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根，確保其品種的準(zhǔn)確性。采集后，將人參用清水洗凈，去除表面的泥土和雜質(zhì)，然后在陰涼通風(fēng)處晾干，備用。膠陀螺采自[具體采集地點(diǎn)]，該地區(qū)的自然環(huán)境適宜膠陀螺生長(zhǎng)，所采集的膠陀螺品質(zhì)優(yōu)良。采集時(shí)，選取形態(tài)完整、無(wú)病蟲(chóng)害的膠陀螺子實(shí)體。采集后，先將膠陀螺用清水沖洗干凈，去除表面的灰塵和雜物，再將其置于烘箱中，在40℃條件下烘干至恒重，然后用粉碎機(jī)粉碎成粉末，過(guò)80目篩，得到膠陀螺粉末，密封保存，備用。3.1.3瘧原蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)所用瘧原蟲(chóng)為伯氏瘧原蟲(chóng)（Plasmodiumberghei）ANKA株，該蟲(chóng)株具有生長(zhǎng)繁殖速度快、對(duì)小鼠感染力強(qiáng)等特點(diǎn)，是常用的鼠瘧原蟲(chóng)模型，能較好地模擬人類(lèi)瘧疾的發(fā)病過(guò)程。伯氏瘧原蟲(chóng)ANKA株由[提供單位名稱(chēng)]饋贈(zèng)。將保存的瘧原蟲(chóng)復(fù)蘇后，采用小鼠腹腔接種的方式進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體操作如下：取感染瘧原蟲(chóng)的小鼠，斷尾取血，用生理鹽水稀釋至適當(dāng)濃度，然后將稀釋后的血樣腹腔注射到健康小鼠體內(nèi)，每只小鼠注射0.2mL。接種后，定期觀察小鼠的發(fā)病情況，當(dāng)小鼠出現(xiàn)明顯的瘧疾病癥，如精神萎靡、毛發(fā)無(wú)光澤、活動(dòng)減少等，且血涂片檢查顯示瘧原蟲(chóng)血癥達(dá)到一定水平時(shí)，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。瘧原蟲(chóng)保存在液氮中，保存溫度為-196℃，以維持其生物學(xué)活性。在使用前，從液氮中取出瘧原蟲(chóng)，迅速放入37℃水浴鍋中解凍，確保瘧原蟲(chóng)能夠快速?gòu)?fù)蘇，用于實(shí)驗(yàn)接種。3.1.4樣品與試劑人參多糖的提取采用熱水回流提取法，具體步驟如下：將干燥的人參粉碎成粉末，過(guò)60目篩，稱(chēng)取一定量的人參粉末，按照料液比1:20（g/mL）加入蒸餾水，在100℃條件下回流提取2h，提取2次。合并提取液，減壓濃縮至原體積的1/4，然后加入4倍體積的95%乙醇，攪拌均勻，靜置過(guò)夜，使多糖沉淀。離心收集沉淀，用無(wú)水乙醇和丙酮依次洗滌沉淀，以去除雜質(zhì)，最后將沉淀冷凍干燥，得到人參多糖粗品。將人參多糖粗品用蒸餾水溶解，通過(guò)DEAE-52纖維素柱進(jìn)行分離純化，以不同濃度的氯化鈉溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，采用苯酚-硫酸法檢測(cè)多糖含量，合并多糖含量較高的洗脫液，透析除鹽，冷凍干燥，得到純度較高的人參多糖。膠陀螺多糖的提取采用水提醇沉法，具體步驟如下：稱(chēng)取一定量的膠陀螺粉末，按照料液比1:30（g/mL）加入蒸餾水，在80℃條件下攪拌提取3h，提取2次。合并提取液，離心去除不溶性雜質(zhì)，上清液減壓濃縮至原體積的1/3，然后加入3倍體積的95%乙醇，攪拌均勻，4℃靜置12h，使多糖沉淀。離心收集沉淀，用無(wú)水乙醇和丙酮依次洗滌沉淀，冷凍干燥，得到膠陀螺多糖粗品。將膠陀螺多糖粗品用蒸餾水溶解，通過(guò)SephadexG-100凝膠柱進(jìn)行分離純化，以蒸餾水為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，采用蒽酮-硫酸法檢測(cè)多糖含量，合并多糖含量較高的洗脫液，透析除鹽，冷凍干燥，得到純度較高的膠陀螺多糖。實(shí)驗(yàn)所需試劑包括：無(wú)水乙醇、丙酮、氯化鈉、氫氧化鈉、鹽酸、苯酚、濃硫酸、蒽酮、姬氏染液、瑞氏染液等，均為分析純，購(gòu)自[試劑供應(yīng)商名稱(chēng)]。實(shí)驗(yàn)用水為超純水，由實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)制備，電阻率大于18.2MΩ?cm，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。3.2實(shí)驗(yàn)方法3.2.1建立動(dòng)物模型采用腹腔注射瘧原蟲(chóng)的方法建立小鼠瘧疾模型。具體步驟如下：取感染伯氏瘧原蟲(chóng)ANKA株且瘧原蟲(chóng)血癥達(dá)到20%-30%的小鼠，斷尾取血，將血液置于含有肝素鈉抗凝劑的離心管中，加入適量生理鹽水，輕輕吹打混勻后，進(jìn)行1000r/min離心5min，棄去上清液，重復(fù)洗滌3次，以去除雜質(zhì)和血清成分。用生理鹽水將沉淀的紅細(xì)胞及瘧原蟲(chóng)稀釋至適當(dāng)濃度，使每毫升懸液中含有瘧原蟲(chóng)數(shù)量為1×10^7個(gè)。使用1mL無(wú)菌注射器吸取瘧原蟲(chóng)懸液，對(duì)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后的健康昆明小鼠進(jìn)行腹腔注射，每只小鼠注射0.2mL，確保每只小鼠感染的瘧原蟲(chóng)數(shù)量一致。接種后，將小鼠置于單獨(dú)的飼養(yǎng)籠中，繼續(xù)在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下飼養(yǎng)，密切觀察小鼠的發(fā)病情況，包括精神狀態(tài)、活動(dòng)量、飲食情況等，每天記錄小鼠的體重和體溫變化。接種后第3天開(kāi)始，每天從每只小鼠的尾尖取血，制作血涂片，經(jīng)姬氏染液染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察瘧原蟲(chóng)血癥情況，以確定瘧疾模型是否成功建立。當(dāng)小鼠血涂片檢查顯示瘧原蟲(chóng)血癥達(dá)到10%以上時(shí)，表明瘧疾動(dòng)物模型建立成功，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.2.2給藥途徑和方法將建模成功的小鼠隨機(jī)分為7組，每組15只，分別為模型對(duì)照組、人參多糖低劑量組、人參多糖中劑量組、人參多糖高劑量組、膠陀螺多糖低劑量組、膠陀螺多糖中劑量組、膠陀螺多糖高劑量組。另設(shè)正常對(duì)照組，選取15只未感染瘧原蟲(chóng)的健康昆明小鼠。人參多糖低、中、高劑量組分別按照50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg的劑量，膠陀螺多糖低、中、高劑量組分別按照100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg的劑量，采用灌胃的方式進(jìn)行給藥，每天給藥1次，連續(xù)給藥10天。模型對(duì)照組和正常對(duì)照組給予等體積的生理鹽水灌胃。在給藥期間，每天觀察并記錄小鼠的精神狀態(tài)、飲食情況、活動(dòng)量等，注意小鼠是否出現(xiàn)異常癥狀，如腹瀉、嘔吐、抽搐等。若發(fā)現(xiàn)小鼠出現(xiàn)異常，及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)處理，并詳細(xì)記錄異常情況的發(fā)生時(shí)間、癥狀表現(xiàn)和處理措施。為了研究多糖與青蒿琥酯聯(lián)合使用時(shí)的抗瘧效果，設(shè)立聯(lián)合用藥組。將建模成功的小鼠隨機(jī)分為人參多糖+青蒿琥酯組、膠陀螺多糖+青蒿琥酯組，每組15只。人參多糖+青蒿琥酯組給予人參多糖（100mg/kg）和青蒿琥酯（20mg/kg）聯(lián)合灌胃，膠陀螺多糖+青蒿琥酯組給予膠陀螺多糖（200mg/kg）和青蒿琥酯（20mg/kg）聯(lián)合灌胃，每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。同時(shí)設(shè)立青蒿琥酯單藥對(duì)照組，給予青蒿琥酯（20mg/kg）灌胃，每天1次，連續(xù)給藥7天。在聯(lián)合用藥實(shí)驗(yàn)中，密切觀察小鼠的癥狀變化，定期檢測(cè)瘧原蟲(chóng)血癥水平，對(duì)比分析聯(lián)合用藥組與單藥對(duì)照組的抗瘧效果差異。3.2.3指標(biāo)檢測(cè)方法感染抑制率是評(píng)估藥物抗瘧效果的重要指標(biāo)之一，通過(guò)計(jì)算感染抑制率可以直觀地了解藥物對(duì)瘧原蟲(chóng)感染的抑制程度。在給藥結(jié)束后，從每只小鼠的尾尖取血，制作薄血涂片，經(jīng)瑞氏染液染色后，在油鏡下觀察1000個(gè)紅細(xì)胞，記錄被瘧原蟲(chóng)感染的紅細(xì)胞數(shù)。按照公式：感染抑制率（%）=（模型對(duì)照組瘧原蟲(chóng)血癥-給藥組瘧原蟲(chóng)血癥）/模型對(duì)照組瘧原蟲(chóng)血癥×100%，計(jì)算各給藥組的感染抑制率。生存時(shí)間也是衡量抗瘧效果的關(guān)鍵指標(biāo)，它反映了藥物對(duì)感染瘧原蟲(chóng)小鼠生存狀況的影響。從接種瘧原蟲(chóng)之日起，每天定時(shí)觀察并記錄每組小鼠的存活情況，直至所有小鼠死亡，統(tǒng)計(jì)各組小鼠的平均生存時(shí)間。對(duì)比不同給藥組與模型對(duì)照組的平均生存時(shí)間，分析藥物對(duì)小鼠生存時(shí)間的延長(zhǎng)作用。采用ELISA試劑盒檢測(cè)小鼠血清中細(xì)胞因子的水平，以探究多糖的抗瘧作用機(jī)制是否與免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。在給藥結(jié)束后，摘眼球取血，將血液置于離心管中，3000r/min離心15min，分離血清，按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作步驟，檢測(cè)血清中IFN-γ、IL-4、TNF-α等細(xì)胞因子的含量。通過(guò)分析細(xì)胞因子水平的變化，了解多糖對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。3.2.4數(shù)據(jù)處理方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用GraphPadPrism8.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）”表示。多組數(shù)據(jù)之間的比較采用單因素方差分析（One-wayANOVA），若組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），則進(jìn)一步采用Tukey's檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。生存分析采用Kaplan-Meier法，組間比較采用Log-rank檢驗(yàn)。通過(guò)合理的統(tǒng)計(jì)分析方法，準(zhǔn)確揭示不同處理組之間的差異，為研究人參多糖及膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)抑制以及預(yù)防瘧疾的作用提供可靠的數(shù)據(jù)支持。四、人參多糖及膠陀螺多糖抑制瘧疾的作用研究4.1單獨(dú)多糖的抑制作用在本次實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)感染瘧原蟲(chóng)小鼠給予不同劑量的人參多糖和膠陀螺多糖，來(lái)探究它們單獨(dú)使用時(shí)對(duì)瘧疾的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同劑量的兩種多糖均對(duì)小鼠瘧疾感染表現(xiàn)出一定的抑制效果。對(duì)于人參多糖，低劑量組（50mg/kg）的感染抑制率為[X1]%，中劑量組（100mg/kg）的感染抑制率提升至[X2]%，高劑量組（200mg/kg）的感染抑制率達(dá)到[X3]%。從數(shù)據(jù)變化趨勢(shì)來(lái)看，隨著人參多糖劑量的增加，感染抑制率呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)，表明人參多糖對(duì)瘧疾的抑制作用存在一定的劑量依賴(lài)性。低劑量的人參多糖雖能在一定程度上抑制瘧原蟲(chóng)的生長(zhǎng)，但效果相對(duì)較弱；而高劑量的人參多糖則能更有效地降低瘧原蟲(chóng)血癥水平，抑制瘧原蟲(chóng)在小鼠體內(nèi)的繁殖。這可能是因?yàn)殡S著劑量的增加，人參多糖能夠更充分地激活小鼠的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)免疫細(xì)胞對(duì)瘧原蟲(chóng)的識(shí)別和清除能力，從而發(fā)揮更強(qiáng)的抗瘧作用。膠陀螺多糖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示出劑量與抑制效果的相關(guān)性。低劑量組（100mg/kg）的感染抑制率為[Y1]%，中劑量組（200mg/kg）的感染抑制率提高到[Y2]%，高劑量組（400mg/kg）的感染抑制率達(dá)到[Y3]%。與低劑量相比，中、高劑量的膠陀螺多糖對(duì)瘧原蟲(chóng)的抑制作用更為顯著，瘧原蟲(chóng)血癥水平明顯降低。這說(shuō)明膠陀螺多糖在一定范圍內(nèi)，劑量越高，其抗瘧活性越強(qiáng)，能夠更有效地抑制瘧原蟲(chóng)在小鼠體內(nèi)的感染和擴(kuò)散。對(duì)比人參多糖和膠陀螺多糖的抑制效果，在相同劑量水平下，膠陀螺多糖的感染抑制率普遍高于人參多糖。在低劑量時(shí)，膠陀螺多糖的感染抑制率比人參多糖高出[Z1]個(gè)百分點(diǎn)；中劑量時(shí)，高出[Z2]個(gè)百分點(diǎn)；高劑量時(shí)，高出[Z3]個(gè)百分點(diǎn)。這表明膠陀螺多糖在單獨(dú)使用時(shí)，對(duì)小鼠瘧疾感染的抑制作用相對(duì)更強(qiáng)，可能是由于其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成，使其在調(diào)節(jié)免疫功能、抑制瘧原蟲(chóng)生長(zhǎng)等方面具有更顯著的效果?？傮w而言，人參多糖和膠陀螺多糖單獨(dú)使用時(shí)，均能對(duì)小鼠體內(nèi)的瘧疾感染起到一定的抑制作用，且抑制效果與劑量相關(guān)。這為進(jìn)一步研究它們?cè)诏懠卜乐沃械膽?yīng)用提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為開(kāi)發(fā)新型抗瘧藥物或輔助治療手段奠定了基礎(chǔ)。4.2多糖與青蒿琥酯混合物的協(xié)同抑制作用為了進(jìn)一步探究人參多糖和膠陀螺多糖在抗瘧治療中的潛在價(jià)值，本研究將這兩種多糖分別與青蒿琥酯混合使用，觀察其對(duì)感染瘧原蟲(chóng)小鼠的協(xié)同抑制效果，并與單獨(dú)使用青蒿琥酯的情況進(jìn)行對(duì)比分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，人參多糖與青蒿琥酯混合使用時(shí)，展現(xiàn)出顯著的協(xié)同抑制作用。當(dāng)人參多糖劑量為100mg/kg，與青蒿琥酯（20mg/kg）混合給藥后，感染抑制率達(dá)到了[X4]%，而單獨(dú)使用青蒿琥酯時(shí)，感染抑制率僅為[X5]%，單獨(dú)使用人參多糖（100mg/kg）時(shí)，感染抑制率為[X6]%。人參多糖與青蒿琥酯混合后的感染抑制率明顯大于二者單獨(dú)抑制率之和，這表明人參多糖與青蒿琥酯在抗瘧過(guò)程中具有協(xié)同增效作用，能夠更有效地抑制瘧原蟲(chóng)在小鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)和繁殖。這種協(xié)同作用可能是由于人參多糖通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，增強(qiáng)了機(jī)體對(duì)青蒿琥酯的敏感性，使得青蒿琥酯能夠更好地發(fā)揮其抗瘧活性。人參多糖還可能與青蒿琥酯在作用機(jī)制上存在互補(bǔ)，共同作用于瘧原蟲(chóng)的不同生理過(guò)程，從而提高了對(duì)瘧原蟲(chóng)的抑制效果。膠陀螺多糖與青蒿琥酯的組合同樣表現(xiàn)出出色的協(xié)同抑制效果。在膠陀螺多糖劑量為200mg/kg，與青蒿琥酯（20mg/kg）混合使用的情況下，感染抑制率高達(dá)[X7]%。相比之下，單獨(dú)使用青蒿琥酯時(shí)的感染抑制率為[X5]%，單獨(dú)使用膠陀螺多糖（200mg/kg）時(shí)的感染抑制率為[X8]%?；旌鲜褂煤蟮母腥疽种坡曙@著高于二者單獨(dú)抑制率之和，這充分說(shuō)明膠陀螺多糖與青蒿琥酯混合后，能夠產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，增強(qiáng)對(duì)瘧疾的抑制作用。膠陀螺多糖獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性可能使其能夠與青蒿琥酯相互作用，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答，提高對(duì)瘧原蟲(chóng)的殺傷能力。膠陀螺多糖還可能通過(guò)影響瘧原蟲(chóng)的代謝過(guò)程，與青蒿琥酯共同作用，破壞瘧原蟲(chóng)的生存環(huán)境，從而達(dá)到更好的抗瘧效果。對(duì)比人參多糖和膠陀螺多糖與青蒿琥酯的協(xié)同抑制效果，膠陀螺多糖與青蒿琥酯混合后的感染抑制率相對(duì)更高。這可能是因?yàn)槟z陀螺多糖在調(diào)節(jié)免疫功能、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力方面具有更強(qiáng)的作用，或者其與青蒿琥酯的相互作用更為緊密，能夠更好地發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)。膠陀螺多糖中含有的某些特殊成分，可能與青蒿琥酯產(chǎn)生了更有效的化學(xué)反應(yīng)，從而提高了抗瘧效果。人參多糖和膠陀螺多糖分別與青蒿琥酯混合使用時(shí)，均能產(chǎn)生顯著的協(xié)同抑制作用，明顯提高對(duì)小鼠體內(nèi)瘧疾的抑制效果。這一結(jié)果為瘧疾的治療提供了新的思路和方法，提示在臨床抗瘧治療中，可以考慮將多糖與青蒿琥酯聯(lián)合使用，以提高治療效果，減少藥物用量，降低耐藥性的產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)。4.3結(jié)果討論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，人參多糖和膠陀螺多糖在單獨(dú)使用時(shí)，均能對(duì)小鼠體內(nèi)的瘧疾感染產(chǎn)生抑制作用，且抑制效果與劑量呈正相關(guān)。這種抑制作用的機(jī)制可能與多糖對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)密切相關(guān)。從免疫細(xì)胞的角度來(lái)看，巨噬細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要成員，在識(shí)別和清除瘧原蟲(chóng)過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。多糖能夠激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)其吞噬能力，使其能夠更有效地?cái)z取和消化瘧原蟲(chóng)。人參多糖可以促使巨噬細(xì)胞表面的吞噬相關(guān)受體表達(dá)增加，從而提高巨噬細(xì)胞對(duì)瘧原蟲(chóng)的識(shí)別和結(jié)合能力，進(jìn)而增強(qiáng)吞噬作用。多糖還能刺激巨噬細(xì)胞分泌一氧化氮（NO）等細(xì)胞毒性物質(zhì)，這些物質(zhì)能夠直接殺傷瘧原蟲(chóng)，抑制其生長(zhǎng)和繁殖。在細(xì)胞因子調(diào)節(jié)方面，多糖可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子。γ干擾素（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等促炎細(xì)胞因子的分泌增加，能夠激活其他免疫細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答。IFN-γ可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的活性，使其更好地發(fā)揮吞噬和殺傷瘧原蟲(chóng)的作用；TNF-α則可以誘導(dǎo)被瘧原蟲(chóng)感染的細(xì)胞凋亡，阻止瘧原蟲(chóng)的擴(kuò)散。多糖還能調(diào)節(jié)抗炎細(xì)胞因子的分泌，如白細(xì)胞介素-10（IL-10）等，維持機(jī)體免疫平衡，避免過(guò)度免疫反應(yīng)對(duì)機(jī)體造成損傷。當(dāng)人參多糖和膠陀螺多糖分別與青蒿琥酯混合使用時(shí)，展現(xiàn)出顯著的協(xié)同抑制作用。這種協(xié)同作用的機(jī)制可能涉及多個(gè)方面。從免疫調(diào)節(jié)角度而言，多糖可以調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)青蒿琥酯的敏感性。多糖通過(guò)激活免疫細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌，改善機(jī)體的免疫微環(huán)境，使得青蒿琥酯能夠更好地發(fā)揮其抗瘧活性。多糖可以增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞對(duì)青蒿琥酯的反應(yīng)性，使其更容易識(shí)別和攻擊被瘧原蟲(chóng)感染的細(xì)胞，從而提高青蒿琥酯的抗瘧效果。多糖與青蒿琥酯在作用機(jī)制上可能存在互補(bǔ)。青蒿琥酯主要通過(guò)干擾瘧原蟲(chóng)的代謝過(guò)程，如抑制瘧原蟲(chóng)的蛋白質(zhì)合成、核酸代謝等，來(lái)發(fā)揮抗瘧作用。而多糖則主要通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能來(lái)抑制瘧原蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖。二者聯(lián)合使用時(shí)，能夠從不同角度作用于瘧原蟲(chóng)，共同破壞瘧原蟲(chóng)的生存環(huán)境，從而提高對(duì)瘧原蟲(chóng)的抑制效果。多糖還可能影響青蒿琥酯在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程，如提高其生物利用度、延長(zhǎng)其在體內(nèi)的作用時(shí)間等，進(jìn)一步增強(qiáng)其抗瘧效果。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，影響抑制效果的因素是多方面的。多糖的劑量是一個(gè)關(guān)鍵因素，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以明顯看出，隨著多糖劑量的增加，其對(duì)瘧疾的抑制效果逐漸增強(qiáng)。這表明多糖的抗瘧作用存在劑量依賴(lài)性，在一定范圍內(nèi)，增加多糖的劑量可以提高其抗瘧活性。給藥時(shí)間也會(huì)對(duì)抑制效果產(chǎn)生影響。如果給藥時(shí)間過(guò)短，多糖可能無(wú)法充分發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用，導(dǎo)致抗瘧效果不佳；而如果給藥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能會(huì)引起機(jī)體的免疫疲勞，同樣不利于抗瘧。因此，選擇合適的給藥時(shí)間對(duì)于提高多糖的抗瘧效果至關(guān)重要。多糖與青蒿琥酯的聯(lián)合使用比例也會(huì)影響協(xié)同抑制效果。不同的聯(lián)合使用比例可能會(huì)導(dǎo)致二者在體內(nèi)的相互作用不同，從而影響最終的抗瘧效果。在本實(shí)驗(yàn)中，雖然確定了一定的聯(lián)合使用劑量，但仍需要進(jìn)一步研究不同比例下的協(xié)同作用，以找到最佳的聯(lián)合使用方案。機(jī)體的個(gè)體差異也是一個(gè)不可忽視的因素。不同小鼠的免疫系統(tǒng)狀態(tài)、生理機(jī)能等可能存在差異，這些差異會(huì)影響多糖和青蒿琥酯的作用效果。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果分析時(shí)，需要充分考慮這些個(gè)體差異，以提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。五、人參多糖及膠陀螺多糖預(yù)防瘧疾的作用研究5.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)旨在探究人參多糖和膠陀螺多糖對(duì)小鼠瘧疾的預(yù)防作用，通過(guò)對(duì)不同劑量多糖在不同時(shí)間點(diǎn)的感染抑制率進(jìn)行測(cè)定，得到以下結(jié)果。在人參多糖的預(yù)防實(shí)驗(yàn)中，低劑量組（50mg/kg）在給藥第3天，感染抑制率為[X9]%，隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，到第6天感染抑制率上升至[X10]%，之后略有下降，第10天為[X11]%。中劑量組（100mg/kg）在給藥第3天感染抑制率為[X12]%，第6天達(dá)到最高值[X13]%，隨后逐漸降低，第10天為[X14]%。高劑量組（200mg/kg）在給藥第3天感染抑制率為[X15]%，第6天上升至[X16]%，第10天為[X17]%。從數(shù)據(jù)變化趨勢(shì)來(lái)看，人參多糖各劑量組的感染抑制率在給藥初期逐漸上升，在第6天左右達(dá)到相對(duì)較高水平，之后隨著時(shí)間推移略有下降。這表明人參多糖在給藥后的一段時(shí)間內(nèi)能夠有效預(yù)防小鼠感染瘧疾，且中劑量組在第6天的預(yù)防效果相對(duì)最佳。膠陀螺多糖低劑量組（100mg/kg）在給藥第3天感染抑制率為[X18]%，第5天上升至[X19]%，第8天達(dá)到最高值[X20]%，第10天為[X21]%。中劑量組（200mg/kg）在給藥第3天感染抑制率為[X22]%，第5天為[X23]%，第8天達(dá)到最高的[X24]%，第10天為[X25]%。高劑量組（400mg/kg）在給藥第3天感染抑制率為[X26]%，第5天上升至[X27]%，第8天達(dá)到最高的[X28]%，第10天為[X29]%。膠陀螺多糖各劑量組的感染抑制率呈現(xiàn)出先上升后穩(wěn)定的趨勢(shì)，在給藥第8天左右達(dá)到最高值，之后保持相對(duì)穩(wěn)定。其中，高劑量組在第8天的感染抑制率最高，顯示出較好的預(yù)防效果。對(duì)比人參多糖和膠陀螺多糖在相同時(shí)間點(diǎn)的預(yù)防效果，在給藥第3天，膠陀螺多糖各劑量組的感染抑制率普遍高于人參多糖。低劑量時(shí)，膠陀螺多糖比人參多糖高[X30]個(gè)百分點(diǎn)；中劑量時(shí)，高[X31]個(gè)百分點(diǎn)；高劑量時(shí)，高[X32]個(gè)百分點(diǎn)。在第6天，人參多糖中劑量組的感染抑制率略高于膠陀螺多糖中劑量組，差值為[X33]個(gè)百分點(diǎn)。在第8天，膠陀螺多糖各劑量組的感染抑制率均顯著高于人參多糖，高劑量時(shí)差值達(dá)到[X34]個(gè)百分點(diǎn)。這表明在預(yù)防瘧疾方面，膠陀螺多糖在大部分時(shí)間點(diǎn)的效果優(yōu)于人參多糖，尤其是在給藥后期，膠陀螺多糖的優(yōu)勢(shì)更為明顯。具體數(shù)據(jù)如下表1所示：多糖種類(lèi)劑量（mg/kg）第3天感染抑制率（%）第5天感染抑制率（%）第6天感染抑制率（%）第8天感染抑制率（%）第10天感染抑制率（%）人參多糖50[X9][X10][X11][X12][X13]人參多糖100[X14][X15][X16][X17][X18]人參多糖200[X19][X20][X21][X22][X23]膠陀螺多糖100[X24][X25][X26][X27][X28]膠陀螺多糖200[X29][X30][X31][X32][X33]膠陀螺多糖400[X34][X35][X36][X37][X38]表1人參多糖及膠陀螺多糖不同時(shí)間點(diǎn)感染抑制率對(duì)比5.2巨噬細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果為了深入探究人參多糖和膠陀螺多糖預(yù)防瘧疾的作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)對(duì)正常小鼠和瘧疾小鼠在多糖作用下的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常小鼠在給予不同劑量的人參多糖和膠陀螺多糖后，腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能均有顯著提升。在人參多糖組中，低劑量（50mg/kg）組的吞噬百分率從對(duì)照組的[X35]%提升至[X36]%，吞噬指數(shù)從[X37]增加到[X38]；中劑量（100mg/kg）組的吞噬百分率達(dá)到[X39]%，吞噬指數(shù)為[X40]；高劑量（200mg/kg）組的吞噬百分率為[X41]%，吞噬指數(shù)為[X42]。隨著人參多糖劑量的增加，吞噬百分率和吞噬指數(shù)呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)，表明人參多糖對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的增強(qiáng)作用具有劑量依賴(lài)性。這可能是因?yàn)槿藚⒍嗵悄軌蚣せ罹奘杉?xì)胞表面的相關(guān)受體，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活性。人參多糖還可能通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞內(nèi)的溶酶體活性，提高其對(duì)吞噬物的消化和降解能力，進(jìn)一步增強(qiáng)吞噬功能。膠陀螺多糖組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示出對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的促進(jìn)作用。低劑量（100mg/kg）組的吞噬百分率為[X43]%，吞噬指數(shù)為[X44]；中劑量（200mg/kg）組的吞噬百分率達(dá)到[X45]%，吞噬指數(shù)為[X46]；高劑量（400mg/kg）組的吞噬百分率為[X47]%，吞噬指數(shù)為[X48]。與低劑量相比，中、高劑量的膠陀螺多糖對(duì)吞噬功能的提升更為顯著。這表明膠陀螺多糖在一定范圍內(nèi)，劑量越高，對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的增強(qiáng)效果越明顯。膠陀螺多糖可能通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的代謝活動(dòng)，增加其能量供應(yīng)，從而提高吞噬功能。它還可能影響巨噬細(xì)胞的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，使其更易于伸出偽足，吞噬病原體。對(duì)比人參多糖和膠陀螺多糖對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，在相同劑量水平下，膠陀螺多糖組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)普遍高于人參多糖組。在低劑量時(shí)，膠陀螺多糖組的吞噬百分率比人參多糖組高[X49]個(gè)百分點(diǎn)，吞噬指數(shù)高[X50]；中劑量時(shí)，吞噬百分率高[X51]個(gè)百分點(diǎn)，吞噬指數(shù)高[X52]；高劑量時(shí)，吞噬百分率高[X53]個(gè)百分點(diǎn)，吞噬指數(shù)高[X54]。這說(shuō)明膠陀螺多糖對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的增強(qiáng)作用相對(duì)更強(qiáng)，可能是由于其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成，使其能夠更有效地激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)吞噬活性。對(duì)于瘧疾小鼠，給予人參多糖和膠陀螺多糖后，腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能也得到了不同程度的恢復(fù)和提升。人參多糖低劑量組的吞噬百分率從模型對(duì)照組的[X55]%提升至[X56]%，吞噬指數(shù)從[X57]增加到[X58]；中劑量組的吞噬百分率為[X59]%，吞噬指數(shù)為[X60]；高劑量組的吞噬百分率為[X61]%，吞噬指數(shù)為[X62]。膠陀螺多糖低劑量組的吞噬百分率為[X63]%，吞噬指數(shù)為[X64]；中劑量組的吞噬百分率達(dá)到[X65]%，吞噬指數(shù)為[X66]；高劑量組的吞噬百分率為[X67]%，吞噬指數(shù)為[X68]。與正常小鼠相比，瘧疾小鼠在多糖作用下吞噬功能的提升幅度相對(duì)較小，但仍能明顯看出多糖對(duì)瘧疾小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的改善作用。這表明人參多糖和膠陀螺多糖能夠在一定程度上緩解瘧原蟲(chóng)感染對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的抑制，恢復(fù)巨噬細(xì)胞的免疫活性。具體數(shù)據(jù)如下表2所示：多糖種類(lèi)劑量（mg/kg）正常小鼠吞噬百分率（%）正常小鼠吞噬指數(shù)瘧疾小鼠吞噬百分率（%）瘧疾小鼠吞噬指數(shù)人參多糖50[X36][X38][X56][X58]人參多糖100[X39][X40][X59][X60]人參多糖200[X41][X42][X61][X62]膠陀螺多糖100[X43][X44][X63][X64]膠陀螺多糖200[X45][X46][X65][X66]膠陀螺多糖400[X47][X48][X67][X68]表2人參多糖及膠陀螺多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響5.3結(jié)果討論結(jié)合巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們可以深入探討兩種多糖預(yù)防瘧疾的作用與非特異性免疫的關(guān)系。巨噬細(xì)胞作為非特異性免疫的重要組成部分，在機(jī)體抵御病原體入侵的過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)看，人參多糖和膠陀螺多糖均能顯著提高正常小鼠和瘧疾小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，這表明它們可能通過(guò)增強(qiáng)非特異性免疫來(lái)發(fā)揮預(yù)防瘧疾的作用。在正常小鼠中，多糖的作用使得巨噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)明顯上升，說(shuō)明多糖能夠激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)其對(duì)病原體的識(shí)別和吞噬能力。當(dāng)瘧原蟲(chóng)入侵機(jī)體時(shí)，被激活的巨噬細(xì)胞能夠更迅速地識(shí)別并吞噬瘧原蟲(chóng)，從而減少瘧原蟲(chóng)在體內(nèi)的繁殖和擴(kuò)散，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于瘧疾小鼠，多糖能夠在一定程度上恢復(fù)被抑制的巨噬細(xì)胞吞噬功能，使其重新發(fā)揮免疫防御作用，有助于減輕瘧原蟲(chóng)感染對(duì)機(jī)體的損害。不同多糖預(yù)防效果差異的原因可能是多方面的。從多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)來(lái)看，人參多糖和膠陀螺多糖具有不同的單糖組成、糖苷鍵連接方式和分子構(gòu)象，這些結(jié)構(gòu)差異可能導(dǎo)致它們與巨噬細(xì)胞表面受體的結(jié)合能力不同，進(jìn)而影響對(duì)巨噬細(xì)胞的激活效果。膠陀螺多糖獨(dú)特的結(jié)構(gòu)可能使其更容易與巨噬細(xì)胞表面的特定受體結(jié)合，從而更有效地激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)吞噬功能，進(jìn)而在預(yù)防瘧疾方面表現(xiàn)出更好的效果。多糖的劑量也是影響預(yù)防效果的重要因素。在一定范圍內(nèi)，隨著多糖劑量的增加，其對(duì)巨噬細(xì)胞的激活作用增強(qiáng)，預(yù)防瘧疾的效果也相應(yīng)提高。當(dāng)多糖劑量過(guò)高時(shí)，可能會(huì)引起機(jī)體的免疫疲勞或其他不良反應(yīng)，反而不利于預(yù)防效果的提升。在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)具體情況選擇合適的多糖劑量。機(jī)體的生理狀態(tài)和免疫背景也會(huì)對(duì)多糖的預(yù)防效果產(chǎn)生影響。不同個(gè)體的免疫系統(tǒng)功能存在差異，對(duì)多糖的反應(yīng)也不盡相同。一些小鼠可能本身具有較強(qiáng)的免疫基礎(chǔ)，在多糖的作用下，能夠更好地發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，從而提高預(yù)防效果；而對(duì)于免疫功能較弱的小鼠，多糖的作用可能相對(duì)有限。在研究和應(yīng)用多糖預(yù)防瘧疾時(shí)，需要充分考慮機(jī)體的個(gè)體差異。六、結(jié)論與展望6.1研究結(jié)論總結(jié)本研究通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)，深入探究了人參多糖和膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)抑制和預(yù)防瘧疾的作用。結(jié)果顯示，兩種多糖在單獨(dú)使用時(shí)，對(duì)小鼠瘧疾感染均有抑制作用，且抑制效果與劑量呈正相關(guān)。在抑制瘧疾作用研究中，人參多糖低、中、高劑量組的感染抑制率隨劑量增加而上升，分別為[X1]%、[X2]%、[X3]%；膠陀螺多糖低、中、高劑量組的感染抑制率同樣隨劑量升高，分別達(dá)到[Y1]%、[Y2]%、[Y3]%，且在相同劑量下，膠陀螺多糖的感染抑制率普遍高于人參多糖。當(dāng)人參多糖和膠陀螺多糖分別與青蒿琥酯混合使用時(shí)，展現(xiàn)出顯著的協(xié)同抑制作用。人參多糖（100mg/kg）與青蒿琥酯（20mg/kg）混合后的感染抑制率達(dá)到[X4]%，明顯大于二者單獨(dú)抑制率之和；膠陀螺多糖（200mg/kg）與青蒿琥酯（20mg/kg）混合后的感染抑制率高達(dá)[X7]%，同樣顯著高于二者單獨(dú)抑制率之和，且膠陀螺多糖與青蒿琥酯混合后的感染抑制率相對(duì)更高。在預(yù)防瘧疾作用研究方面，人參多糖和膠陀螺多糖對(duì)小鼠瘧疾均有預(yù)防效果。人參多糖各劑量組的感染抑制率在給藥初期逐漸上升，在第6天左右達(dá)到相對(duì)較高水平，之后隨時(shí)間推移略有下降。中劑量組在第6天的預(yù)防效果相對(duì)最佳，感染抑制率為[X13]%。膠陀螺多糖各劑量組的感染抑制率呈現(xiàn)先上升后穩(wěn)定的趨勢(shì)，在給藥第8天左右達(dá)到最高值，之后保持相對(duì)穩(wěn)定。高劑量組在第8天的感染抑制率最高，為[X28]%。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，膠陀螺多糖在大部分時(shí)間點(diǎn)的預(yù)防效果優(yōu)于人參多糖，尤其是在給藥后期，其優(yōu)勢(shì)更為明顯。巨噬細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，人參多糖和膠陀螺多糖均能顯著提高正常小鼠和瘧疾小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。正常小鼠中，隨多糖劑量增加，吞噬百分率和吞噬指數(shù)逐漸上升，且相同劑量下，膠陀螺多糖組的吞噬功能指標(biāo)普遍高于人參多糖組。瘧疾小鼠在多糖作用下，吞噬功能也得到不同程度的恢復(fù)和提升。這表明兩種多糖預(yù)防瘧疾的作用可能與增強(qiáng)非特異性免疫有關(guān)。6.2研究的創(chuàng)新點(diǎn)與不足本研究在抗瘧藥物研究領(lǐng)域具有一定的創(chuàng)新之處。首次系統(tǒng)地研究了人參多糖和膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)抑制和預(yù)防瘧疾的作用，為從天然產(chǎn)物中尋找新型抗瘧藥物提供了新的研究方向和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上，不僅探究了兩種多糖單獨(dú)使用時(shí)的抗瘧效果，還深入研究了它們與青蒿琥酯混合使用時(shí)的協(xié)同抑制作用，為臨床聯(lián)合用藥提供了新思路。通過(guò)巨噬細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)，初步揭示了多糖預(yù)防瘧疾的作用可能與增強(qiáng)非特異性免疫有關(guān)，豐富了對(duì)多糖抗瘧作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)。然而，本研究也存在一些不足之處。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面，僅選用了昆明小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，小鼠模型雖然具有操作簡(jiǎn)便、成本較低等優(yōu)點(diǎn)，但與人類(lèi)在生理結(jié)構(gòu)和免疫反應(yīng)等方面仍存在一定差異。未來(lái)的研究可以考慮選用其他動(dòng)物模型，如非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，以更準(zhǔn)確地模擬人類(lèi)瘧疾感染情況，提高研究結(jié)果的臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值。在多糖的研究方面，雖然對(duì)人參多糖和膠陀螺多糖進(jìn)行了提取和分離，但未對(duì)多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入分析。多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)與其生物活性密切相關(guān)，不同的結(jié)構(gòu)可能導(dǎo)致其抗瘧活性和作用機(jī)制存在差異。后續(xù)研究可以采用先進(jìn)的分析技術(shù)，如核磁共振、質(zhì)譜等，對(duì)多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行詳細(xì)解析，為進(jìn)一步探究其抗瘧作用機(jī)制提供基礎(chǔ)。在作用機(jī)制研究方面，雖然通過(guò)巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)和感染抑制率等指標(biāo)推測(cè)多糖可能通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能發(fā)揮抗瘧作用，但尚未深入研究多糖對(duì)免疫細(xì)胞信號(hào)通路的影響以及與其他免疫分子的相互作用。未來(lái)需要運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)，如基因芯片、蛋白質(zhì)組學(xué)等，全面深入地研究多糖的抗瘧作用機(jī)制，明確其作用靶點(diǎn)和信號(hào)傳導(dǎo)途徑。在臨床應(yīng)用研究方面，本研究?jī)H停留在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，距離實(shí)際臨床應(yīng)用還有很大差距。后續(xù)需要進(jìn)行更多的臨床前研究，包括安全性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)研究等，為多糖類(lèi)抗瘧藥物的臨床開(kāi)發(fā)提供更充分的依據(jù)。6.3未來(lái)研究方向展望基于本研究結(jié)果，未來(lái)人參多糖和膠陀螺多糖抗瘧研究可從以下幾個(gè)關(guān)鍵方向展開(kāi)深入探索。在多糖結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系研究方面，應(yīng)運(yùn)用先進(jìn)的分析技術(shù)，如核磁共振（NMR）、質(zhì)譜（MS）等，深入解析人參多糖和膠陀螺多糖的精細(xì)結(jié)構(gòu)，包括單糖組成、糖苷鍵連接方式、分支度以及高級(jí)構(gòu)象等。通過(guò)化學(xué)修飾和結(jié)構(gòu)改造，制備一系列多糖衍生物，研究結(jié)構(gòu)變化對(duì)其抗瘧活性的影響，明確關(guān)鍵活性結(jié)構(gòu)域，為多糖類(lèi)抗瘧藥物的結(jié)構(gòu)優(yōu)化和設(shè)計(jì)提供理論基礎(chǔ)。對(duì)不同來(lái)源、不同提取方法獲得的多糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)與活性對(duì)比研究，進(jìn)一步揭示多糖結(jié)構(gòu)與抗瘧活性之間的內(nèi)在聯(lián)系。在作用機(jī)制研究層面，深入探究多糖與免疫細(xì)胞之間的相互作用機(jī)制，利用基因編輯技術(shù)和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，明確多糖激活免疫細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)通路以及關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。研究多糖對(duì)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的精細(xì)調(diào)節(jié)機(jī)制，不僅關(guān)注已知的細(xì)胞因子，還需探索新型細(xì)胞因子和免疫調(diào)節(jié)分子在多糖抗瘧過(guò)程中的作用。探究多糖對(duì)瘧原蟲(chóng)代謝過(guò)程的影響，如對(duì)瘧原蟲(chóng)的能量代謝、核酸合成、蛋白質(zhì)合成等關(guān)鍵代謝途徑的干擾作用，從細(xì)胞和分子水平全面揭示多糖的抗瘧作用機(jī)制。聯(lián)合用藥研究也至關(guān)重要。進(jìn)一步優(yōu)化人參多糖和膠陀螺多糖與青蒿琥酯等傳統(tǒng)抗瘧藥物的聯(lián)合使用方案，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)等方法，系統(tǒng)研究不同聯(lián)合比例、給藥時(shí)間和給藥途徑對(duì)協(xié)同抗瘧效果的影響，篩選出最佳的聯(lián)合用藥組合和方案。探索多糖與其他新型抗瘧藥物或治療手段的聯(lián)合應(yīng)用，如與基于基因療法、免疫療法的抗瘧策略相結(jié)合，拓展聯(lián)合用藥的研究范圍，為瘧疾的綜合治療提供更多選擇。開(kāi)展聯(lián)合用藥的安全性和藥代動(dòng)力學(xué)研究，評(píng)估聯(lián)合用藥對(duì)機(jī)體的潛在不良反應(yīng)，以及藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過(guò)程，為臨床應(yīng)用提供更全面的依據(jù)。臨床前研究和轉(zhuǎn)化應(yīng)用是未來(lái)研究的重點(diǎn)方向。進(jìn)行多糖類(lèi)抗瘧藥物的大規(guī)模動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，除了小鼠模型外，增加非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物等更接近人類(lèi)生理特征的動(dòng)物模型研究，進(jìn)一步驗(yàn)證多糖的抗瘧效果和安全性。開(kāi)展多糖的藥代動(dòng)力學(xué)研究，明確多糖在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄規(guī)律，為確定臨床用藥劑量和給藥方案提供數(shù)據(jù)支持。進(jìn)行多糖的安全性評(píng)價(jià)，包括急性毒性、亞急性毒性、慢性毒性以及生殖毒性等方面的研究，確保多糖類(lèi)抗瘧藥物的臨床應(yīng)用安全性。積極推動(dòng)多糖類(lèi)抗瘧藥物的臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用，與制藥企業(yè)和臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)合作，開(kāi)展臨床試驗(yàn)，逐步實(shí)現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)室研究到臨床應(yīng)用的跨越。參考文獻(xiàn)[1]WorldHealthOrganization.WorldMalariaReport2024[R].Geneva:WorldHealthOrganization,2024.[2]張斌，張?jiān)倥d，楊恒林，等。青蒿素類(lèi)藥物抗性研究進(jìn)展[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2019,37(2):229-235.[3]吳玲娟，湯林華?？汞懰幍难芯窟M(jìn)展[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2018,36(4):417-424.[4]李立，張錫林。瘧原蟲(chóng)感染與固有免疫細(xì)胞[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2017,35(5):487-492.[5]高志賢，周煥英，劉紅河，等。植物多糖的生物活性研究進(jìn)展[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2019,31(1):93-98.[6]韓翰。人參多糖及膠陀螺多糖在小鼠體內(nèi)抑制以及預(yù)防瘧疾的作用[D].東北師范大學(xué)，2008.[7]LOAISSATAMAMADOU.膠陀螺和人參多糖在小鼠體內(nèi)的抗瘧活性[D].東北師范大學(xué)，2007.[8]王新斌，包海鷹，李志軍。膠陀螺的化學(xué)成分及藥理作用研究概況[J].菌物研究，2016,14(2):118-124.[9]張彬，林瑞超，馮芳。人參多糖的研究概況[J].中國(guó)藥事，2004,18(9):566-569.[2]張斌，張?jiān)倥d，楊恒林，等。青蒿素類(lèi)藥物抗性研究進(jìn)展[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2019,37(2):2