152022-01-25發(fā)布DB15/T2506—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定I羊捻轉(zhuǎn)血矛線蟲檢疫鑒定方法3.1捻轉(zhuǎn)血矛線蟲haemonchusc3.2可在宿主糞便中檢出捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵或能在宿主真胃內(nèi)檢出捻轉(zhuǎn)血矛線蟲成蟲，而宿主無明顯3.3捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病haemonchosisc宿主生活或來源于捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病流行區(qū)，且有采食被捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染性幼蟲污染的青草或飼4.2臨床表現(xiàn)1DB15/T2506—20224.3實驗室檢查4.3.1血常規(guī)檢查發(fā)現(xiàn)血中紅細胞總數(shù)5.2根據(jù)4.3.4和4.3.5中的任一條檢查結(jié)果可確切診斷。無明顯臨床癥狀，同時符合4.1和4.2，且符合4.3.1、4.3.2、4.3.6.2確診捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染疑似捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染，且符合4.3.4和4.3.52DB15/T2506—2022血矛線蟲屬線蟲的系統(tǒng)發(fā)育樹（HobergEP等,2004）），），），3DB15/T2506—2022捻轉(zhuǎn)血矛線蟲整個生活史包括自由生活期和寄生生活期。按照蟲卵孵化后的發(fā)育結(jié)構(gòu)可劃分為五階段。新排出的蟲卵在27℃條件下經(jīng)5d發(fā)育為第三期幼蟲，羊通過攝入第三期幼蟲而感染,在感染后4DB15/T2506—2022糞便中檢出的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵（40×)最小為65.5μm×43.3μm，最大為95.0μm×46.6μm。卵殼質(zhì)地均勻，厚約1.0μm。隨糞便剛排出糞便中檢出的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵（400×)見圖C.2。5DB15/T2506—2022捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染性三期幼蟲形態(tài)（40×)見圖D.1。腔有小管道通于食道的空隙，食道呈絲狀形。腸管由16個方形細胞所構(gòu)成，尾部尖細，長約0.054mm~6DB15/T2506—2022新鮮蟲體呈現(xiàn)為紅白色相互纏繞狀；鏡下陰門蓋異常明顯。雄蟲長1.5cm～2.C捻轉(zhuǎn)血矛線蟲成蟲頭部（100×)D捻轉(zhuǎn)血矛線蟲E捻轉(zhuǎn)血矛線蟲雌蟲陰門蓋（100×)F捻轉(zhuǎn)血矛7DB15/T2506—2022Bunostomumtrigonoceph8DB15/T2506—2022F.2捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染性幼蟲與羊其他圓線蟲的9DB15/T2506—2022取新鮮糞便樣品2g于50mL燒杯中，加少許飽和食鹽水用鑷子壓碎，加飽和食鹽水至20均勻，用40目篩網(wǎng)過濾，將濾液置于安剖瓶中，使液面略高于瓶口，靜置30取待檢羊新鮮糞便，置于干凈的搪瓷盤中，頂部稍高于搪瓷盤邊緣，其上蓋3層醫(yī)用紗布，蓋好搪DB15/T2506—2022對擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳，以陽性對照組和待檢樣本擴增出265bp的目標條帶，陰性對照組未擴增出條帶，判定為捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染陽性；陽性樣本進一步測序，序列與標準aaattgtaacattcctgaatgagttcttttatcatttgtataag