備案號：34644-2012水體中甲基睪丸酮的測定2012-06-04發(fā)布2012-09-15實施本標準按照GB/T1.1-2009的規(guī)定進行起草。本標準的附錄A為資料性附錄。本標準由廣東省海洋與漁業(yè)局提出。本標準由廣東省水產標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：中國水產科學研究院南海水產研究所、中山市漁農養(yǎng)殖科技開發(fā)加工園。本標準主要起草人：楊賢慶、鄧建朝、岑劍偉、吳燕燕、魏涯、黃卉、陳曼華。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法以二氯甲烷提取水體中殘留的甲基睪丸酮，提取液蒸發(fā)至近干后，用流動相溶解定容，經微孔濾4試劑4.2二氯甲烷。4.30.5%乙酸溶液：取0.5mL冰乙酸于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻。4.4甲基睪丸酮標準儲備液(200μg/mL):準確稱取甲基睪丸酮標準品(含量≥98%)10.0mg,用甲醇(4.1)溶解，定容于50mL容量瓶中，-18℃避光保存。4.5甲基睪丸酮標準工作液：準確吸取適量甲基睪丸酮標準儲備液(4.4),用甲醇(4.1)逐級稀釋5.2電子分析天平：感量0.0001g。5.3萃取振蕩儀。5.4旋轉蒸發(fā)器。6.2流動相組成：甲醇(4.1)+0.5%乙酸溶液(4.3)=77+23(V?+V?)。6.3流速：1.0mL/min。26.4柱溫：30℃。6.5檢測器：檢測波長254nm。7操作方法7.1樣品制備將水樣混合均勻，12h內測定；如不能立即測定，應放置于0℃~4℃冰箱中，48h內測定。7.2提取和凈化先將水樣用0.45μm膜過濾，除去固體雜質。準確移取100mL二氯甲烷，震搖5min,靜置分層，將二氯甲烷層移至100mL的梨形瓶。向分液漏斗加入30mL二氯甲烷重復上述步驟一次，靜置分層后，將二氯甲烷層并入同一梨形瓶，于45℃條件下減壓蒸發(fā)至近干。殘留物用1.0mL流動相溶解，取溶解液過0.45μm微孔濾膜，供液相色譜測定。7.3色譜分析將標準工作液和樣品提取液置于液相色譜儀進樣器中，按上述色譜條件進行色譜分析，記錄峰面積，響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內，根據標準品的保留時間定性，外標法定量。標準色譜圖參見附錄A中圖A.1。試樣中甲基睪丸酮的殘留量按照公式(1)計算，計算結果需扣除空白值，結果保留三位有效數字。式中：X——試樣中甲基睪丸酮含量，單位為微克每升(μg/L);Cs——標準溶液中甲基睪丸酮含量，單位為微克每毫升(μg/mL);A——試液峰面積響應值；As——標準溶液峰面積響應值；V——試液定容體積，單位為毫升(mL);V?——試樣體積，單位為毫升(mL)。9線性范圍10檢測限、精密度和回收率10.1檢測限3本方法的相對標準偏差≤10%。本方法甲基睪丸酮在1μg/L～25μg/L添加濃度范圍內，回收率≥70%。4(資料性附錄)