pcr技術(shù)試題及答案

一、單項選擇題(每題2分,共10題)1.PCR技術(shù)的中文全稱是(）A.聚合酶鏈式反應B.多聚酶鏈反應C.聚合酶鏈反應D.多聚酶鏈式反應2.PCR反應體系中不包含()A.引物B.dNTPC.限制性內(nèi)切酶D.Taq酶3.PCR技術(shù)的發(fā)明人是()A.穆利斯B.桑格C.沃森D.克里克4.PCR反應的基本步驟不包括()A.變性B.復性C.延伸D.轉(zhuǎn)錄5.用于PCR反應的引物長度一般為()A.5-10bpB.10-30bpC.30-50bpD.50-100bp6.Taq酶的最適反應溫度是()A.55℃B.72℃C.94℃D.37℃7.PCR反應中引物的作用是()A.提供模板B.提供能量C.引導DNA合成D.切割DNA8.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應所需的()A.Mg2+B.緩沖液C.核酸外切酶D.模板DNA9.進行PCR反應的儀器是()A.離心機B.移液器C.恒溫培養(yǎng)箱D.熱循環(huán)儀10.PCR技術(shù)可用于()A.基因診斷B.蛋白質(zhì)純化C.細胞培養(yǎng)D.病毒滅活二、多項選擇題(每題2分,共10題)1.下列屬于PCR技術(shù)特點的有(）A.特異性強B.靈敏度高C.快速D.操作簡單2.PCR反應體系包含的成分有()A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.緩沖液3.引物設計的原則包括()A.長度適宜B.GC含量合適C.避免引物二聚體D.與模板特異性結(jié)合4.PCR技術(shù)可應用于()A.基因克隆B.遺傳疾病診斷C.法醫(yī)鑒定D.微生物檢測5.影響PCR反應結(jié)果的因素有()A.模板質(zhì)量B.引物濃度C.反應溫度D.循環(huán)次數(shù)6.Taq酶的特點有()A.耐高溫B.具有5'-3'聚合酶活性C.具有3'-5'外切酶活性D.可用于PCR反應7.在PCR反應中,關于dNTP說法正確的是()A.是DNA合成的原料B.有四種類型C.濃度過高會抑制反應D.需等比例添加8.PCR技術(shù)的基本反應步驟包括()A.變性B.復性C.延伸D.退火9.進行PCR實驗時,需要用到的儀器有()A.移液器B.離心機C.熱循環(huán)儀D.紫外燈10.以下哪些情況可能導致PCR擴增失敗()A.模板降解B.引物設計不合理C.反應體系污染D.Taq酶失活三、判斷題(每題2分,共10題)1.PCR技術(shù)只能擴增已知序列的DNA片段。()2.Taq酶沒有3'-5'外切酶活性,所以PCR產(chǎn)物準確性相對較低。()3.引物濃度越高,PCR反應效果越好。()4.PCR反應的循環(huán)次數(shù)越多,擴增產(chǎn)物就一定越多。()5.進行PCR反應時,模板DNA的量越多越好。()6.只要引物與模板能結(jié)合,就可以進行有效的PCR擴增。(）7.不同來源的模板DNA進行PCR反應時,反應條件可能不同。（)8.PCR技術(shù)可以用于擴增RNA。()9.熱循環(huán)儀在PCR反應中起到控制溫度變化的作用。()10.在PCR反應體系中,緩沖液的作用只是維持pH。（）四、簡答題(每題5分,共4題)1.簡述PCR技術(shù)原理。答:以模板DNA為基礎,在引物、dNTP、Taq酶等存在下,經(jīng)過高溫變性使雙鏈DNA解開,低溫復性讓引物與模板結(jié)合,中溫延伸由Taq酶催化合成新的DNA鏈,經(jīng)多次循環(huán)擴增目的DNA片段。2.引物設計的基本要求有哪些?答：長度一般10-30bp,GC含量40%-60%,避免自身互補、引物二聚體形成,與模板特異性結(jié)合,上下游引物Tm值相近。3.影響PCR反應特異性的因素有哪些?答：引物特異性,若引物與非目的序列結(jié)合會降低特異性；模板純度與完整性；反應溫度不合適,復性溫度不當易導致非特異性結(jié)合；Taq酶的保真度也有影響。4.簡述PCR技術(shù)在醫(yī)學領域的應用。答:用于遺傳疾病診斷,檢測基因突變;病原體檢測,快速診斷感染性疾病;腫瘤診斷與研究,分析腫瘤相關基因;法醫(yī)鑒定,通過擴增DNA進行個體識別等。五、討論題(每題5分,共4題)1.當PCR擴增結(jié)果出現(xiàn)非特異性條帶時,可能的原因及解決方法有哪些?答：原因可能是引物特異性差、模板有雜質(zhì)、退火溫度低等。解決方法：重新設計引物,提高特異性;純化模板;適當提高退火溫度;優(yōu)化反應體系各成分濃度等。2.如何提高PCR反應的擴增效率?答:優(yōu)化反應體系,保證各成分比例合適,如模板、引物、dNTP、Taq酶濃度;選擇合適的緩沖液;精確控制反應溫度和時間,特別是變性、復性、延伸溫度與時間;增加循環(huán)次數(shù)但不宜過多。3.隨著技術(shù)發(fā)展,PCR技術(shù)在未來可能有哪些新的應用方向?答:在精準醫(yī)療中更精準地檢測疾病相關基因變異用于個性化治療；環(huán)境監(jiān)測領域快速檢測環(huán)境中的微生物和污染物；食品檢測方面更高效檢測食品中的病原體和轉(zhuǎn)基因成分等。4.對比傳統(tǒng)PCR技術(shù)和實時熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)缺點。答:傳統(tǒng)PCR優(yōu)點是操作簡單、成本低,能擴增DNA片段;缺點是不能精確定量。實時熒光定量PCR優(yōu)點是能準確對核酸定量,靈敏度高;缺點是技術(shù)要求高、儀器和試劑成本貴。答案一、單項選擇題1.A2.C3.A4.D5.B6.B7.C8.C9.D10.A二、多項選擇題1.ABCD2.