-21-獸藥中非法添加物質(zhì)檢查方法標(biāo)準(zhǔn)無適用的已發(fā)布獸藥中非法添加物質(zhì)檢查方法標(biāo)準(zhǔn)時使用本標(biāo)準(zhǔn)，本標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行前應(yīng)進(jìn)行耐用性驗證，僅限用于建立方法的實驗室，其他實驗室使用時應(yīng)重新進(jìn)行耐用性驗證。本標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行時，應(yīng)同時進(jìn)行試劑空白和樣品空白與陽性對照試驗，檢驗報告應(yīng)給出檢出限。第一法液相色譜-二極管陣列法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗根據(jù)可疑添加物性質(zhì)，參照藥品國家標(biāo)準(zhǔn)、獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)或者獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的條件自建。對照品溶液的制備精密稱取目標(biāo)對照品適量，用甲醇或其他適宜溶劑配制成每1ml中含對照品10μg至50μg的溶液。供試品溶液的制備固體制劑需研細(xì)，稱取細(xì)粉適量（如約相當(dāng)于一頭動物一次用量）；用甲醇或其他適宜溶劑（超聲）定量溶解，濾過，即得；液體制劑直接精密量取或稱取適量，稀釋，即得。對于含有高濃度的有機(jī)鹽和乳化劑等存在強(qiáng)烈的基質(zhì)效應(yīng)輔料的產(chǎn)品，應(yīng)適當(dāng)增加前處理步驟。測定法分別精密吸取上述兩種溶液適量注入液相色譜儀，同時記錄色譜圖與光譜圖；通過與對照品液相色譜圖保留時間、光譜圖的比對，確定供試品溶液中是否含有可疑添加物。結(jié)果判定在供試品和對照品濃度接近的情況下，供試品色譜圖中如出現(xiàn)與對照品峰保留時間一致的色譜圖（差異不大于±5%）;在一定的波長范圍內(nèi)，兩者光譜圖無明顯差異；最大吸收波長一致（差異不大于±2nm），判為檢出非法添加物。第二法液相色譜-高分辨質(zhì)譜法液質(zhì)聯(lián)用條件根據(jù)可疑添加物性質(zhì)自建，采用全掃描方式采集一級質(zhì)譜和二級質(zhì)譜信息。對照品溶液的制備精密稱取目標(biāo)對照品適量，用甲醇或其他適宜溶劑配制成每1ml中含對照品50ng至500ng的溶液。供試品溶液的制備同第一法。測定法分別精密吸取上述兩種溶液適量注入液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜儀，記錄液相色譜圖及一級質(zhì)譜圖與二級質(zhì)譜圖；通過與對照品溶液色譜圖保留時間、質(zhì)譜圖的對比，確定供試品溶液中是否含有可疑添加物。結(jié)果判定方法1供試品色譜圖中如出現(xiàn)與對照品峰保留時間一致的色譜峰（保留時間相對偏差不大于2.5%）；供試品質(zhì)譜圖應(yīng)與對照品質(zhì)譜圖一致（包括分子離子和至少一個碎片離子，質(zhì)量數(shù)差異小于等于5ppm），判為檢出非法添加物。方法2供試品與對照品分子離子峰的質(zhì)量數(shù)偏差不大于5ppm，且二級質(zhì)譜圖與對照品的二級質(zhì)譜圖一致，判為檢出非法添加物。第三法液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法液質(zhì)聯(lián)用條件根據(jù)可疑添加物性質(zhì)自建，采用離子掃描（SRM）或多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。定性離子對選用獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)中的定性離子對或者符合至少4個（非禁用藥3個）識別點數(shù)的要求。對照品溶液的制備、供試品溶液的制備同第二法。測定法分別精密吸取上述兩種溶液適量注入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，記錄特征離子質(zhì)量色譜圖；通過與對照品溶液色譜圖保留時間、離子豐度比的對比，確定供試品溶液中是否含有可疑添加物。結(jié)果判定供試品色譜圖中如出現(xiàn)與對照品峰保留時間一致的色譜峰（差異不大于±2.5%）；供試品離子豐度比應(yīng)與對照品的一致，容許偏差符合下表要求，判為檢出非法添加物。離子豐度比的允許偏差范圍相對豐度（%）允許偏差（%）>50±20>20～50±25>10～20±30≤10±50第四法顯微鑒別法適用范圍適用于不含礦物藥的中獸藥散劑中非法添