1/1芽孢桿菌的研發(fā)及其應用前景（上海會議2025.3）芽孢桿菌類生物殺菌劑的研發(fā)及其應用前景江蘇省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所陳志誼內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025主要內(nèi)容一、芽孢桿菌及其控病作用機理二、研發(fā)的芽孢桿菌類生物殺菌劑產(chǎn)品三、生物殺菌劑B1619防控作物土傳病害四、芽孢桿菌類生物殺菌劑的應用前景內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025一、芽孢桿菌及其控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025芽孢桿菌屬，革蘭氏陽性菌，需氧或兼性厭氧，產(chǎn)生芽孢，細胞呈直桿狀。

芽孢桿菌屬，革蘭氏陽性菌，需氧或兼性厭氧，產(chǎn)生芽孢，細胞呈直桿狀。

芽孢桿菌屬的細菌具有一個共同的特性，能夠形成帶有芽孢的生物膜芽孢桿菌屬的細菌具有一個共同的特性，能夠形成帶有芽孢的生物膜,,這個特點使得它們能夠抵抗各種極端環(huán)境，如：

高溫、極酸、極鹽，而且對各種殺菌劑具有抵抗力。

芽孢桿菌屬的細菌在各種自然環(huán)境中都能被分離到。

芽孢桿菌屬的細菌能產(chǎn)生環(huán)肽、抗生素、氨基酸和聚多糖等。

11、芽孢桿菌的特性內(nèi)部資料，嚴禁傳播202522、國內(nèi)外已登記的芽孢桿菌類生物殺菌劑我國農(nóng)藥登記的芽孢桿菌類生物殺菌劑的菌種有：

多粘類芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌國外農(nóng)藥登記的芽孢桿菌類生物殺菌劑的菌種有：

多粘類芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蕈狀芽孢桿菌、短小芽孢桿菌內(nèi)部資料，嚴禁傳播202533、芽孢桿菌作為生物殺菌劑的優(yōu)勢：

無毒、無致病性，對人畜安全；控病作用高效；形成芽孢、抗逆性強，耐儲存，適宜產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)；適應性廣，繁殖速度快，競爭能力強；誘導植物產(chǎn)生抗病性；抑菌物質(zhì)豐富，抗菌譜廣。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025微生態(tài)競爭作用在植物根圍建立保護屏障，占領病原菌侵染位，減少病原菌侵染幾率；分泌抑菌物質(zhì)脂肽類抗生素、抑菌蛋白，這些抑菌物質(zhì)抑制病原菌生長繁殖，惡化病原菌生存環(huán)境；誘導寄主植物抗病性植物防衛(wèi)反應PR--1a、PR--1b、PAL等基因超量表達，增強植物免疫能力，降低植物發(fā)病指數(shù)。

44、芽孢桿菌防控植物土傳病害的作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理1、生態(tài)空間的競爭作用保護屏障0100020003000400050006000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子數(shù)B1619CK23002400250026002700280029003000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子數(shù)B1619CK0100020003000400050006000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子數(shù)B1619CK銅山示范基地番茄枯萎病菌種群數(shù)量消長情況（菌數(shù)/每克土壤）溱潼示范基地番茄枯萎病菌種群數(shù)量消長情況（菌數(shù)/每克土壤）沭陽示范基地番茄枯萎病菌種群數(shù)量消長情況（菌數(shù)/每克土壤）內(nèi)部資料，嚴禁傳播20251、生態(tài)空間的競爭作用保護屏障012345678910135715B1619在番茄根部定殖數(shù)量lg(cfu﹒g-1)時間Time(d)B1619RB1619R+RSB1619在番茄根部的定殖情況B1619在番茄根部定殖數(shù)量解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20252、分泌產(chǎn)生抗菌物質(zhì)抑制病原菌（根結線蟲）生長引物名稱引物長度引物序列(53)PrimernameSize(bp)Sequence(53)sfpF20ATGAAGATTTACGGAATTTAsfpR20TTATAAAAGCTCTTCGTACGituAF20ATGTATACCAGTCAATTCCituAR20GATCCGAAGCTGACAATAGfenBF20CTATAGTTTGTTGACGGCTCfenBR20CAGCACTGGTTCTTGTCGCAPCR擴增脂肽類抗生素相關基因泳道1、2擴增出sfp基因。

泳道3、4擴增出ituA基因。

泳道5、6擴增出fenB基因。

B1619基因組中存在表面活性素、伊枯草素、泛革素代謝合成操縱子序列，能代謝產(chǎn)生這3類脂肽類抗生素。

解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20252、分泌產(chǎn)生抗菌物質(zhì)抑制病原菌（根結線蟲）生長min304050mAU050100150202550surfactinAsurfactinBsurfactinCAmin1020mAU050100150202550bacillomycinLAbacillomycinLBBmin2040mAU050100150202550fengycinAfengycinBfengycinC/fengycinD\fengycinE?CB1619三種脂肽類物質(zhì)的HPLC圖脂肽類抗生素Lipopeptides分子量MassvalueMM+H+M+Na+表面活性素SurfactinsSurfactinA(C13)1007.61008.6*1030.6*SurfactinB(C14)1021.71022.6*1044.7*SurfactinC(C15)1035.71036.7*1058.6*伊枯草素IturinsBacillomycinL(C13)1020.51021.51043.4*BacillomycinL(C14)1034.51035.5*1057.6*BacillomycinL(C15)1048.51049.5*1071.4*泛革素FengycinsFengycinA(C15/Ala-6)1448.81449.8*1471.9FengycinB(C16/Ala-6)1462.91463.5*1485.9FengycinC(C17/Ala-6)1476.91477.7*1499.9FengycinD(C16/Val-6)1490.91491.8*1513.9FengycinE(C17/Val-6)1504.91505.9*1527.9*B1619三種脂肽類物質(zhì)的分子質(zhì)量測定解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20252、分泌產(chǎn)生抗菌物質(zhì)抑制病原菌（根結線蟲）生長B1619三種脂肽類物質(zhì)對枯萎病菌生長的抑制作用1、1mg.mL-1的bacillomycinL（伊枯草素）2、1mg.mL-1的fengycins（泛革素）3、1mg.mL-1的surfactins（表面活性素）4、1mg.mL-1的B1619脂肽類物質(zhì)粗提物5、甲醇對照6、空白對照解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20252、分泌產(chǎn)生抗菌物質(zhì)抑制病原菌（根結線蟲）生長B1619脂肽類物質(zhì)粗提物對根結線蟲的毒力測定處理時間稀釋倍數(shù)死亡率（%）毒力回歸方程相關系數(shù)EC50(cfu/mL)24小時178.8481y=-1.4900x+6.0570-0.93015.1217561.49511048.55601526.92142015.8889257.985248小時182.4923y=-1.5494x+6.1703-0.94155.6922562.83731051.12411527.73872016.1501259.2389解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20253、誘導植物寄主抗病性抗病基因超量表達AA：

CK（噴施YPG培養(yǎng)液）BB：

噴施生防菌B-1619在番茄植物根部撒施生物殺菌劑BB1619后，番茄植株體內(nèi)與抗病性相關基因PR-1a和PR-1b表達值顯著高于對照解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20253、誘導植物寄主抗病性抗病基因超量表達051015202530350h8h24h48h96h相對表達量時間CKB1619線蟲線蟲+B1619抗病基因PR1的相對表達量012345678h24h48h96h144d相對表達量時間CKB1619線蟲線蟲+B1619抗病基因PAL2的相對表達量解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播20253、誘導植物寄主抗病性抗氧化酶系活性超量表達180.00280.00380.00480.00580.000h8h24h48h96h144h168hSOD（U/mgprot）時間CKB1619線蟲線蟲+B161910.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.000h8h24h48h96h144h168hPOD(U/mgprot)時間CKB1619線蟲線蟲+B161955.0075.0095.00115.00135.00155.000h8h24h48h96h144h168hCAT(U/mgprot)時間CKB1619線蟲線蟲+B1619超氧化物歧化酶（SOD）活性的變化過氧化物酶（POD）活性的變化過氧化氫酶（CAT）活性的變化解淀粉芽孢桿菌B1619控病作用機理內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025二、研發(fā)的芽孢桿菌類生物殺菌劑產(chǎn)品研制出22個芽孢桿菌類生物殺菌劑22個以芽孢桿菌類為主體的微生物復配劑內(nèi)部資料，嚴禁傳播202560億活芽孢/毫升解淀粉芽孢桿菌Lx-11水劑防治對象：

水稻白葉枯病和細菌性條斑病。

防治效果：

65.0%--82.5%累計推廣面積：

67.5萬畝該產(chǎn)品2025年44月獲得農(nóng)藥臨時登記證。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播20251.2億活芽孢/克解淀粉芽孢桿菌B1619水分散粒劑防治對象：

設施蔬菜土傳病害防治效果：

65.1--85.2%累計推廣面積：

超過1000畝該產(chǎn)品2025年11月獲得農(nóng)藥登記證。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播20252.5%井100億枯草芽孢桿菌Bs-916水劑。

防治對象：

水稻紋枯病和稻曲病。

防治效果：

68.5--87.4%累計推廣面積：

超過11億畝次。

該產(chǎn)品2025年獲得農(nóng)藥臨時登記證，2025年獲得農(nóng)藥登記證。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播20256%井240億枯草芽孢桿菌H-74可濕性粉劑防治對象：

水稻紋枯病和稻曲病。

防治效果：

72.5--85.0%累計推廣面積：

超過1000萬畝該產(chǎn)品2025年獲得農(nóng)藥臨時登記證。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025三、生物殺菌劑B1619防控設施蔬菜土傳病害內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025設施蔬菜由于經(jīng)濟價值顯著好于大田作物（設施栽培每畝產(chǎn)值為8000-30000元），現(xiàn)已成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的支柱產(chǎn)業(yè)和農(nóng)民增收的主要途徑。

截至2025年底，江蘇省以設施蔬菜為主的設施農(nóng)業(yè)面積已達到1136萬畝。

由此可見，設施蔬菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對促迚我省農(nóng)業(yè)增效、農(nóng)民增收發(fā)揮著重要的作用。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025隨著設施蔬菜連續(xù)種植年代的增加，由土傳病害（枯萎病、青枯病、根腐病、立枯病、黃萎病和根結線蟲病等）引起的設施蔬菜連作障礙頻繁暴發(fā)，已成為設施蔬菜安全生產(chǎn)的主要瓶頸。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025生產(chǎn)上防治設施蔬菜土傳病害引起的連作障礙通常采用化學農(nóng)藥+高溫燜棚處理的防控措施，但防治效果一直不理想，連作障礙發(fā)生依然嚴重。

同時大劑量化學農(nóng)藥處理土壤易造成設施生態(tài)環(huán)境污染，增加設施蔬菜中有毒化學物質(zhì)的殘留，對人類健康帶來嚴重危害。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025應用微生態(tài)學原理，在設施蔬菜根圍大量引迚生防微生物，操縱管理設施土壤生態(tài)環(huán)境中微生物群落的合理分布；結合栽培管理、農(nóng)業(yè)措施，形成一個穩(wěn)定的、平衡的、生物多樣化的設施蔬菜農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，從而達到有效控制設施蔬菜土傳病害暴發(fā)與流行的目的。

必須突破目前設施蔬菜土傳病害（根結線蟲）以化學農(nóng)藥為主的防治對策的局限性，開拓以生物農(nóng)藥為核心的無公害綜合防治設施蔬菜土傳病害的技術體系，研發(fā)創(chuàng)制生物殺菌劑，為無公害優(yōu)質(zhì)蔬菜的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供核心保障技術。

設施蔬菜土傳病害生物防治策略內(nèi)部資料，嚴禁傳播20251.2億活芽孢/克解淀粉芽孢桿菌水分散粒劑（B1619）是由江蘇省農(nóng)科院植保所植病生防研究室創(chuàng)制、與江蘇省蘇科農(nóng)化有限責任公司合作開發(fā)。

經(jīng)過多地多年試驗示范，該產(chǎn)品能夠有效防控設施蔬菜土傳病害（根結線蟲?。?；無毒無致病性，對人畜安全；能夠保護設施農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境，降低化學農(nóng)藥使用量；幵對設施蔬菜生長有一定的促生作用。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播202552025年田間藥效試驗結果藥效試驗地點番茄枯萎病1.2億活芽孢/克解淀粉芽孢桿菌水分散粒劑防效%%75%百菌清防效%%中國農(nóng)科院植保所（北京市昌平區(qū)北莊戶）79.283.3江蘇省農(nóng)科院植保所（鹽城市亭湖區(qū)便倉鎮(zhèn)）65.162.1遼寧省農(nóng)科院植保所（院內(nèi)試驗田日光溫室）85.268.3華中農(nóng)業(yè)大學（孝感市云夢縣隔蒲潭鎮(zhèn)）71.0563.16生物殺菌劑B1619藥效田間試驗結果內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025生物殺菌劑B1619藥效田間試驗結果62025年田間藥效試驗結果藥效試驗地點番茄枯萎病1.2億活芽孢/克解淀粉芽孢桿菌水分散粒劑防效%%75%百菌清防效%%中國農(nóng)科院植保所（北京市昌平區(qū)北莊戶）76.480.0江蘇省農(nóng)科院植保所（鹽城市鹽都區(qū)葛武鎮(zhèn)）67.863.6遼寧省農(nóng)科院植保所（院內(nèi)試驗田日光溫室）80.565.5華中農(nóng)業(yè)大學（孝感市云夢縣隔蒲潭鎮(zhèn)）75.566.3內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025生物殺菌劑B1619毒性試驗結果，由南通通大化學物安全性評價中心有限公司進行檢測，毒性級別為低毒性，無眼睛刺激性、無皮膚刺激性、弱致敏性。

試驗項目試驗結果毒性級別大鼠急性經(jīng)口（（LD50））大于5000mg/kg低毒大鼠急性經(jīng)皮（（LD50））大于2000mg/kg低毒大鼠急性吸入（（LD50））大于2000mg/kg低毒新西蘭兔急性眼睛刺激無刺激性豚鼠急性皮膚刺激無刺激性豚鼠皮膚變態(tài)反應（致敏性））弱致敏物內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025生物殺菌劑B1619環(huán)境生物毒性試驗結果由江蘇省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)藥生物生態(tài)研究中心進行檢測。

試驗項目試驗生物毒性指標毒性結果毒性等級鳥急性經(jīng)口日本鵪鶉LD50(7d）＞2000mga.i./kg體重低毒魚類急性毒性斑馬魚LC50(96h)＞100mga.i./L低毒蜜蜂急性經(jīng)口意大利工蜂LC50(48h)＞101ga.i./蜂低毒蜜蜂急性接觸意大利工蜂LD50(48h)＞100ga.i./蜂低毒家蠶急性毒性家蠶LC50(二齡)＞2000mga.i./L低毒溞類急性活動抑制大型溞LD50(48h)＞100mga.i./L低毒藻類生長抑制普通小球藻EyLD50(72h)＞100mga.i./L低毒普通小球藻ErLD50(72h)＞100mga.i./L低毒蚯蚓急性毒性赤子愛勝蚓LC50(14d)＞100mga.i./L干土低毒天敵赤眼蜂玉米赤眼蜂LR50(24h)7.28103ga.i./ha內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025不同濃度的9B1619發(fā)酵液對番茄幼苗的促生作用處理株高/cm增長率%根長/cm增長率%鮮重/g增長率%干重/g增長率率%原液24.24cd-3.0611.52bc-3.8810.01de-1.430.88bc-0.23菌體23.79d-4.8612.48c4.179.84e-3.140.78c-10.94上清液26.01bcd4.0112.71abc6.1110.78bcd6.120.93bc5.151026.12bcd4.4712.84ab7.1210.90bcd7.350.94bc7.235027.22abc8.8413.19ab10.0711.38ab12.081.04abc18.0210028.88a15.5014.49a20.9712.01a18.191.24a40.5050027.58ab10.3013.32ab11.2011.46ab12.801.14ab28.99100026.98abc7.8713.17ab9.9111.15abc9.801.05ab18.70YPG25.70cd2.7612.30bc2.6510.25cde0.880.89bc1.21ddH2O25.01cd11.98bc10.16cde0.88bc在注：

同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示經(jīng)極差法檢驗在p0.05水平差異顯著。

生防菌B1619對番茄植株的促生作用內(nèi)部資料，嚴禁傳播202500.10.20.30.40.50.60.70.8原液菌體上清10501005001000YPGddH2O番茄葉片葉綠素b含量/（mgg-1）Chlorophyllbcontentoftomatoleaves/(mgg-1）不同處理differenttreatents葉綠素bchlorophyllbbccabababaaabcc00.511.522.5原液菌體上清10501005001000YPGddH2O番茄葉片葉綠素總含量/（mgg-1）totalchlorophyllcontentoftomatoleaves/（mgg-1）不同處理differenttreatents葉綠素總含量totalchlorophyllcdeeabcdbcdbcdaababdee測定了不同濃度菌液處理對番茄葉綠素測定了不同濃度菌液處理對番茄葉綠素aa、bb、總葉綠素含量的影響。

結果表明：

100倍和500倍上清稀釋液均明顯促進了植株葉片葉綠素aa、葉綠素bb和總葉綠素含量的增加，尤其以100倍上清稀釋液的增加效果最顯著。

生防菌B1619可提高番茄的葉綠素含量，從而增強其光合作用，促進番茄植株的生長。

內(nèi)部資料，嚴禁傳播2025Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffArea:8.77e+004countsHeight:4.45e+004cpsRT:0.569min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e4Intensity,cps0.57Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffArea:2.42e+005countsHeight:1.20e+005cpsRT:0.564min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.001.00e42.00e43.00e44.00e45.00e46.00e47.00e48.00e49.00e41.00e51.10e5Intensity,cps0.56脫落酸（ABA）標準品B1619上清液中脫落酸（ABA）Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffArea:7.96e+004countsHeight:4.07e+004cpsRT:0.565minArea:7.96e+004countsHeight:4.07e+004cpsRT:0.565min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.02000.02000.04000.04000.06000.06000.08000.08000.01.0e41.0e41.2e41.2e41.4e41.4e41.6e41.6e41.8e41.8e42.0e42.0e42.2e42.2e42.4e42.4e42.6e42.6e42.8e42.8e43.0e43.0e43.2e43.2e43.4e43.4e43.6e43.6e43.8e43.8e44.0e44.0e4Intensity,cpsIntensity,cps0.560.56Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffArea:1.38e+005countsHeight:7.29e+004cpsRT:0.559minArea:1.38e+005countsHeight:7.29e+004cpsRT:0.559min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.05000.05000.01.0e41.0e41.5e41.5e42.0e42.0e42.5e42.5e43.0e43.0e43.5e43.5e44.0e44.0e44.5e44.5e45.0e45.0e45.5e45.5e46.0e46.0e46.5e46.5e47.0e47.0e4Intensity,cpsIntensity,cps0.560.56亞精胺（Spd）標準品B1619上清液中亞精胺（Spd）運用液質(zhì)聯(lián)用方法檢測了B1619上清液中與促生相關的物質(zhì)。

檢測結果表明：

B1619素上清液中含有生長素1.90mgL--11（IAA）素細胞分裂素1.30mgL--11（CTK）酸脫落酸1.94mgL--11（ABA）素赤霉素0.0544mgL--11（GA33）胺亞精胺1.22mgL--11（Spd）。

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