臨床科研設(shè)計(jì)1.一、緒論（一）臨床科研同樣需要預(yù)先設(shè)計(jì)2.臨床流行病學(xué)定義現(xiàn)代流行病學(xué)衛(wèi)生記錄學(xué)臨床醫(yī)學(xué)設(shè)計(jì)把基本原理和措施引入采用嚴(yán)密的測(cè)量醫(yī)學(xué)經(jīng)濟(jì)學(xué)研究領(lǐng)域評(píng)價(jià)醫(yī)學(xué)社會(huì)學(xué)3.

結(jié)局病因患者個(gè)體患者群體診斷醫(yī)學(xué)事件的從擴(kuò)大到藉以探索治療等診治研究特性研究（研究）預(yù)后臨床基礎(chǔ)學(xué)科防止4.（二）臨床科研設(shè)計(jì)特點(diǎn)人道主義問題應(yīng)當(dāng)前瞻性研究混雜原因多執(zhí)行研究的人多依從性問題原則化的處理措施不易保證多中心多層次問題宜采用序貫試驗(yàn)措施5.（三）臨床科研設(shè)計(jì)的構(gòu)成三大要素研究原因研究對(duì)象研究效應(yīng)/影響6.（四）臨床科研設(shè)計(jì)的

基本原理和原則

7.使各組間的非處理原因均衡一致

即T(treatmentfactor)

e(effect)基本原理8.基本原理公式

T+N1e+N2N1=N29.T與N四種不一樣關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案（一）T1+N1e1+N1T2+N2e2+N210.T與N四種不一樣關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案（二）T1+N1e1+N1T2+N2e2+N211.T與N四種不一樣關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案（三）T1+N1e1+N1T2+N2e2+N212.T與N四種不一樣關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案（四）T1+N1e1+N1T2+N2e2+N213.基本原則對(duì)照、隨機(jī)、盲法均衡、反復(fù)、客觀前瞻性、多中心14.（五）臨床科研設(shè)計(jì)模式1.觀測(cè)性研究（observationalstudies)2.試驗(yàn)性研究(experimentalstudies)，即臨床試驗(yàn)（clinicaltrials)。3.多學(xué)科、多中心研究15.臨床科研設(shè)計(jì)匯總病例匯報(bào)描述性研究病例分析（臨床研究初級(jí)階段）經(jīng)驗(yàn)總結(jié)1.觀測(cè)性橫斷面研究研究設(shè)計(jì)病例對(duì)照研究分析性研究（臨床研究深入階段）隊(duì)列研究16.

病例與對(duì)照不匹配成組匹配病例對(duì)照研究病例與對(duì)照匹配配對(duì)研究套式病例對(duì)照研究前瞻性隊(duì)列研究歷史性雙向性17.

過去目前未來搜集隊(duì)列隨訪搜集隊(duì)列隨訪回憶性前瞻性

雙向性隊(duì)列研究

18.2.試驗(yàn)性研究設(shè)計(jì)臨床研究的試驗(yàn)性研究即臨床試驗(yàn)，實(shí)際上可以把它當(dāng)作是一種特殊類型的隊(duì)列研究。所不一樣的是研究者可以設(shè)計(jì)對(duì)照組和治療組并隨機(jī)化分組。根據(jù)設(shè)計(jì)對(duì)照組的措施不一樣，臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案可分為六種19.（1）隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)（RCT）符合原則的研究對(duì)象研究對(duì)象隨機(jī)分組（合格對(duì)象）

有效試驗(yàn)組(試驗(yàn)措施）無效有效對(duì)照組(對(duì)照措施）無效20.（2)隨機(jī)對(duì)照雙盲試驗(yàn)（RCBT）

21.(3)交叉試驗(yàn)（COD）有效試驗(yàn)組試驗(yàn) （A組）措施研究合格隨機(jī)無效對(duì)象對(duì)象分組有效對(duì)照組對(duì)照（B組）措施無效22.

有效對(duì)照組對(duì)照（A組）措施無效 有效試驗(yàn)組試驗(yàn)（B組）措施無效洗脫期

23.（4）自身前后對(duì)照試驗(yàn)

有效研究合格試驗(yàn)對(duì)象對(duì)象措施無效有效對(duì)照措施無效洗脫期24.（5）非隨機(jī)同期對(duì)照試驗(yàn)

（NRCCS）和歷史對(duì)照試驗(yàn)

這兩個(gè)試驗(yàn)的共同點(diǎn)是：對(duì)照組并非由隨機(jī)化措施決定，而是根據(jù)不一樣的地點(diǎn)、不一樣的時(shí)間來選擇。前者是指在不一樣醫(yī)院間選擇，后者是指不一樣步期的前后對(duì)照。這些對(duì)照組的選擇常存在選擇性偏倚，兩組間的基線狀況往往不一致，從而影響成果的對(duì)的性，因此應(yīng)用受到限制。25.（6）序貫試驗(yàn)不事先確定樣本含量；一種試驗(yàn)一對(duì)受試者參與；試驗(yàn)結(jié)束立即進(jìn)行成果分析；待可下結(jié)論時(shí)立即停止試驗(yàn)。26.3.多學(xué)科或多中心

協(xié)作研究

27.二、臨床科研常見

偏倚及控制

28.

臨床研究的目的：精確、可靠地認(rèn)識(shí)和闡明臨床醫(yī)學(xué)的客觀規(guī)律，用于指導(dǎo)臨床實(shí)踐。因此，就必須盡量排除偏倚(bias)，減少機(jī)遇(chance)對(duì)觀測(cè)或研究成果的影響，增強(qiáng)研究或觀測(cè)成果的科學(xué)性，即精確性（accuracy)和可靠性（reliability)。29.基本概念（一）誤差—試驗(yàn)結(jié)論與客觀真實(shí)狀況之間存在的差異。抽樣誤差—機(jī)遇系統(tǒng)誤差—偏倚30.基本概念（二）精確性(accuracy),真實(shí)性(validity)科學(xué)性精確性(precision)，可靠性(reliability)31.縮小機(jī)遇的措施樣本量足夠大；反復(fù)多次。32.（一）選擇性偏倚重要由于選擇研究對(duì)象及將研究對(duì)象提成試驗(yàn)組和對(duì)照組時(shí)所采用的措施不對(duì)的導(dǎo)致的。常發(fā)生在試驗(yàn)的設(shè)計(jì)階段。33.1.選擇性偏倚的體現(xiàn)（種類）

（一）（1）入院率偏倚(admissionratebias)（2）移動(dòng)偏倚（migrationbias)（3）檢出偏倚（detectionbias)（4）現(xiàn)患病例—新病例偏倚（

prevalence-incidencebias)（5）易感性偏倚(susceptibilitybias)34.1.選擇性偏倚的體現(xiàn)（種類）

（二）（6）無應(yīng)答偏倚(non-respondentbias)（7）失訪偏倚(withdrawbias)（8）排除偏倚(exclusivebias)（9）非同期對(duì)照偏倚(non-contemporarybias)35.2.選擇性偏倚的控制措施（1）采用隨機(jī)抽樣措施分組；（2）采用分層措施；（3）設(shè)置兩個(gè)或多種對(duì)照；（4）選擇研究對(duì)象必須有嚴(yán)格的診斷、入選及排除原則；（5）盡量提高研究的應(yīng)答率；（6）盡量減低失訪率。36.二、測(cè)量偏倚是指對(duì)二組或幾組病例所采用的觀測(cè)或測(cè)量措施持續(xù)不一致而發(fā)生的組間差異。又稱觀測(cè)偏倚或信息偏倚。37.1.測(cè)量偏倚的體現(xiàn)（種類）

（一）（1）回憶偏倚(recallbias)（2）診斷懷疑偏倚(diagnosissusp-icionbias)（3）暴露懷疑偏倚(exposuresuspi-cionbias)（4）家庭信息偏倚(familyinform-ationbias)38.1.測(cè)量偏倚的體現(xiàn)（種類）

（二）（5）估計(jì)偏倚(estimationbias)（6）次序偏倚(sequencebias)（7）臨床資料遺漏偏倚(missingclinicalbias)（8）不接受測(cè)量偏倚(unreceptivemeasurebias)（9）不敏感測(cè)量偏倚(non-sensitivebias)39.2.測(cè)量偏倚的控制（一）（1）盡量采用雙盲法來搜集資料、操作試驗(yàn)、測(cè)量數(shù)據(jù)、判斷成果。（2）盡量采用客觀指標(biāo)來獲取成果。（3）資料搜集盡量廣泛、詳細(xì)，包括某些虛變量。40.2.測(cè)量偏倚的控制（二）（4）在試驗(yàn)次序上應(yīng)采用隨機(jī)化原則，或做先后對(duì)照交叉設(shè)計(jì)。（5）試驗(yàn)成果的原則必須統(tǒng)一規(guī)范。41.三、混雜偏倚

由混雜因子（confoun-dingfactor）引起的因果關(guān)系的曲解，稱為混雜偏倚（confoundingbias)。42.

混雜因子

混雜因子是一種與暴露因子，與疾病兩者均有聯(lián)絡(luò)的因子；它必須是所研究疾病的獨(dú)立的危險(xiǎn)因子；在非暴露組中必須是一種危險(xiǎn)因子；因果關(guān)系的中間變量不是混雜因子；混雜因子在人群中的分布與所研究的暴露因子分布有關(guān)。43.1.混雜偏倚的種類（1）正混雜偏倚(positiveconfoundingbias)（2）負(fù)混雜偏倚(negativeconfoundingbias）44.2.混雜偏倚的控制（1）限制(restriction)（2）配比(matching)（3）隨機(jī)化(randomization)（4）分層(stratification)（5）原則化(standardization)（6）多原因分析45.

創(chuàng)新性是一切科研工作的生命，是科學(xué)發(fā)展的動(dòng)力三、臨床科研的創(chuàng)新性、科學(xué)性與求異思維46.（一）創(chuàng)新的本質(zhì)

在人類物質(zhì)文明、精神文明的一切領(lǐng)域，一切層面上能先于他人，見人所未見，思人所未思，行人所未行，從而獲得人類文明的新發(fā)展、新突破。47.

（二）創(chuàng)新的思想源泉是求異思維，敏于生疑，勇于存疑，勇于質(zhì)疑。由此就能不停地產(chǎn)生新異的、多彩的、多元的發(fā)展性、創(chuàng)新性、突破性的新構(gòu)思、新思想、新思維。48.（三）科學(xué)的本質(zhì)是人類世世代代以每個(gè)人的有限認(rèn)識(shí)能力，去探究無限的外界客觀存在和客觀規(guī)律的一種永無止境的過程?？茖W(xué)又總是后人不停發(fā)現(xiàn)前人認(rèn)識(shí)中的缺陷、局限性、錯(cuò)誤，并予以修正、補(bǔ)充，乃至推翻其中某些錯(cuò)誤結(jié)論而前進(jìn)、而發(fā)展的。49.（四）科學(xué)精神的內(nèi)涵包括五大要素：客觀的根據(jù)理性的懷疑多元的思索平權(quán)的爭(zhēng)論實(shí)踐的檢查

“疑”字是關(guān)鍵，是關(guān)鍵。理性的懷疑，不疑不會(huì)有異，無異不會(huì)有新。只有生疑存疑質(zhì)疑，才能有新發(fā)現(xiàn)，新發(fā)明。求異思維從孩童期培養(yǎng)。50.俞守義專家第一軍醫(yī)大學(xué)霍亂腸毒素B亞單位在番茄中的體現(xiàn)及免疫原性研究51.立項(xiàng)根據(jù)霍亂是本省重要的常見病、多發(fā)病之一?；魜y腸毒素B亞單位（CTB）是目前公認(rèn)的最強(qiáng)的粘膜免疫原和免疫佐劑。轉(zhuǎn)基因植物是目前植物基因工程研究的一大熱點(diǎn)，也是疫苗研制的新動(dòng)向之一。它被列入國家“863計(jì)劃”十五招標(biāo)指南中“生物工程技術(shù)”主題的重要內(nèi)容。番茄是一種大眾化的蔬菜，可以生食。項(xiàng)目研究的成功將使本省這一特產(chǎn)推向全國乃至世界。在技術(shù)成熟后，我們將會(huì)申請(qǐng)專利并積極尋求與醫(yī)藥/農(nóng)業(yè)/企業(yè)合作，促使植物口服疫苗產(chǎn)業(yè)化。52.重要研究?jī)?nèi)容

CTB基因的克隆植物雙元體現(xiàn)載體的構(gòu)建根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將CTB基因?qū)敕艳D(zhuǎn)基因番茄植株的篩選及CTB基因的檢測(cè)進(jìn)行動(dòng)物轉(zhuǎn)基因番茄的喂飼試驗(yàn)，評(píng)價(jià)免疫原性。探索動(dòng)物食用轉(zhuǎn)基因番茄后所能到達(dá)的最高抗體滴度以及食用量?？墒秤玫目够魜y弧菌的轉(zhuǎn)基因番茄的產(chǎn)業(yè)化研究。53.

技術(shù)路線確定霍亂腸毒素B亞單位基因的植物偏愛密碼字核苷酸序列

采用化學(xué)合成措施合成CT-B核苷酸序列及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)引導(dǎo)序列（SEKDEL）

構(gòu)建植物體現(xiàn)載體(采用雙強(qiáng)啟子35S-35S及線粒體或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)引導(dǎo)序列）

番茄受體系統(tǒng)的建立

基因轉(zhuǎn)化

54.

分子鑒定

動(dòng)物飼喂試驗(yàn)

血清和粘膜抗體檢測(cè)

毒性中和試驗(yàn)

轉(zhuǎn)基因番茄候選植株的獲得

技術(shù)路線55.可行性分析

轉(zhuǎn)基因植物疫苗的研究技術(shù)漸趨成熟。課題組長(zhǎng)期從事感染性腹瀉尤其是霍亂的防治研究工作，在霍亂全菌體重組口服疫苗的大規(guī)?，F(xiàn)場(chǎng)人群的免疫評(píng)價(jià)工作中獲得明顯成果。課題組已完畢“將霍亂腸毒素CTB基因轉(zhuǎn)入番茄植物中的研究”，獲得轉(zhuǎn)基因植株，通過度子檢測(cè)初步證明CTB基因整