餅干主講教師：王若超知識(shí)與技能提升模塊——尚德蘊(yùn)能日精日新樣品采集1數(shù)據(jù)處理4目錄CONTENTS餅干樣品制備及保存2樣品檢驗(yàn)3報(bào)告填寫5樣品檢驗(yàn)3目錄CONTENTS餅干堿度的測(cè)定色素的檢測(cè)糖精鈉的測(cè)定甜蜜素的測(cè)定苯甲酸、山梨酸的測(cè)定有機(jī)磷含量的測(cè)定總砷含量的測(cè)定34依據(jù)：GB5009.97—2016食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測(cè)定氣相色譜法高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定高效液相色譜法原理：食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉用水提取后，在強(qiáng)酸性溶液中與次氯酸鈉反應(yīng)，生成N,N-二氯環(huán)己胺，用正庚烷萃取后，利用高效液相色譜法檢測(cè)，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定試劑：正庚烷[CH3(CH2)5CH3]：色譜純乙腈(CH3CN)：色譜純硫酸(H2SO4)次氯酸鈉(NaClO)碳酸氫鈉(NaHCO3)高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定試劑配制：硫酸溶液(1+1)：50mL硫酸小心緩緩加入50mL水中，混勻。次氯酸鈉溶液：用次氯酸鈉稀釋，保存于棕色瓶中，保持有效氯含量50g/L以上,混勻，市售產(chǎn)品需及時(shí)標(biāo)定，臨用時(shí)配制。碳酸氫鈉溶液(50g/L)：稱取5g碳酸氫鈉，用水溶解并稀釋至100mL，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品：環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品(C6H12NSO3Na)：純度≥99%。高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(5.00mg/mL)：精確稱取0.5612g環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，用水溶解并定容至100mL，混勻，此溶液1.00mL相當(dāng)于環(huán)己基氨基磺酸5.00mg(環(huán)己基氨基磺酸鈉與環(huán)己基氨基磺酸的換算系數(shù)為0.8909)。置于1℃~4℃冰箱保存，可保存12個(gè)月。環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.00mg/mL)：準(zhǔn)確移取20.0mL環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用水稀釋并定容至100mL，混勻。置于1℃~4℃冰箱保存，可保存6個(gè)月。環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)曲線系列工作液：分別吸取標(biāo)準(zhǔn)中間液0.50mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL、10.0mL至50mL容量瓶中，用水定容。該標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100μg/mL、200μg/mL。臨用現(xiàn)配。高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定儀器與設(shè)備：液相色譜儀（配有紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器）超聲波振蕩器離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000r/min樣品粉碎機(jī)恒溫水浴鍋天平：感量1mg、0.1mg高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定分析步驟：試樣溶液的制備：試樣處理：稱取均質(zhì)后試樣5.00g于50mL離心管中，加入30mL水，混勻，超聲提取20min，離心(3000r/min)20min，將上清液轉(zhuǎn)出，用水洗滌殘?jiān)⒍ㄈ葜?0mL備用。衍生化：準(zhǔn)確移取10mL已制備好的試樣溶液，加入2.0mL硫酸溶液，5.0mL正庚烷和1.0mL次氯酸鈉溶液，劇烈振蕩1min，靜置分層，除去水層后在正庚烷層中加入25mL碳酸氫鈉溶液，振蕩1min。靜置取上層有機(jī)相經(jīng)0.45μm微孔有機(jī)相濾膜過(guò)濾，濾液備進(jìn)樣用。高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定分析步驟：儀器參考條件：色譜柱：C18柱，5μm，150mm×3.9mm(i，d)，或同等性能的色譜柱。流動(dòng)相：乙腈+水(70+30)流速：0.8mL/min進(jìn)樣量：10μL柱溫：40℃檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)：314nm高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定分析步驟：標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：移取10mL環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)系列工作液按試樣溶液制備中的衍生化操作。取過(guò)0.45μm微孔有機(jī)相濾膜后的溶液10μL分別注入液相色譜儀中，測(cè)定相應(yīng)的峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以環(huán)己基氨基磺酸鈉衍生化產(chǎn)物N,N-二氯環(huán)己胺峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的測(cè)定：將衍生后試樣溶液10μL注入液相色譜儀中，保留時(shí)間定性，測(cè)得峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣定容溶液中環(huán)己基氨基磺酸的濃度，平行測(cè)定次數(shù)不少于兩次。高效液相色譜法餅干-樣品檢驗(yàn)甜蜜素的測(cè)定計(jì)算：試樣中環(huán)己基氨基磺酸含量按式(1)計(jì)算：式中：X2—試樣中環(huán)己基氨基磺酸的含量，單位為克每千克(g/kg)；c—由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出試樣定容溶液中環(huán)己基氨基磺酸的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；V—試樣的最后定容體積，單位為毫升(mL)；