【辰輝創(chuàng)聚生物】HumanCCR2Protein：科研用途下的趨化因子受體研究工具C-C趨化因子受體類型2（CCR2）是一種關(guān)鍵的G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR），廣泛參與炎癥、免疫細(xì)胞遷移和組織損傷反應(yīng)。該受體因其在單核細(xì)胞募集、免疫調(diào)節(jié)以及腫瘤免疫中的重要作用而成為免疫學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中的高頻目標(biāo)。在基礎(chǔ)科研中，recombinanthumanCCR2protein（重組人CCR2蛋白）是研究CCL2/CCR2信號軸不可或缺的試劑，廣泛用于蛋白互作驗(yàn)證、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)和藥物篩選體系構(gòu)建。1.CCR2蛋白概述與結(jié)構(gòu)特性CCR2是GPCR超家族成員，具有七次跨膜螺旋結(jié)構(gòu)，胞外N端含有糖基化位點(diǎn)，胞內(nèi)C端則負(fù)責(zé)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白相互作用域。人CCR2蛋白由374個(gè)氨基酸構(gòu)成，具有兩個(gè)主要剪接變體：CCR2A和CCR2B，其中CCR2B是最常見的功能型形式。CCR2的主要配體是CCL2（又名MCP-1），與其結(jié)合可激活G蛋白信號通路，引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高、趨化遷移、細(xì)胞黏附分子表達(dá)增加等反應(yīng)。該受體在多個(gè)生理系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，包括：單核細(xì)胞向炎癥部位的募集血管內(nèi)皮細(xì)胞與免疫細(xì)胞的互作調(diào)節(jié)神經(jīng)免疫和外周免疫系統(tǒng)的相互調(diào)節(jié)2.CCR2的生物學(xué)功能與免疫相關(guān)性CCR2廣泛表達(dá)于外周血單核細(xì)胞、記憶T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及巨噬細(xì)胞亞群中。在多種炎癥性疾病模型（如動(dòng)脈粥樣硬化、自身免疫病、感染性疾?。┲?，CCR2信號通路的激活是免疫細(xì)胞浸潤和局部免疫級聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵步驟。此外，CCR2也在腫瘤免疫微環(huán)境中扮演雙重角色：促進(jìn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）向M2型極化調(diào)控腫瘤細(xì)胞對免疫清除的逃逸能力因此，CCR2不僅是炎癥研究試劑（inflammationresearchreagent）的核心分子之一，也是研究腫瘤免疫機(jī)制和治療耐受性的常用工具靶標(biāo)。3.重組CCR2蛋白的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用3.1蛋白-配體相互作用驗(yàn)證重組CCR2蛋白通常以Fc融合或His標(biāo)簽形式表達(dá)，常用于與CCL2等配體的結(jié)合實(shí)驗(yàn)。ELISA和表面等離子共振（SPR）系統(tǒng)可利用recombinantchemokinereceptor（重組趨化因子受體）與天然或人工配體建立結(jié)合動(dòng)力學(xué)曲線，分析結(jié)合親和力、解離速率等參數(shù)。這些實(shí)驗(yàn)可用于驗(yàn)證候選趨化因子或小分子抑制劑是否干擾CCR2-CCL2相互作用。3.2單核細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)CCR2是monocytemigrationassay（單核細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)）的關(guān)鍵受體，用于模擬炎癥環(huán)境中單核細(xì)胞的向化學(xué)因子遷移現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)中，重組CCL2可作為誘導(dǎo)劑，重組CCR2則用于建立標(biāo)準(zhǔn)模型或作為拮抗實(shí)驗(yàn)對照。在Transwell或微流控芯片中評估CCR2信號通路功能，可揭示趨化反應(yīng)的強(qiáng)度和依賴性。3.3腫瘤微環(huán)境與免疫細(xì)胞分析利用CCR2蛋白作為檢測或拮抗工具，可研究腫瘤組織中TAM的募集機(jī)制。例如，在三陰性乳腺癌、小細(xì)胞肺癌等模型中，CCR2陽性巨噬細(xì)胞的積聚與免疫抑制、血管新生和藥物耐受密切相關(guān)。科研中可通過CCR2與其配體間的競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)或阻斷實(shí)驗(yàn)，評估潛在免疫調(diào)節(jié)劑的作用路徑。3.4高通量篩選中的靶點(diǎn)構(gòu)建CCR2作為G蛋白偶聯(lián)受體，也常用于構(gòu)建高通量藥物篩選平臺。其重組蛋白形式被用于驗(yàn)證配體依賴性信號通路活化情況，如β-arrestin募集、cAMP生成或MAPK磷酸化等，適用于CCR2信號調(diào)節(jié)劑的功能研究。重組CCR2Fc融合蛋白在此類平臺中可作為標(biāo)準(zhǔn)化試劑，提升實(shí)驗(yàn)一致性。4.重組人CCR2蛋白的制備特性常用的recombinanthumanCCR2protein（重組人CCR2蛋白）多數(shù)以哺乳動(dòng)物細(xì)胞（如HEK293）表達(dá)，具有較好折疊狀態(tài)與天然構(gòu)象保留。該蛋白常融合Fc區(qū)域用于免疫沉淀、ELISA檢測或細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)。典型制備參數(shù)如下：蛋白來源：HEK293或CHO細(xì)胞表達(dá)標(biāo)簽形式：Fc或His標(biāo)簽分子量：約65–75kDa（含糖基化修飾）純度要求：>95%，SDS驗(yàn)證生物活性：經(jīng)CCL2結(jié)合測試或細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證此外，為避免實(shí)驗(yàn)誤差，重組CCR2蛋白的內(nèi)毒素含量通常控制在<0.1EU/μg以下，確保其在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的安全性和可靠性。5.與CCR2蛋白相關(guān)的實(shí)驗(yàn)組合策略科研中，為更全面地研究CCR2通路，常搭配以下試劑使用：重組CCL2蛋白：用于誘導(dǎo)細(xì)胞趨化或配體結(jié)合驗(yàn)證CCR2阻斷抗體或小分子抑制劑：分析信號通路依賴性ELISA檢測試劑盒：定量分析CCR2或CCL2水平流式細(xì)胞術(shù)抗體：用于CCR2表達(dá)細(xì)胞群體分析這些工具組合構(gòu)成了完整的CCL2/CCR2軸研究體系，適用于細(xì)胞機(jī)制解析、藥效評價(jià)與疾病模型分析。結(jié)語CCR2作為連接免疫細(xì)胞遷移與組織炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵受體，已成為多個(gè)科研領(lǐng)域中的重要研究靶點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)研究中，humanCCR2protein（人源CCR2蛋白）的重組形式提供了精確、可控的模型系統(tǒng)，用于信號通路驗(yàn)證、蛋白結(jié)合分析以及藥物篩選。未來，隨著免疫研究與單細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展，CCR2蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)試劑的需求將持續(xù)增長。其在機(jī)制研究、藥效驗(yàn)證及新型靶向策略探索中的應(yīng)用價(jià)值也將持續(xù)拓展。References1.Boring,L.,Gosling,J.,Cleary,M.,&Charo,I.F.(1998).DecreasedlesionformationinCCR2?/?micerevealsaroleforchemokinesintheinitiationofatherosclerosis.Nature,394(6696),894–897.2.Deshmane,S.L.,Kremlev,S.,Amini,S.,&Sawaya,B.E.(2009).Monocytechemoattractantprotein-1(MCP-1):Anoverview.JournalofInterferon&CytokineResearch,29(6),313–326.3.Combadière,C.,&Debré,P.(2001).Chemokinesincancer.NatureImmunology,2(2),106–107.4.Kurihara,T.,Warr,G.,Loy,J.,&Bravo,R.(1997).DefectsinmacrophagerecruitmentandhostdefenseinmicelackingtheCCR2chemokinereceptor.JournalofExperimentalMedicine,186(10),1757–1762.5.Tsou,C.L.,etal.(2007).CriticalrolesforCCR2andMCP-3inmonocytemobilizationfrombonemarrowandrecruitmenttoinflammatorysites.JournalofClinicalInvestigation,117(4),902–909.6.Weber,C.,etal.(2001).Theroleofchemokinesinatherosclerosis.ThrombosisandHaemostasis,86(1),38–47.7.Qian,B.Z.,&Pollard,J.W.(2010).Macrophagediversityenhancestumorprogressionandmetastasis.Cell,141(1),39–51.8.Melgarejo,E.,Medina,M.A.,Sánchez-Jiménez,F.,&Urdiales,J.L.(2009).Monocytechemoattractantprotein-1:Akeymediatorininflammatoryprocesses.InternationalJournalofBiochemistry&CellBiology,41(5),998–1001.9.Zlotnik,A.,&Yoshie,O.(2012).Thechemokinesuperfamilyrevisited.Immunity,36(5),705–716.10.Huang,D.R.,Wang,J.,Kivisakk,P.,Rollins,B.J.,&Ransohoff,R.M.(2001).Absenceofmonocytechemoattractantprotein1inmiceleadstodecreasedlocalmacrophagerecruitmentandantigen-specificThelpercelltype1immuneresponseinexperimentalautoimmuneencephalomyelitis.JournalofExperimentalMedicine,193(6),713–726.11.Zhang,J.,Patel,L.,&Pienta,K.J.(2010).CCchemokineligand2(CCL2)mediatessurvivalofprostatecancercellsviaNF-κBpathway.CancerResearch,70(1),118–127.12.Proudfoot,A.E.I.,etal.(2003).Thechemokinesystemininflammatorydiseasetherapy.CurrentOpinioninPharmacology,3(5),474–480.13.Schall,T.J.,&Bacon,K.B.(1994).Chemokines,leukocytetrafficking,andinflammati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