《腹瀉糞便標(biāo)本中溶藻弧菌檢驗(yàn)》

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制說明

《腹瀉病人糞便標(biāo)本中溶藻弧菌檢驗(yàn)》

標(biāo)準(zhǔn)編制組

2023年8月

一、工作簡況

（包括任務(wù)來源、起草單位、主要工作過程、標(biāo)準(zhǔn)編制組成員及

其所做的主要工作等）

（一）任務(wù)來源

依據(jù)《北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法(2023年版)》，按照《關(guān)于開展

2023年團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制工作的通知》要求，本項(xiàng)目于2023年2月由北京市通州區(qū)

疾病預(yù)防控制中心向北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化管理辦公室提出申請(qǐng)，2023年3月

北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)經(jīng)過專家論證批準(zhǔn)該項(xiàng)目立項(xiàng)，開展腹瀉糞便標(biāo)本中溶藻弧菌檢

驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。

（二）起草單位

北京市通州區(qū)疾病預(yù)防控制中心、北京市疾病預(yù)防控制中心、北京市順義

區(qū)疾病預(yù)防控制中心、北京市延慶區(qū)疾病預(yù)防控制中心。

（三）主要工作過程

本標(biāo)準(zhǔn)制定嚴(yán)格按照GB/T1.1《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的

結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求執(zhí)行。

2023年2月，北京市通州區(qū)疾病預(yù)防控制中心接到北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)“2023年

北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)申報(bào)要求”任務(wù)后，成立了標(biāo)準(zhǔn)編制組，制定編制計(jì)劃，

對(duì)樣本中溶藻弧菌檢驗(yàn)相關(guān)資料進(jìn)行文獻(xiàn)查閱、資料調(diào)研。

2023年3月，標(biāo)準(zhǔn)編制組成員進(jìn)行立項(xiàng)答辯，并通過立項(xiàng)論證，同意立項(xiàng)。

2023年4月～8月，標(biāo)準(zhǔn)編制組制定標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證方案并完成培養(yǎng)基性能驗(yàn)證、

包容性、排他性等實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證。

2023年8月～9月，編制組完成標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證并完成征求意見稿和編

制說明。

（四）標(biāo)準(zhǔn)編制組成員及其所做的主要工作

趙鳳玲：檢驗(yàn)方法的技術(shù)路線、技術(shù)指標(biāo)的提出及標(biāo)準(zhǔn)制訂各階段質(zhì)控、內(nèi)

容核定工作，負(fù)責(zé)起草標(biāo)準(zhǔn)版本、征求意見稿、送審稿、報(bào)批稿的制訂和標(biāo)準(zhǔn)解

讀、編制說明。

張曉嬡：檢驗(yàn)方法的技術(shù)路線、技術(shù)指標(biāo)的提出、內(nèi)容核定工作，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)

1

版本、征求意見稿、送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定，協(xié)同試驗(yàn)。

李穎：檢驗(yàn)方法的技術(shù)路線、技術(shù)指標(biāo)的提出、內(nèi)容核定工作，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)版

本、征求意見稿、送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定，協(xié)同試驗(yàn)。

王迪：標(biāo)準(zhǔn)版本、征求意見稿、送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定，協(xié)

同試驗(yàn)。

王建國：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定。

高翔：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定。

鄒林：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及送審稿、報(bào)批稿的核定，編制說明核定。

常馨：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

劉揚(yáng)：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

崔玉娟：協(xié)同試驗(yàn)。

李曉輝：政策經(jīng)費(fèi)支持、方向引領(lǐng)。

王艷春：方法技術(shù)指標(biāo)的確定。

李秋虹：政策解讀、送審稿、報(bào)批稿、編制說明核定。

趙春艷：方法技術(shù)指標(biāo)的確定。

邵春昕：政策解讀、項(xiàng)目探究。

羅宇馨：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

黃震：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

王潤萍：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

甄博珺：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

張萍：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

張沖：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

高潔：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

周景林：方法技術(shù)指標(biāo)的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)。

王苗：協(xié)同試驗(yàn)。

張瑩：協(xié)同試驗(yàn)。

二、標(biāo)準(zhǔn)編制的必要性和預(yù)期效果

（一）標(biāo)準(zhǔn)編制的必要性

1.溶藻弧菌的危害

2

溶藻弧菌（Vibrioalginolyticus）是一類廣泛存在于海水、河口環(huán)境以及

魚類、蝦蟹、貝類等海產(chǎn)品中的革蘭陰性桿狀或彎曲狀細(xì)菌，專性嗜鹽。人們通

過接觸水或食用受污染的海鮮而感染，引起人體食物中毒、嚴(yán)重的軟組織感染、

敗血癥、中耳炎等疾病。超過20種弧菌可引起人類弧菌病，在美國，引起弧菌

病的最常見病原體是副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌和溶藻弧菌。據(jù)估計(jì)，美國每年發(fā)

生80000例弧菌病、500例住院治療和100例死亡，其中大多數(shù)未經(jīng)培養(yǎng)證實(shí)。

法國比斯開灣一份關(guān)于2001-2019年弧菌感染的臨床流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告顯示溶

藻弧菌感染占總弧菌感染的34.3%，是最常見的致病性弧菌，其引起的疾病與各

種病理有關(guān)，病死率為7.14%。我國海產(chǎn)品中溶藻弧菌的檢出率可達(dá)到82%。近

些年我國溶藻弧菌引起疾病的事件也時(shí)有報(bào)道。因此，溶藻弧菌的分離鑒定顯得

愈發(fā)重要，快速、準(zhǔn)確地鑒定溶藻弧菌具有重要的意義。

近些年在腹瀉疫情的處置中會(huì)發(fā)現(xiàn)一些臨床表現(xiàn)與副溶血性弧菌引起的疾

病極其相似，但在實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)分離到的致病菌生化特征與副溶血性弧

菌不同，鑒別后發(fā)現(xiàn)為溶藻弧菌。但是在溶藻弧菌引起疾病的疫情處置中沒有可

遵循的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，無法出具檢測(cè)報(bào)告，制定溶藻弧菌的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)可以解決這一尷

尬問題。

2.國內(nèi)外溶藻弧菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的不足

（1）國外的標(biāo)準(zhǔn)都是針對(duì)弧菌屬，尤其對(duì)副溶血性弧菌、霍亂弧菌、創(chuàng)傷

弧菌等有較詳細(xì)的介紹，沒有對(duì)溶藻弧菌檢測(cè)的具體介紹，多是從其它致病性弧

菌鑒別實(shí)驗(yàn)中介紹溶藻弧菌的分離及生化特點(diǎn)。

（2）國內(nèi)溶藻弧菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的不足

①檢驗(yàn)范圍中沒有適用糞便標(biāo)本的；

②弧菌檢驗(yàn)的國家標(biāo)準(zhǔn)有副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌，但沒有溶藻弧菌；

③弧菌屬的檢驗(yàn)方法多是十幾年前發(fā)布的，沒有引入分子生物學(xué)、

MALDI-TOFMS等靈敏快捷的方法；

④僅有的溶藻弧菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)是出入境機(jī)構(gòu)關(guān)于出口食品中溶藻弧菌的檢驗(yàn)

標(biāo)準(zhǔn)，不能滿足疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)對(duì)食源性疾病處置的要求。

（二）預(yù)期效果

3

建立《腹瀉糞便標(biāo)本中溶藻弧菌檢驗(yàn)》標(biāo)準(zhǔn)為溶藻弧菌引起的腹瀉及食物中

毒的檢驗(yàn)提供依據(jù)，通過生化、質(zhì)譜、熒光PCR相結(jié)合的鑒定手段，更快更迅速

地作出定性判斷，有利于疫情處置，有利于守護(hù)首都人民健康。

三、標(biāo)準(zhǔn)編制的原則和依據(jù)

（一）原則

采用傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)和快速的熒光PCR方法結(jié)合、生化鑒定與質(zhì)譜鑒定結(jié)合

原則，編制腹瀉糞便標(biāo)本中溶藻弧菌檢驗(yàn)流程，滿足疾控機(jī)構(gòu)疫情處置和醫(yī)療機(jī)

構(gòu)腸道門診疾病診斷的需要。

（二）參考、引用的標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)

[1]王海波,張京云,王多春等.溶藻弧菌TaqMan實(shí)時(shí)PCR快速檢測(cè)體系的建

立[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2011,21(05):1150-1152.

[2]GB4789.7-2013食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)副溶血性弧菌

檢驗(yàn)[S]

[3]WS271-2007,感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)[S].

[4]GB4789.44-2020食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)創(chuàng)傷弧菌檢驗(yàn)

[S]

[5]GB4789.28-2013食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑

的質(zhì)量要求[S]

四、主要技術(shù)內(nèi)容的論據(jù)

主要技術(shù)內(nèi)容在增菌培養(yǎng)基、選擇性分離培養(yǎng)基、鑒定方法、熒光PCR初

篩的條件摸索方面，綜合考慮溶藻弧菌及各種腸道致病菌在培養(yǎng)基中的生長表

現(xiàn)，最后選定3%氯化鈉堿性蛋白胨水為溶藻弧菌的增菌培養(yǎng)基、TCBS和弧菌顯

色培養(yǎng)基為選擇性分離培養(yǎng)基；將熒光PCR和MALDI-TOFMS作為溶藻弧菌的可

選鑒定方法；并將熒光PCR初篩引入檢測(cè)流程，在可疑溶藻弧菌引起的食物中毒

處置時(shí)可以快速作出初步判斷。

五、主要試驗(yàn)（或驗(yàn)證）的分析、綜述報(bào)告（詳細(xì)驗(yàn)證過程見驗(yàn)證方

案）

（一）選擇性分離培養(yǎng)基的驗(yàn)證

4

將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株溶藻弧菌CICC10889、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室從腹瀉糞便和食源性疾

病暴發(fā)疫情中分離的溶藻弧菌、副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、霍亂弧菌、嗜水氣單

胞菌、類志賀鄰單胞菌、大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、產(chǎn)氣腸桿菌、糞腸球

菌接種TCBS平板和弧菌顯色培養(yǎng)基平板，觀察溶藻弧菌和其他菌在兩種選擇性

培養(yǎng)基上的生長狀態(tài)。

溶藻弧菌在TCBS和弧菌顯色培養(yǎng)基上生長良好，且顏色、形態(tài)特征明顯，

作為選擇性分離培養(yǎng)基的效果好。

（二）標(biāo)準(zhǔn)的包容性驗(yàn)證

腹瀉糞便和食源性疾病暴發(fā)疫情中分離的溶藻弧菌30株，于腦心浸液肉湯

中培養(yǎng)過夜，轉(zhuǎn)種于3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂，過夜培養(yǎng)。分別用VITEK系

統(tǒng)生化、溶藻弧菌熒光PCR方法、MALDI-TOFMS三種方法對(duì)30株溶藻弧菌進(jìn)行

鑒定。

生化結(jié)果：30個(gè)菌株VITEK細(xì)菌生化鑒定系統(tǒng)給出的拉丁文鑒定結(jié)果均為

Vibrioalginolyticus，結(jié)果可信度在90%以上（好的鑒定及以上）的為26個(gè)，

86%-88%（可接受的鑒定）的有4個(gè)，生化符合率為100%。MALDI-TOFMS鑒定結(jié)

果：30個(gè)菌株質(zhì)譜鑒定結(jié)果均為Vibrioalginolyticus，質(zhì)譜評(píng)分均為種水平

可信的結(jié)果，符合率為100%。熒光PCR法鑒定結(jié)果：30個(gè)菌株均有特異的S型

曲線，熒光Ct值在14.13-20.88之間，都為陽性結(jié)果，符合率為100%。三種鑒

定方法都能很好地鑒定出30株溶藻弧菌，三種鑒定方法的敏感性均為100%。

（三）標(biāo)準(zhǔn)的排他性驗(yàn)證

將26株非溶藻弧菌菌株（大腸埃希氏菌CICC23657、弗氏檸檬酸桿菌

CICC10404、產(chǎn)氣腸桿菌CICC10293、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌CICC10869、腸炎沙

門氏菌CICC21513、鼠傷寒沙門氏菌CICC21484、褔氏志賀菌CICC10865、痢疾

志賀菌CICC23829、鮑氏志賀菌CICC21680、宋內(nèi)志賀菌CICC23875、金黃色葡

萄球菌CICC23656、金葡2017189、金葡2017190、蠟樣芽胞桿菌CICC23828、

蠟樣2021081、蠟樣2021105、單增李斯特CICC21635、單增2021078、單增

2021079、單增2021080、副溶血性弧菌CICC21617、霍亂弧菌CICC23789、河流

弧菌2019342、創(chuàng)傷弧菌CICC21615、嗜水氣單胞菌2019186、類志賀鄰單胞菌

2012320）于腦心浸液肉湯中培養(yǎng)過夜，轉(zhuǎn)種于哥倫比亞血瓊脂平板，過夜培養(yǎng)。

5

分別用VITEK系統(tǒng)生化、溶藻弧菌熒光PCR方法、MALDI-TOFMS三種方法對(duì)26

株菌株進(jìn)行鑒定。生化方法驗(yàn)證結(jié)果：生化方法雖然對(duì)蠟樣芽胞桿菌的鑒定有局

限性，但是對(duì)其他菌的鑒定結(jié)果及可信度都很高，未見溶藻弧菌的交叉反應(yīng)。

MALDI-TOFMS驗(yàn)證結(jié)果：志賀氏菌和大腸埃希氏菌區(qū)分不開，對(duì)其他菌的鑒定

結(jié)果及可信度都很高，未見溶藻弧菌的交叉鑒定。溶藻弧菌熒光PCR法驗(yàn)證結(jié)果：

26個(gè)菌株均未見特異的S型曲線，都為陰性結(jié)果，此鑒定方法對(duì)溶藻弧菌排他

性良好。溶藻弧菌的三種鑒定方法特異性均為100%。

(四）標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)限驗(yàn)證（雜菌干擾實(shí)驗(yàn)）

1.驗(yàn)證過程

糞便標(biāo)本50份（1g/份）加入干擾菌大腸埃希氏菌（每份1000CFU～2000

CFU)。用溶藻弧菌質(zhì)控球調(diào)制高濃度菌液1CFU/mL～10CFU/mL,低濃度菌液

0.1CFU/mL～1CFU/mL。將高濃度菌液1mL加入一份加了干擾菌的糞便標(biāo)本，制作

5份；將低濃度菌液1mL加入一份加了干擾菌的糞便標(biāo)本，制作40份；其他5

份加了干擾菌而未加溶藻弧菌菌液的糞便標(biāo)本為空白對(duì)照標(biāo)本。按本標(biāo)準(zhǔn)溶藻弧

菌檢驗(yàn)程序進(jìn)行檢測(cè)。出具熒光PCR初篩、生化鑒定、熒光PCR鑒定、質(zhì)譜鑒定

檢測(cè)結(jié)果。

2.驗(yàn)證結(jié)果

(1)實(shí)驗(yàn)室1檢測(cè)限驗(yàn)證結(jié)果見表1。

表1標(biāo)增菌液熒光PCR鑒定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)本初篩結(jié)果

室1號(hào)陰性/Ct值生化結(jié)果生化結(jié)質(zhì)譜結(jié)質(zhì)譜熒光熒光

檢測(cè)陽性（VITEK果可信果(拉PCRPCR

限驗(yàn)報(bào)告拉丁度（%）丁文名評(píng)分結(jié)果（Ct

證結(jié)文名稱）稱)(安（陰值）

果濃性/陽

度類圖)性)

別

1陽性21.129Vibrio95Vibrio9.518陽性13.675

alginolytialginol

高cusyticus

2陽性22.300Vibrio99Vibrio9.627陽性15.627

濃alginolytialginol

度cusyticus

3陽性22.621Vibrio96Vibrio9.657陽性15.384

alginolytialginol

cusyticus

6

4陽性21.720Vibrio99Vibrio9.648陽性15.658

alginolytialginol

cusyticus

5陽性21.331Vibrio98Vibrio9.430陽性15.846

alginolytialginol

cusyticus

6陽性25.254Vibrio89Vibrio9.657陽性16.124

alginolytialginol

cusyticus

7陰性N/A//////

8陽性24.635Vibrio98Vibrio9.760陽性17.232

alginolytialginol

cusyticus

9陽性25.736Vibrio99Vibrio9.723陽性16.354

3alginolytialginol

cusyticus

10陽性25.437Vibrio99Vibrio9.669陽性16.747

低alginolytialginol

cusyticus

濃11陰性N/A//////

12陽性24.720Vibrio99Vibrio9.492陽性15.621

alginolytialginol

度cusyticus

13陽性25.850Vibrio96Vibrio9.632陽性16.165

alginolytialginol

cusyticus

14陽性24.982Vibrio93Vibrio9.742陽性16.234

alginolytialginol

cusyticus

15陽性36.958Vibrio99Vibrio9.670陽性16.074

alginolytialginol

cusyticus

16陰性N/A//////

17陰性N/A//////

18陽性21.309Vibrio98Vibrio9.659陽性15.936

alginolytialginol

cusyticus

19陽性24.389Vibrio99Vibrio9.535陽性15.721

alginolytialginol

cusyticus

20陽性25.267Vibrio99Vibrio9.617陽性15.492

alginolytialginol

cusyticus

21陽性25.146Vibrio97Vibrio9.736陽性15.321

alginolytialginol

cusyticus

22陰性N/A//////

23陽性21.092Vibrio99Vibrio9.730陽性15.746

alginolytialginol

cusyticus

24陽性30.256Vibrio89Vibrio9.678陽性15.924

alginolytialginol

cusyticus

25陽性19.829Vibrio99Vibrio9.564陽性15.635

alginolytialginol

cusyticus

26陽性25.724Vibrio95Vibrio9.599陽性15.283

alginolytialginol

cusyticus

27陽性32.178//////

28陽性25.329Vibrio94Vibrio9.710陽性15.236

alginolytialginol

cusyticus

29陽性24.678Vibrio99Vibrio9.694陽性15.658

alginolytialginol

7

cusyticus

30陽性24.324Vibrio96Vibrio9.628陽性16.271

alginolytialginol

cusyticus

31陰性N/A//////

32陽性24.236Vibrio95Vibrio9.480陽性16.426

alginolytialginol

cusyticus

33陽性24.141Vibrio97Vibrio9.740陽性16.832

alginolytialginol

cusyticus

34陽性22.875Vibrio92Vibrio9.643陽性15.635

alginolytialginol

cusyticus

35陽性23.927Vibrio98Vibrio9.614陽性15.269

alginolytialginol

cusyticus

36陽性26.098Vibrio99Vibrio9.705陽性15.147

alginolytialginol

cusyticus

37陰性N/A//////

38陰性N/A//////

39陽性22.044Vibrio96Vibrio9.575陽性14.981

alginolytialginol

cusyticus

40陽性19.657Vibrio93Vibrio9.592陽性15.636

alginolytialginol

cusyticus

41陽性22.192Vibrio97Vibrio9.681陽性16.748

alginolytialginol

cusyticus

42陽性26.257Vibrio98Vibrio9.640陽性15.237

alginolytialginol

cusyticus

43陽性19.457Vibrio99Vibrio9.635陽性16.625

alginolytialginol

cusyticus

44陽性24.632Vibrio96Vibrio9.534陽性16.324

alginolytialginol

cusyticus

45陽性30.646Vibrio92Vibrio9.614陽性15.825

alginolytialginol

cusyticus

對(duì)46陰性N/A//////

照47陰性N/A//////

組48陰性N/A//////

49陰性N/A//////

50陰性N/A//////

結(jié)果：高濃度組熒光PCR初篩、生化鑒定、熒光PCR鑒定、質(zhì)譜鑒定檢測(cè)結(jié)

果均為陽性；低濃度組初篩陽性率為80%，生化鑒定、熒光PCR鑒定、質(zhì)譜鑒定

檢測(cè)結(jié)果陽性率均為77.5%，三個(gè)鑒定方法的陽性符合率均為100%；對(duì)照組四組

結(jié)果均為未檢出。

（2）實(shí)驗(yàn)室2檢測(cè)限驗(yàn)證結(jié)果見表2。

8

表2實(shí)驗(yàn)室2檢測(cè)限驗(yàn)證結(jié)果

增菌液熒光

鑒定結(jié)果

PCR初篩結(jié)果

標(biāo)質(zhì)譜

濃度生化結(jié)果生化熒光

本評(píng)分熒光

類別陰性/（VITEK結(jié)果質(zhì)譜結(jié)果(拉PCR結(jié)

號(hào)Ct值（布PCR（Ct

陽性報(bào)告拉丁可信丁文名稱)果（陰性

魯值）

文名稱）度（%）/陽性)

克）

VibrioVibrio1.80

1陽性14.4399%陽性11.21

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.93

2陽性14.1499%陽性11.35

alginolytalginolytic2

高VibrioVibrio1.80

3陽性14.0898%陽性11.20

濃alginolytalginolytic3

VibrioVibrio1.92

度4陽性14.3199%陽性11.47

alginolytalginolytic3

VibrioVibrio2.07

5陽性14.2499%陽性12.41

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio1.77

6陽性14.1399%陽性12.41

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.81

7陽性14.1697%陽性11.10

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.80

8陽性14.6098%陽性13.10

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio1.84

9陽性14.6896%陽性11.76

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio1.71

10陽性14.0899%陽性12.29

alginolytalginolytic3

VibrioVibrio1.84

11陽性14.3899%陽性11.88

alginolytalginolytic9

VibrioVibrio1.74

12陽性14.5190%陽性11.02

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio1.82

低13陽性15.0599%陽性11.81

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.77

濃14陽性14.1799%陽性11.33

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio1.78

度15陽性14.7898%陽性12.23

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.77

16陽性15.1399%陽性11.64

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio1.71

17陽性15.2799%陽性11.45

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.78

18陽性14.7997%陽性12.20

alginolytalginolytic8

9

VibrioVibrio1.77

19陽性14.9993%陽性12.39

alginolytalginolytic1

VibrioVibrio1.89

20陽性14.9798%陽性13.44

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio1.96

21陽性15.1399%陽性12.71

alginolytalginolytic8

22陰性N/A//////

VibrioVibrio1.70

23陽性15.2099%陽性11.99

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.82

24陽性15.0299%陽性10.70

alginolytalginolytic6

VibrioVibrio2.00

25陽性15.2299%陽性13.34

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.89

26陽性15.2699%陽性11.25

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.96

27陽性14.3399%陽性11.32

alginolytalginolytic3

VibrioVibrio1.83

28陽性14.5999%陽性12.31

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio2.17

29陽性14.7998%陽性11.82

alginolytalginolytic6

VibrioVibrio1.77

30陽性13.4498%陽性10.62

alginolytalginolytic2

VibrioVibrio1.93

31陽性14.2198%陽性12.07

alginolytalginolytic3

VibrioVibrio1.88

32陽性14.4899%陽性11.97

alginolytalginolytic7

VibrioVibrio1.80

33陽性14.6599%陽性11.30

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.76

34陽性14.0696%陽性11.85

alginolytalginolytic6

VibrioVibrio1.94

35陽性14.3699%陽性11.78

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio1.87

36陽性14.2399%陽性13.07

alginolytalginolytic8

VibrioVibrio1.76

37陽性14.4899%陽性12.25

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio2.03

38陽性13.5899%陽性12.08

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.78

39陽性14.4399%陽性11.68

alginolytalginolytic0

VibrioVibrio2.01

40陽性14.7399%陽性11.56

alginolytalginolytic5

VibrioVibrio1.84

41陰性N/A99%陽性12.12

alginolytalginolytic1

VibrioVibrio1.96

42陽性14.7998%陽性12.53

alginolytalginolytic7

10

VibrioVibrio1.77

43陽性14.4399%陽性11.93

alginolytalginolytic6

VibrioVibrio1.77

44陽性14.3199%陽性11.53

alginolytalginolytic4

VibrioVibrio1.94

45陽性14.7499%陽性12.96

alginolytalginolytic8

46陰性N/A//////

47陰性N/A//////

對(duì)

照48陰性N/A//////

組

49陰性N/A//////

50陰性N/A//////

結(jié)果：高濃度組熒光PCR初篩、生化鑒定、熒光PCR鑒定、質(zhì)譜鑒定檢測(cè)結(jié)

果均為陽性；低濃度組初篩陽性率為95%，生化鑒定、熒光PCR鑒定、質(zhì)譜鑒定

檢測(cè)結(jié)果陽性率均為97.5%，三個(gè)鑒定方法的陽性符合率均為100%；對(duì)照組四組

結(jié)果均為未檢出。

（3）實(shí)驗(yàn)室3檢測(cè)限驗(yàn)證結(jié)果見表3。

表3實(shí)驗(yàn)室3檢測(cè)限驗(yàn)證結(jié)果

增菌液熒光

鑒定結(jié)果

PCR初篩結(jié)果

濃

標(biāo)生化質(zhì)譜