宮頸癌篩查的首選

人乳頭瘤病毒（HPV）分型的檢測

HPV分型的檢測目錄宮頸癌與HPV關(guān)系HPV簡介HPV的生物學(xué)特點HPV感染特點HPV基因分型檢測原理HPV基因結(jié)構(gòu)特點常用HPV檢測方法HPV的基因分型HPV標(biāo)本的采集處理與保存HPV分型的檢測宮頸癌與HPV關(guān)系豪森，德國人，2008年10月諾貝爾獎獲得者研究了人乳頭狀瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系。據(jù)權(quán)統(tǒng)計，全球每分鐘就有一例宮頸癌新發(fā)病例，每2分鐘就有一名婦女死于宮頸癌，在中國每4分鐘就有一例宮頸癌新發(fā)病例，每天約80名婦女死于此疾病。近年來宮頸癌患病呈上升趨勢。HPV分型的檢測哪些人群更容易患宮頸癌性生活過早的婦女早孕多產(chǎn)或多次人工流產(chǎn)的婦女自身或性伴侶有多個性伴侶的婦女曾經(jīng)貨正患有生殖道HPV、單純皰疹病毒、HIV感染或其它性傳播疾病的婦女。吸煙、吸毒、營養(yǎng)不良的婦女有宮頸病變（長期慢性宮頸炎、宮頸癌前病變、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、陰道癌或外陰癌）病變的婦女HPV分型的檢測感染途徑1、性傳播途徑2、密切接觸3、間接接觸：通過接觸感染者的衣物、生活用品等4、醫(yī)源性感染：醫(yī)務(wù)人員在治療護理時防護不好，造成自身感染或通過醫(yī)務(wù)人員傳給患者5、母嬰傳播：是由嬰兒通過孕婦產(chǎn)道的密切接觸HPV分型的檢測常見宮頸癌篩查方法的對比對比項目細(xì)胞學(xué)檢查HPV檢測（不分型）HPV基因分型檢測范疇細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查病原學(xué)檢測病原學(xué)檢測靈敏度60﹪左右＞95﹪＞95﹪重復(fù)性低高高結(jié)果判讀對閱片醫(yī)生要求高，受主觀因素影響大結(jié)果直觀，受主觀因素影響小結(jié)果直觀，受主觀因素影響小臨床意義判斷是否發(fā)生細(xì)胞病變，但低靈敏度易導(dǎo)致漏診判斷是否存在HPV感染，初步提示子宮病變風(fēng)險分型檢測能更好的提示宮頸病變風(fēng)險：1.可以明確患者是否是同一基因型持續(xù)感染。2.不同基因型感染，臨床處理不同。HPV分型的檢測宮頸癌的首選—

HPV檢測

與細(xì)胞學(xué)檢查相比，HPV檢測具有更高的敏度和重復(fù)性。國際權(quán)威機構(gòu)—歐洲生殖感染和腫瘤研究組織推薦將HPV檢測作為宮頸癌篩查的首選方法。HPV分型的檢測簡介什么是人類乳突病毒？

人類乳突病毒（HumanPapillomavirus，簡稱HPV）是一種嗜上皮性病毒，有高度的特異性，長期以來，已知HPV可引起人類良性的腫瘤和疣，如生長在生殖器官附近皮膚和粘膜上的人類尋常疣、尖銳濕疣以及生長在粘膜上的乳頭狀瘤。像乙肝病毒一樣，HPV也是一種DNA病毒。它原是多瘤空泡病毒科的一員，1999年國際病毒分類委員會（ICTV）取消多瘤空泡病毒科，代之以乳頭瘤病毒科，因此，HPV便歸屬此門下。

HPV分型的檢測注：如何對待HPV感染？1.HPV感染較為常見2.多數(shù)HPV可以被清除,“一過性”感染不致宮頸病變3.少數(shù)持續(xù)性感染會引發(fā)宮頸病變4.HPV致CINI、CINII、CINIII到浸潤癌需要相當(dāng)長的時間，一般是8~10年5.致宮頸癌的是高危型HPV6.HPV(+)只說明是一種感染，并非是一種疾病7.沒有HPV感染可以不得宮頸癌,因此避免HPV感染可以避免發(fā)生宮頸癌8.目前治療HPV感染的方針是“治病不治毒”,對于HPV感染的檢查與治療的輕視和過分恐懼都不適宜HPV分型的檢測HPV的生物學(xué)特點

1、HPV為小DNA病毒，通常引起生殖器疣、子宮頸及肛門、生殖道癌。目前已完全鑒別到的HPV有80種型，型與型之間的差異在于基因結(jié)構(gòu)的不同，基因結(jié)構(gòu)的差異決定其存在部位及可能導(dǎo)致的皮膚病變類型。

2、乳頭瘤病毒科的成員主要包括人乳頭瘤病毒、牛乳頭瘤病毒、狗口腔乳頭瘤病毒、棉尾兔乳頭瘤病毒、多乳房小鼠乳頭瘤病毒和鹿乳頭瘤病毒。

3、HPV呈球形，無包膜，20面體立體對稱結(jié)構(gòu)。HPV基因組是雙鏈環(huán)狀，以共價閉合的超螺旋、開放的環(huán)狀DNA結(jié)構(gòu)。HPV分型的檢測HPV感染特點初次感染HPV大部分可自行消退。與病毒的侵襲能力和感染者的免疫狀態(tài)相關(guān)，連續(xù)多次的HPV感染會引發(fā)女性子宮頸發(fā)生病變，并可能導(dǎo)致子宮頸癌。HPV感染后以整合和非整合兩種狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞。性行為和年齡是兩個HPV相關(guān)性腫瘤的高危因素。感染高峰年齡:17-33歲；每年新感染的病例，高峰年齡為20～24歲。HPV分型的檢測HPV基因分型檢測原理采用PCR體外擴增和DNA反向點雜交相結(jié)合的DNA芯片技術(shù)。利用HPV的基因特點設(shè)計特異引物，可以擴增出23種HPV基因型的目標(biāo)片段，再將擴增產(chǎn)物與固定在膜條上的包括18種高危型和5種低危型在內(nèi)的分型探針進行雜交，依據(jù)雜交信號的有無來判斷是否有這些HPV基因型的存在。HPV分型的檢測HPV基因結(jié)構(gòu)特點為雙鏈環(huán)狀DNA，長約8kb，由8個ORF框組成，按基因功能可分為長控制區(qū)（上游調(diào)控區(qū)）、早期基因區(qū)（E1、E2、E4-E7）編碼六個早期蛋白和晚期基因區(qū)（L1、L2）編碼兩個晚期蛋白。E1、E2與病毒的復(fù)制有關(guān)，E6、E7是癌基因，分別與抑癌基因P53、pRb結(jié)合并導(dǎo)致其失活，這是高危型HPV感染與子宮頸癌發(fā)生的重要分子機制。L1、L2編碼病毒的結(jié)構(gòu)蛋白形成病毒外殼，L2蛋白在病毒感染靶細(xì)胞的過程中及其感染后的生命周期中都發(fā)揮著重要的作用。不同型別HPVL2蛋白8-81、90-115和280-333(以HPV16為基準(zhǔn))區(qū)域的氨基酸序列高度保守。HPV分型的檢測HPV基因結(jié)構(gòu)圖HPV分型的檢測常用HPV檢測方法的分析一、染色鏡檢：將疣狀物作組織切片或生殖道局部粘液涂片，用帕尼科拉染劑染色后，光鏡下觀察到特征性空泡細(xì)胞或角化不良細(xì)胞和角化過度細(xì)胞，可初步HPV診斷。二、HPV－DNA檢測：根據(jù)不同標(biāo)本采用點雜交或原位雜交檢測HPV-DNA。亦可選擇適當(dāng)?shù)奶禺愋蛄?，合成引物做PCR后進行雜交，PCR具有敏感，特異及可選擇不同型別的引物擴增后分型等優(yōu)點。三、血清學(xué)試驗：應(yīng)用重組技術(shù)表達(dá)抗原檢測患者血清中l(wèi)gG抗體。或抗原免疫動物制備免疫血清或單克隆抗體檢測組織或局部粘液中HPV抗原。HPV分型的檢測四、HPV基因檢測HPV分型的檢測常見HPV的基因分型依據(jù)HPV與宮頸癌發(fā)生相關(guān)性高低可分為高危型和低危型經(jīng)美國FDA確認(rèn)的HPV高危型有：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68等14種低危型有：HPV6、11、42、43、44等5種現(xiàn)有文獻(xiàn)報道的HR類型中基本都包含有：HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82等17種HPV分型的檢測HPV亞型及地域分布目前已有120多種HPV基因型被確定，其中40多種亞型與生殖道感染有關(guān)，同類型的不同類型的HPV感染可導(dǎo)致不同的臨床病變。HPV有嚴(yán)格的嗜上皮特性，只能感染人的皮膚和粘膜層，根據(jù)HPV的組織嗜異性，將其分為皮膚類和粘膜類。后者又根據(jù)其致病力不同分為低危型和高危型。低危型包括6、11、42、43、44等亞型，主要引起肛門皮膚及男性外生殖器、女性大小陰唇、尿道口、陰道部位的外生性疣類病變和低度子宮頸上皮內(nèi)瘤。高危型包括16、18、31、33、35、45、52、53、56、58等十多種亞型，除了可引起外生殖器疣外，還可引起外生殖器癌、宮頸癌及高度子宮頸上皮內(nèi)瘤，尤其是宮頸癌。研究表明，HPV引起的肛門癌、陰莖癌、女陰癌和宮頸癌中，以宮頸癌最多，99.7%的宮頸癌中都能發(fā)現(xiàn)高危性HPV感染，其中以16、18型為主，約占發(fā)病的65%，是誘發(fā)宮頸癌首要潛在病因。HPV分型的檢測HPV引起的常見疾病與HPV亞型

HPV分型的檢測標(biāo)本的采