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第2節(jié)第2課時(shí)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化1、實(shí)驗(yàn)原理酵母菌是兼性厭氧型生物、單細(xì)胞真核生物;酵母菌生長周期短,增殖速度快;可用含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)培養(yǎng);通過細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化;養(yǎng)分、氧氣、溫度、pH和代謝廢物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素;在理想環(huán)境中,酵母菌種群的增長呈“J”形曲線;在有限的環(huán)境條件下,酵母菌種群的增長呈“S”形曲線。在恒定培養(yǎng)液中當(dāng)酵母菌種群數(shù)量達(dá)到K值后,

還會轉(zhuǎn)而下降直至全部死亡。2、提出問題:培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的?3、作出假設(shè):①培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量一開始呈“J”型增長;②隨著時(shí)間推移,由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗、有害代謝產(chǎn)物的積累、pH的改變,酵母菌數(shù)量呈“S”型增長。4、探究思路怎樣對酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)?本探究需要設(shè)置對照嗎?如果需要,應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作?本探究需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎?怎樣記錄結(jié)果?記錄表怎樣設(shè)計(jì)?A.正面圖;B.縱切面圖;1.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板;2.蓋玻片;3.計(jì)數(shù)室酵母菌的計(jì)數(shù):(1)用抽樣檢測的方法——顯微計(jì)數(shù)法。(2)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及其應(yīng)用=400=400①血細(xì)胞計(jì)數(shù)板:通常有兩種規(guī)格。無論哪種規(guī)格的計(jì)數(shù)板,每個(gè)大方格都有400個(gè)小方格。每個(gè)大方格長和寬各為1mm,深度為0.1mm,體積為0.1mm3。酵母菌的計(jì)數(shù):(1)用抽樣檢測的方法——顯微計(jì)數(shù)法。(2)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及其應(yīng)用16×25型計(jì)數(shù)板:計(jì)四角的4個(gè)中方格共計(jì)100個(gè)小方格中的個(gè)體數(shù)量。酵母菌的計(jì)數(shù):(1)用抽樣檢測的方法——顯微計(jì)數(shù)法。(2)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及其應(yīng)用=400=400②計(jì)數(shù)方法:25×16型計(jì)數(shù)板:計(jì)四角和正中間的(共5個(gè))中方格共計(jì)80個(gè)小方格中的個(gè)體數(shù)量。計(jì)算公式:酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=(100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100)×400×10000×稀釋倍數(shù)。計(jì)算公式:酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=(80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80)×400×10000×稀釋倍數(shù)。對照組的設(shè)置:不需要另外設(shè)置對照實(shí)驗(yàn),只要分組統(tǒng)計(jì),獲得平均數(shù)值即可。本實(shí)驗(yàn)在連續(xù)培養(yǎng)并定時(shí)計(jì)數(shù)過程中形成自身對照。重復(fù)組的設(shè)置:需要,目的是盡量減少誤差,需對每個(gè)樣品至少計(jì)數(shù)三次,取其平均值。記錄表的設(shè)計(jì):每天計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量的時(shí)間要固定。0123456甲乙丙……………………平均時(shí)間數(shù)量組別(個(gè))(d)重復(fù)組5、制定計(jì)劃(5)構(gòu)建模型分析:將所得數(shù)據(jù)用曲線表示出來,得出酵母菌種群數(shù)量變化規(guī)律(4)重復(fù)(2)(3)步驟:連續(xù)觀察7天,統(tǒng)計(jì)數(shù)目(1)酵母菌培養(yǎng)將500mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液注入錐形瓶中將0.1g活性干酵母投入錐形瓶的培養(yǎng)液中混合均勻,并置干適宜的條件下培養(yǎng)(2)抽樣檢測振蕩酵母菌培養(yǎng)液,使酵母菌均勻分布每天定時(shí)采用抽樣檢測方法抽取1mL酵母菌培養(yǎng)液(3)觀察計(jì)數(shù)將含有酵母菌的培養(yǎng)液滴在計(jì)數(shù)板上的蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入計(jì)數(shù)室,用濾紙吸去多余的培養(yǎng)液待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部,在顯微鏡下

計(jì)數(shù)酵母菌的數(shù)量估算1mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)目的:使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布,減小誤差。s如果一個(gè)小方格酵母菌過多,難以計(jì)數(shù),則應(yīng):定量稀釋培養(yǎng)液重新計(jì)數(shù)。對壓在小方格界線上的酵母菌的計(jì)數(shù)方法:遵循“計(jì)上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右”的計(jì)數(shù)原則。6、分析結(jié)果,得出結(jié)論:7、表達(dá)和交流:01234567時(shí)間/天種群數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量前期呈“S”型增長,后期數(shù)量下降。影響酵母種群數(shù)量增長的因素可能是什么?養(yǎng)料、有害代謝產(chǎn)物、PH、溫度、O2、生存空間等1、下列有關(guān)“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)”的敘述,不正確的是()吸取培養(yǎng)液前應(yīng)將培養(yǎng)瓶輕輕振蕩對酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上滴加培養(yǎng)液后再蓋上蓋玻片實(shí)驗(yàn)的后期,對抽樣的培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)叵♂?,然后進(jìn)行計(jì)數(shù)每天定時(shí)取樣并計(jì)數(shù),可以發(fā)現(xiàn)酵母菌的種群數(shù)量呈現(xiàn)“S”形增長課堂練習(xí)培養(yǎng)5h后,酵母菌種群密度是原來的200倍左右探究培養(yǎng)液中酵母菌的種群數(shù)量變化可以用標(biāo)記重捕法用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量時(shí)只需統(tǒng)計(jì)方格內(nèi)的菌體數(shù)培養(yǎng)5h后,酵母菌種群數(shù)量已經(jīng)達(dá)到K值2、在一定量的酵母菌培養(yǎng)液中放入活性干酵母,抽樣鏡檢,視野下如圖甲所示(圖中小點(diǎn)代表酵母菌)。將此培養(yǎng)液放在適宜溫度下恒溫培養(yǎng)5h后,稀釋100倍,再抽樣鏡檢,視野下如圖乙所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷,以下敘述正確的是()3、某同學(xué)在用25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(即25個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格)計(jì)數(shù)時(shí),進(jìn)行了如下圖所示的操作:(1)對培養(yǎng)液中的酵母菌進(jìn)行逐個(gè)計(jì)數(shù)非常困難,應(yīng)采用

的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。(2)該同學(xué)的操作中有一個(gè)明顯的錯誤,請指出并改正:

。(3)這種錯誤操作會導(dǎo)致他得到的結(jié)果與實(shí)際值相比偏

。抽樣檢測先蓋蓋玻片在計(jì)數(shù)板上,再吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片的邊緣大3、某同學(xué)在用25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(即25個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格)計(jì)數(shù)時(shí),進(jìn)行了如下圖所示的操作:(4)25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室長和寬各為1mm,深度為0.1mm。如果計(jì)數(shù)的幾個(gè)中方格中酵母菌的平均數(shù)為20個(gè),則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)為

個(gè)。(5)在吸取培養(yǎng)液制片前,要輕輕振蕩幾次試管,目的是

。如果一

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