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文檔簡介

第三章

紫外可見分光光度法葉樺珍福建衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院教學(xué)目標(biāo)

掌握光的吸收定律，定量分析方法

熟悉紫外-分光光度計的操作了解紫外-可見分光光度計的結(jié)構(gòu)及工作原理第一節(jié)

基本原理（一）透光率一、透光率與吸光度（二）吸光度

溶液吸光示意圖二、光的吸收定律

（朗伯比爾定律）

當(dāng)用一束強度為I0的單色平行光垂直通過均勻無散射的稀溶液時，溶液的吸光度A正比于溶液的厚度L和溶液中吸光物質(zhì)的濃度c的乘積。其數(shù)學(xué)表達式為：二、光的吸收定律（一）朗伯-比爾定律的內(nèi)容A=KLc（二）朗伯-比爾定律適用范圍及應(yīng)用條件應(yīng)用朗伯-比爾定律必須滿足以下條件：（1）入射光為單色光；（2）被測樣為均勻介質(zhì)；（3）測定過程中，吸光物質(zhì)之間不能發(fā)生相互作用。（三）吸光度的加合性

吸光度具有加和性。在某一波長處，如果試樣中同時存在幾種吸光組分，則在該波長處測得的吸光度為各吸光組分吸光度的總和。

（四）偏離光的吸收定律的因素

1．溶液濃度偏高2．溶液組成發(fā)生改變3．非單色光入射

4．非均相體系三、吸光系數(shù)

(一）吸光系數(shù)的表示方法1.比吸光系數(shù)

2.摩爾吸光系數(shù)

當(dāng)溶液濃度采用mol/L為單位，液層厚度采用cm為單位時，K用另一符號ε來表示，ε即為摩爾吸光系數(shù)，單位為L/（mol·cm），其物理意義為質(zhì)量濃度為1mol/L，液層厚度為1cm時溶液的吸光度值，朗伯-比爾定律表達式為：A=εLc四、紫外吸收光譜

（一）吸收光譜曲線及相關(guān)術(shù)語

在溶液濃度、液層厚度一定時，測定溶液對不同波長單色光的吸光度，以波長（λ）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制曲線，所得到反映吸光度隨波長變化情況的曲線稱為吸收光譜曲線。吸收光譜曲線示意圖（二）吸收光譜曲線的特點

不同的物質(zhì)吸收光譜曲線形狀和最大吸收波

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