醫(yī)療衛(wèi)生機構消毒/滅菌效果監(jiān)測麥苗一、監(jiān)測依據(jù)2006年8月2監(jiān)測的目的是為了控制感染。揭示醫(yī)院感染的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律及醫(yī)院感染管理的現(xiàn)狀，為控制醫(yī)院感染提供依據(jù)、方向和途徑。不以控制為目的監(jiān)測是無意義的監(jiān)測，不以監(jiān)測為依據(jù)的控制是盲目的控制。2006年8月3醫(yī)院消毒是預防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一，消毒效果的監(jiān)測是評價其消毒設備、消毒藥劑、消毒方法、消毒效果是否達標的唯一手段。2006年8月4監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓。掌握一定的消毒知識，熟悉消毒設備和藥劑性能，具備熟練的檢驗技能。選擇合理的采樣時間。遵循嚴格的無菌操作。醫(yī)院消毒效果監(jiān)測時需遵循以下原則：2006年8月5醫(yī)院消毒/滅菌效果監(jiān)測相關的法律法規(guī)、規(guī)范、標準和規(guī)定：《中華人民共和國傳染病防治法》《中華人民共和國傳染病防治法實施辦法》《醫(yī)療機構管理條例》《醫(yī)療機構管理條例實施細則》《消毒管理辦法》2006年8月6《醫(yī)院感染管理規(guī)范（試行）》old

《醫(yī)院感染管理辦法（2006）》new《消毒技術規(guī)范》《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》《消毒與滅菌效果的評價方法與標準》《醫(yī)院消毒供應室驗收標準（試行）》《內(nèi)鏡清潔消毒技術操作規(guī)范（2004）》《醫(yī)療機構口腔診療器械消毒技術操作規(guī)范》

2006年8月7二、監(jiān)測要點監(jiān)測頻率:

年度綜合性監(jiān)測每年至少一次監(jiān)測內(nèi)容:1.醫(yī)院感染病例監(jiān)測（醫(yī)院感染發(fā)病率、醫(yī)院感染罹患率、漏報率）2.對醫(yī)院內(nèi)部日常監(jiān)測檢查（規(guī)章制度、報告、檢驗單、學習培訓等）2006年8月9

3.

消毒/滅菌效果監(jiān)測消毒/滅菌物品監(jiān)測：消毒物品不得檢出致病性微生物，滅菌物品不得檢出任何微生物。使用中的消毒劑/滅菌劑：進行生物和化學監(jiān)測。壓力蒸汽滅菌器：進行工藝監(jiān)測、化學監(jiān)測和生物監(jiān)測。紫外線消毒：紫外燈管照射強度監(jiān)測。血液凈化系統(tǒng)：透析入口液、透析出口液監(jiān)測。2006年8月104.環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測:重點部門（對手術室、重癥監(jiān)護病房/室（ICU）、產(chǎn)房、母嬰室、新生兒病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供應室無菌間、治療室、換藥室等）空氣消毒效果的監(jiān)測物體表面消毒效果的監(jiān)測醫(yī)護人員手消毒效果的監(jiān)測2006年8月11三、監(jiān)測采樣

空氣采樣:采樣時間:消毒處理后與進行醫(yī)療活動之前這段時間內(nèi)采樣。布點方法：高度：與地面垂直高度150cm布點數(shù)：室內(nèi)面積≤30m2，取室內(nèi)一條對角線上的3點（中心一點，兩端各距墻1m兩點）；室內(nèi)面積＞30m2，取五點（中心一點，東、西、南、北均距墻1m的四點）2006年8月13采樣方法：一般用9cm直徑普通營養(yǎng)瓊脂平板在采樣點暴露5分鐘后送檢培養(yǎng)。注意事項：采樣平板直徑不同，以后計算公式代入值不同。平板擺放如取一條對角線，避免離門近的一條。采樣前，不要有人員在室內(nèi)走動，關閉門窗，至少靜態(tài)10分鐘以后再采。工作人員不要靠近自動門，以免影響監(jiān)測結(jié)果。2006年8月142006年8月15物體表面采樣：采樣時間：消毒處理后4小時內(nèi)進行采樣。采樣面積：被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面＞100cm2,取100cm2。2006年8月16采樣方法：用5cm×5cm的標準滅菌規(guī)格版，放在被檢物體表面，用浸有無菌采樣液的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣1-4個規(guī)格板面積，去掉手接觸部分，將棉拭子放入10ml采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。2006年8月175cm橫豎來回各五次2006年8月18注意事項：規(guī)格板要干熱法滅菌處理。不規(guī)則物體表面的采樣，盡量準確估算實際面積。2006年8月192006年8月20醫(yī)護人員手采樣采樣時間：消毒后從事診療操作前進行采樣。采樣方法：被檢人五指并攏，手心向上。將浸有采樣液的棉拭子從指根到指端來回涂擦各兩次（一只手涂擦面積按30cm2計算），并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，去掉手接觸部位，裝入試管內(nèi)送檢。2006年8月21注意事項：不同的洗手法，標準要求不同。雙手都要采樣。洗手后不要接觸未消毒的物品。用消毒巾擦干，或控干手上的水分。2006年8月22醫(yī)療用品采樣采樣時間在消毒/滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。采樣方法可用破壞性方法取樣的醫(yī)療用品，如輸液器按《無菌檢查法》執(zhí)行。不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療用品，用浸有采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面＞100cm2,取100cm2。2006年8月23注意事項滅菌物品采樣有環(huán)境要求。接觸皮膚和黏膜的醫(yī)療用品，消毒標準要求不同。2006年8月24內(nèi)窺鏡采樣消毒后內(nèi)窺鏡的采樣方法：內(nèi)窺鏡（如胃鏡、腸鏡）內(nèi)腔面：用20ml無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從內(nèi)鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集。內(nèi)窺鏡外表面：按醫(yī)療用品表面方法采樣，從活檢出口向上計算面積，采集100cm2。2006年8月25從活檢出口接從內(nèi)鏡活檢孔口注入2006年8月26血液透析系統(tǒng)采樣標本采集：單一透析系統(tǒng)：采樣點為透析液進口及出口，消毒后用無菌試管接原液10ml即可。疑有透析液污染或嚴重感染病例時，應增加采樣點，如：原水口、軟化水出口、反滲水出口、透析液配液口。監(jiān)測時間：每月一次。檢查結(jié)果超過參考標準時，須再復查。懷疑或確定病人在治療中有熱原反應或菌血癥時，應隨時檢測。2006年8月27消毒/滅菌劑采樣采樣時間:正在使用中的消毒/滅菌劑。采樣方法：用10ml無菌試管吸取一定量消毒劑，注入干燥無菌試管，待檢。監(jiān)測頻率：含氯消毒劑、過氧乙酸等每日監(jiān)測一次2%戊二醛每周一次（重點科室每日監(jiān)測）2006年8月28采樣中常用溶液中和劑的選擇中和劑是中和殘留消毒劑的藥物，其作用是正確測定化學消毒劑的殺菌能力，防止消毒后殘余消毒劑繼續(xù)和微生物作用。中和劑的使用是要經(jīng)過鑒定篩選的。理想中的中和劑標準是：能有效中和相應的消毒劑及其對細菌有害的產(chǎn)物。中和劑本身及其反應物對細菌無害。中和劑與消毒劑無協(xié)同作用。對培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分無破壞作用，不形成對細菌有害的副產(chǎn)物，并且不影響培養(yǎng)基的透明度。2006年8月30先將消毒劑1.0mL與中和劑溶液9.0mL混合，制成中和產(chǎn)物溶液。對于醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可；對于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需在肉湯中加入0.1％硫代硫酸鈉；對于洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需在肉湯中加入3％（W/V）吐溫80和0.3％卵磷脂；對于醛類消毒劑，需在肉湯中加入0.3％甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復方消毒劑，需在肉湯中加入3％（W/V）吐溫80。以中和被檢樣液的殘效作用。2006年8月31無水磷酸氫二鈉2.83g磷酸二氫鉀1.36g蒸餾水加至1000ml將各成分加入到1000ml蒸餾水中，待完全溶解后，調(diào)pH至7.2～7.4，于121℃壓力蒸汽滅菌20min備用。磷酸鹽緩沖液

（PBS，0.03mol/L，pH7.2）2006年8月32無菌檢驗用洗脫液吐溫-801g蛋白胨10g氯化鈉8.5g蒸餾水1000ml將各成分加入到1000ml0.03mol/LPBS液中，加熱溶解后調(diào)pH至7.2～7.4，于121℃壓力蒸汽滅菌20min備用。2006年8月33營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g蒸餾水1000ml將各成分溶解于蒸餾水中，調(diào)pH至7.2～7.4，分裝，于121℃壓力蒸汽滅菌20min備用。2006年8月34壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測是一組綜合監(jiān)測，包括工藝監(jiān)測、化學監(jiān)測、生物監(jiān)測。2006年8月35工藝監(jiān)測工藝監(jiān)測：應每鍋監(jiān)測，并詳細記錄（鍋號、壓力、溫度、時間、滅菌物品、滅菌操作者簽名等項）。2006年8月36化學監(jiān)測監(jiān)測原理化學指示劑是將某些熱敏物質(zhì)與輔料配制成印墨印制在特殊紙上制作而成。印墨的印記在飽和壓力蒸汽下規(guī)定的溫度、作用時間下，色塊顏色變成標準色（多為黑色或灰黑色），間接指示壓力蒸汽滅菌基本條件得到滿足，表示滅菌合格。色塊變色標準的設計是根據(jù)生物指示劑芽孢的耐熱參數(shù)制定而成。下排氣壓力蒸汽滅菌化學指示卡在121℃飽和蒸汽下作用20min,變至標準色；預真空壓力蒸汽滅菌化學指示卡在132℃飽和蒸汽下作用3min，變至標準色。2006年8月37冷空氣測試圖（又稱B-D試紙），用于監(jiān)測預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器內(nèi)是否殘留冷空氣，冷空氣是否排除。在滅菌之前測試，不指示滅菌合格與否。監(jiān)測時間：于新滅菌柜安裝調(diào)試之后或滅菌器維修之后；用于每天滅菌器使用之前。2006年8月38操作方法：①準備標準測試包②將1張B-D試紙放于包的中層，包好放于滅菌器底部靠前端；③按照正常滅菌程序運行，測試結(jié)束，取出B-D試紙觀察色條顏色變化。結(jié)果判定：若為均勻一致變色即說明排除冷空氣性能良好；反之若變色不均勻，有淺顏色區(qū)說明滅菌器內(nèi)存在冷空氣團。2006年8月39適用范圍121℃壓力蒸汽滅菌化學指示卡：專用于下排氣式壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測。132℃壓力蒸汽滅菌化學指示卡：專用于預真空或脈動真空壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測。化學指示卡監(jiān)測法：包內(nèi)中央部位。每包監(jiān)測。壓力蒸汽滅菌指示膠帶：用于貼封滅菌包，指示該物品包是否經(jīng)過滅菌處理，作為滅菌標識物而不表示滅菌是否合格?；瘜W指示膠帶監(jiān)測法：包外。每包監(jiān)測。2006年8月40使用方法和結(jié)果判斷化學指示卡和指示膠帶作為日常監(jiān)測使用。領取滅菌包時首先查驗指示膠帶是否變色，變成黑色即表示此包經(jīng)過滅菌處理?；瘜W指示卡作為滅菌指示劑放于滅菌包中心，勿將指示卡色塊與金屬物品和玻璃直接接觸，以免被冷凝水浸濕，影響變色。在使用滅菌包時打開包首先觀察化學指示卡色塊變色情況，變色達到標準色塊表示可以使用，否則更換并查找原因。2006年8月41注意事項選用合格指示劑，必須選用國家批準的有效期內(nèi)的衛(wèi)消準字號衛(wèi)生許可證產(chǎn)品。合理使用指示器材，指示器材不可相互代替，嚴格按照指示的用途使用。正確分析檢測結(jié)果，當發(fā)現(xiàn)指示器材變色不合格時，要認真分析原因，切不可隨便下結(jié)論；滅菌處理后指示色塊出現(xiàn)花白點并有水浸濕痕，可能是被冷凝水或蒸氣含水量過高浸濕，若色塊均勻變淺未達到標準色則可能為其他因素致滅菌失敗。2006年8月42生物監(jiān)測生物監(jiān)測是指用標準菌株（國際標準菌株為嗜熱脂肪桿菌芽孢）制成的干燥菌片或由菌片和培養(yǎng)基組成的管即生物指示劑進行的監(jiān)測。通過生物指示劑是否全部被殺滅來判斷滅菌物品包內(nèi)各種微生物是否完全被殺滅。生物監(jiān)測是判斷滅菌效果的直接指標，屬于裁定性監(jiān)測。2006年8月43生物指示劑使用方法在壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準試驗包標準試驗包（下排氣式）3件平紋長袖手術衣4塊小手術巾2塊中手術巾1塊大手術巾30塊10㎝×10㎝8層紗布敷料

包大小為30㎝×30㎝×25㎝2006年8月44標準測試包（預真空和脈動預真空式）16條41㎝×66㎝大小全棉手術巾每條長邊折成3層，短邊折成2層，疊放。包的大小為23㎝×23㎝×15㎝

2006年8月45手提式壓力滅菌器用通氣貯物盒（22㎝×13㎝×6㎝）代替。盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部位的兩只滅菌試管內(nèi)(試管口用滅菌牛皮紙包封)，將貯物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。2006年8月46干熱滅菌效果監(jiān)測適用于耐高溫診療用品、油脂、粉末、玻璃、金屬制品常用160℃2h?；瘜W檢測法：用既能指示溫度又能指示時間化學指示劑。觀測顏色和性狀的改變。物理檢測法：熱電偶溫度檢測儀。生物監(jiān)測法：枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）株。36℃±1℃培養(yǎng)48小時。2006年8月47環(huán)氧乙烷滅菌效果監(jiān)測化學檢測法：環(huán)氧乙烷化學指示劑。儀器監(jiān)測法：測定EO氣體濃度（氣相色譜或紅外分析）。生物監(jiān)測法：枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）株，每月一次。根據(jù)柜內(nèi)容積放置菌片，柜容積＜5m3，至少放置10片；5m3－10m3，每增加1m3，增加1個菌片；＞10m3，每增加2m3，增加1個菌片。2006年8月48紫外線消毒效果監(jiān)測紫外線輻照計測定法：開燈5min后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩(wěn)定后，讀取紫外線燈管的輻照度值。紫外線強度指示卡監(jiān)測法：開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min（紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色），觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。2006年8月49生物監(jiān)測法：同空氣消毒和表面消毒效果檢測方法結(jié)果判斷：普通30W直管型紫外燈，新燈輻照強度≥90uW/cm2，使用中燈管輻照強度≥70uW/cm2，高強度燈管輻照強度≥180uW/cm2為合格。2006年8月50注意事項：

測定時電壓220V±５V，溫度20℃～25℃，相對濕度＜60％，紫外線輻照計必須在計量部門檢定的有效期內(nèi)使用(要求一年校準一次)指示卡應獲得衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。放于燈管中央部位，儀器探頭與拉桿保持垂直。1米2006年8月51監(jiān)測樣品送檢時間

采樣后必須盡快對樣品進行相應指標的檢測,送檢時間不得超過6小時,若樣品保存于0-4℃條件時,送檢時間不得超過24小時。2006年8月52四、檢驗及結(jié)果評價空氣消毒效果檢驗：細菌總數(shù)：將瓊脂平板，置于36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)細菌菌落數(shù)。致病菌檢驗金黃色葡萄球菌：溶血性鏈球菌：

2006年8月54檢驗結(jié)果計算方法：A為平板面積（cm2）T為平板暴露時間（min）：5minN為平均菌落數(shù)（cfu）9cm直徑的平皿計算常數(shù)為1572006年8月55結(jié)果判定Ⅰ類區(qū)域空氣：細菌總數(shù)≤10cfu/m3

不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）Ⅱ類區(qū)域空氣：細菌總數(shù)≤200cfu/m3不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）Ⅲ類區(qū)域空氣：細菌總數(shù)≤500cfu/m3不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）2006年8月56無菌檢驗無菌檢驗是指檢查經(jīng)滅菌的敷料、縫線、一次性使用的醫(yī)療用品、無菌器械以及適合于無菌檢查的其它品種是否無菌的一種方法。無菌檢驗應在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染；對單向流空氣區(qū)域及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。2006年8月57無菌檢驗前準備

洗脫液與培養(yǎng)基無菌性試驗:無菌試驗前3d，于需-厭養(yǎng)培養(yǎng)基與霉菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種1ml洗脫液，分別置30℃～35℃與20℃～25℃培養(yǎng)72h，應無菌生長。陽性對照管菌液制備:①金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]②生孢梭菌[CMCC(B)64941]③白色念珠菌[CMCC（F）98001]2006年8月58無菌操作小件醫(yī)療器械(縫合針、針頭、刀片等)取5件直接浸入6管需-厭氧培養(yǎng)管(其中一管作陽性對照)與4管霉菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)基用量為15ml/管。大件醫(yī)療器械(手術鉗、鑷子等)取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復涂抹采樣，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種于需-厭氧培養(yǎng)管與霉菌培養(yǎng)基。接種量為1ml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管。2006年8月59培養(yǎng)在待檢樣品的需-厭氧培養(yǎng)管中，接種預先準備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液1:1000稀釋1ml。將需-厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對照管均于30℃～35℃培養(yǎng)5d，霉菌培養(yǎng)管與陰性對照管于20℃～25℃培養(yǎng)7d。培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長，如培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀上判斷時，可取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種入另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h～72h后，觀察是否再現(xiàn)混濁或在斜面上有無菌落生長，并在轉(zhuǎn)種的同時，取培養(yǎng)液少量，涂片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。2006年8月60結(jié)果判定滅菌合格：陽性對照在24h內(nèi)應有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應無菌生長。如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯混濁但經(jīng)證明并非有菌生長。滅菌不合格：如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中（除陽性對照外）任何1管顯混濁并證實有菌生長。2006年8月61注意事項送檢時間不得超過6h，若樣品保存于0℃～4℃，則不得超過24h。被采樣本表面積＜100cm2取全部表面；被采樣本表面積≥100cm2，取100cm2。若消毒因子為化學消毒劑，采樣液中應加入相應中和劑。2006年8月62無菌保持液檢驗方法：吸取被檢樣液1.0ml加入9.0ml中和劑混勻，取1.0ml接種15ml需-厭氧菌培養(yǎng)管（6管，其中1管為陽性對照）30℃～35℃培養(yǎng)5d，霉菌培養(yǎng)管（共4管，其中1管作為陽性對照）與陰性對照管于20℃～25℃培養(yǎng)7d。結(jié)果判定：同無菌檢出,為合格。2006年8月63生物學監(jiān)測檢驗:滅菌處理之后將滅菌包在無菌室內(nèi)取出菌片接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基，于56℃條件下培養(yǎng)24h觀察初步結(jié)果，連續(xù)培養(yǎng)7d觀察最終結(jié)果；生物指示劑菌管可以在現(xiàn)場或?qū)嶒炇覂?nèi)

取出擠碎管內(nèi)安瓿讓培養(yǎng)液浸透菌片，置于56℃條件下培養(yǎng)48h觀察結(jié)果。壓力蒸汽滅菌器2006年8月64結(jié)果判定：溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基可因細菌生長繁殖而使其pH值發(fā)生改變從而使溴甲酚紫指示劑顏色發(fā)黃。所以，當培養(yǎng)液顏色變黃時即表示有菌生長為陽性，判定為滅菌不合格；若培養(yǎng)后培養(yǎng)液仍為紫色者表示無菌生長為陰性，判定為滅菌合格。2006年8月65

注意事項:使用菌片進行監(jiān)測首先要注意無菌操作;自制培養(yǎng)基注意配方標準、pH適當、滅菌合格。培養(yǎng)溫度必須滿足：嗜熱脂肪桿菌最適合生長溫度為55-65℃范圍，容易出現(xiàn)的問題經(jīng)常是培養(yǎng)溫度不夠，生長不好，甚至陽性對照亦不變顏色。判斷結(jié)果注意仔細觀察，有時培養(yǎng)管剛從培養(yǎng)箱內(nèi)取出呈灰色，不易觀察，可以待其冷卻時再觀察。監(jiān)測頻率：生物監(jiān)測每月至少進行1次。2006年8月66醫(yī)院器械按使用時發(fā)生交叉感染的危險程度，分為三個消毒等級:①嚴格：進入正常無菌組織或血管系統(tǒng)的器械。要求無菌。如腹腔鏡。②半嚴格：主要指與完整的粘膜接觸而一般不穿透無菌組織的器械。如上消化道內(nèi)窺鏡至少應該接受高水平消毒。③不嚴格：通常不接觸患者或僅接觸完整皮膚。如聽診器。醫(yī)療用品2006年8月67醫(yī)療用品衛(wèi)生標準：進入無菌組織、器官或接觸破損皮膚、黏膜：無菌。接觸黏膜：細菌總數(shù)≤20cfu/g或100cm2；接觸皮膚：細菌總數(shù)≤200cfu/g或100cm2；*氣管鏡、胃鏡、腸鏡要求達到高水平消毒。*腹腔鏡、腦室內(nèi)窺鏡、關節(jié)鏡要求無菌。2006年8月68內(nèi)窺鏡菌落計數(shù)：將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經(jīng)熔化的45℃-48℃營養(yǎng)瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養(yǎng)48小時后計數(shù)。致病菌檢測：將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種9cm血平皿、中國蘭平皿和SS平皿，均勻涂布，35℃培養(yǎng)48小時，觀察有無致病菌生長。2006年8月69內(nèi)窺鏡內(nèi)腔面：細菌菌落總數(shù)（cfu/鏡）=平均平板菌落數(shù)×20內(nèi)窺鏡鏡身：內(nèi)鏡檢驗結(jié)果計算2006年8月70內(nèi)鏡結(jié)果判定消毒后的內(nèi)鏡應當每季度進行生物學監(jiān)測并做好監(jiān)測記錄。滅菌后的內(nèi)鏡應當每月進行生物學監(jiān)測并做好監(jiān)測記錄。消毒后的內(nèi)鏡合格標準為：細菌總數(shù)<20cfu/件，不能檢出致病菌；滅菌后內(nèi)鏡合格標準為：無菌檢測合格。2006年8月71血液透析系統(tǒng)菌落計數(shù)：將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經(jīng)熔化的45℃-48℃營養(yǎng)瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養(yǎng)48小時后計數(shù)。致病菌檢驗:金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌2006年8月72結(jié)果計算：細菌菌落總數(shù)（cfu/ml）=平均平板菌落數(shù)×2結(jié)果判定：透析入口液，細菌總數(shù)≤200cfu/ml。透析出口液，細菌總數(shù)≤2000cfu/ml。2006年8月73手和皮膚黏膜消毒效果細菌總數(shù)檢測:將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次。用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內(nèi)加入已溶化的45℃的營養(yǎng)瓊脂15ml～18ml，邊傾注邊搖勻。待瓊脂凝固，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。2006年8月74致病菌檢測：注意事項:將樣品在用電動混合器混合20s或在手掌上用力振敲80次。取液時要準確，盡量減少吸管使用中產(chǎn)生的誤差。傾注時瓊脂培養(yǎng)基溫度不得超過48℃，以防損傷細菌。傾注和搖動時，動作應盡量平穩(wěn)，以利細菌分散均勻，便于計數(shù)菌落。不要使培養(yǎng)基外溢。將平皿蓋好，即刻輕輕搖動混勻，平放于臺上。待瓊脂凝固后，置36℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)。2006年8月75采樣結(jié)果計算方法：手面積：60cm2稀釋倍數(shù):10倍2006年8月76結(jié)果判定Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域工作人員：細菌總數(shù)≤5cfu/cm2

不得檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單孢菌Ⅲ類區(qū)域工作人員細菌總數(shù)≤10cfu/cm2不得檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌Ⅳ類區(qū)域工作人員細菌總數(shù)≤15cfu/cm2不得檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌★母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員不得檢出沙門氏菌、溶血性鏈球菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌2006年8月77物品和環(huán)境表面消毒效果

細菌總數(shù)檢測:檢測方法同手執(zhí)行。小型物體表面的結(jié)果計算，用cfu/件表示。致病菌檢測:采樣結(jié)果計算方法：物表面積：100cm2稀釋倍數(shù):10倍2006年8月78結(jié)果判定Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域物表：細菌總數(shù)≤5cfu/cm2

不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）Ⅲ類區(qū)域物表：細菌總數(shù)≤10cfu/cm2不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）Ⅳ類區(qū)域物表：細菌總數(shù)≤15cfu/cm2不得檢出致病菌（金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）★母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌2006年8月79消毒/滅菌劑濃度測定消毒劑濃度監(jiān)測濃度測試紙(卡)法：用相應消毒劑濃度測試紙(卡)進行現(xiàn)場測試。2%戊二醛：用3M1.8%戊二醛濃度測試卡。含氯消毒劑、過氧乙酸、二氧化氯：G-1型消毒濃度試紙?；瘜W滴定法：含氯消毒劑有效氯含量，戊二醛含量，過氧乙酸含量及二氧化氯含量測定方法參照《醫(yī)院消毒技術規(guī)范》20.8規(guī)定方法執(zhí)行。2006年8月80消毒液染菌量測定涂抹法:用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相應中和劑的采樣管內(nèi)混勻。用無菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通瓊脂平