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情境:微生物培養(yǎng)任務(wù):微生物生長(zhǎng)曲線知識(shí)點(diǎn):微生物生長(zhǎng)曲線課程:食品微生物技術(shù)微生物生長(zhǎng)曲線24小時(shí)后:4722366500萬億個(gè)后代,重量達(dá)到:4722噸48小時(shí)后:2.2×1043個(gè)后代,重量達(dá)到2.2×1025噸相當(dāng)于4000個(gè)地球的重量!大腸桿菌一個(gè)細(xì)胞重約10–12

克,平均20分鐘繁殖一代。微生物生長(zhǎng)曲線細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中,定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量,以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),以菌數(shù)為縱座標(biāo)作圖,得到的一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。一條典型的生長(zhǎng)曲線可分為:延滯期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。(1)延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長(zhǎng)速度接近于零,也稱遲緩期、適應(yīng)期。特點(diǎn):細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng),例如巨大芽孢桿菌,在遲緩期末,細(xì)胞的平均長(zhǎng)度比剛接種時(shí)長(zhǎng)6倍。一般來說處于遲緩期的細(xì)菌細(xì)胞體積最大細(xì)胞內(nèi)RNA,尤其是rRNA含量增高,合成代謝活躍,核糖體、酶類和ATP的合成加快,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。對(duì)外界不良條件反應(yīng)敏感。遲緩期出現(xiàn)的原因:微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境,暫時(shí)缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶,或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物,就需要一段適應(yīng)期。在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短遲緩期的常用手段:(1)通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短;(2)利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為種子;(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大;(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量(2)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期以最大的速率生長(zhǎng)和分裂,細(xì)菌數(shù)量呈對(duì)數(shù)增加,細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加,表現(xiàn)為平衡生長(zhǎng)。特點(diǎn):對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌個(gè)體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致,代謝旺盛、生長(zhǎng)迅速、代時(shí)穩(wěn)定,所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子,使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短,提高經(jīng)濟(jì)效益。影響微生物增代時(shí)間(代時(shí))的因素:1)菌種,不同的微生物或菌株的不同代時(shí)也不同2)營(yíng)養(yǎng)成分,在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)代時(shí)短3)營(yíng)養(yǎng)物濃度,生長(zhǎng)速率與營(yíng)養(yǎng)物濃度呈正比4)溫度,生長(zhǎng)速率與培養(yǎng)溫度呈正相關(guān)在細(xì)菌個(gè)體生長(zhǎng)里,每個(gè)細(xì)菌分裂繁殖一代所需的時(shí)間為代時(shí),在群體生長(zhǎng)里細(xì)菌數(shù)量增加一倍所需的時(shí)間稱為倍增時(shí)間。代時(shí)通常以G表示。(3)穩(wěn)定生長(zhǎng)期由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,逐步不適宜于細(xì)菌生長(zhǎng),導(dǎo)致生長(zhǎng)速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù))。穩(wěn)定生長(zhǎng)期又稱恒定期或最高生長(zhǎng)期,此時(shí)培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。特點(diǎn):細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段;儲(chǔ)存糖原等細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物,芽孢桿菌在此階段形成芽孢或建立自然感受態(tài)等。也是發(fā)酵過程積累代謝產(chǎn)物的重要階段,某些放線菌抗生素的大量形成也在此時(shí)期。生產(chǎn)上常通過補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(補(bǔ)料)或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pH、調(diào)節(jié)溫度、對(duì)好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長(zhǎng)穩(wěn)定生長(zhǎng)期,以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。(4)衰亡期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累,細(xì)菌死亡速率超過新生速率,整個(gè)群體呈現(xiàn)出負(fù)增長(zhǎng)。該時(shí)期死亡的細(xì)菌以對(duì)數(shù)方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會(huì)使細(xì)菌死亡的速率降低,仍有部分活菌存在。

特點(diǎn):細(xì)菌代謝活性降低,細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶,產(chǎn)生或

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