CCS

30

DB36 36/T

1869—2023香菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Technical

regulation

for

spawn

of

Lentinula

edodes 江西省市場監(jiān)督管理局發(fā)

布

18692023

II

DB36/T

1869

1.1-2020

的規(guī)定起II

18692023

edodes）菌種的術(shù)語和定義、菌種生產(chǎn)要求、母種生產(chǎn)、原種與栽

GB

9688

GB

GH/T

NY/T

528 NY/T

NY/T

NY/T

NY/T

3.1

茸(本)（Basidiomycota

1013-20153.13.2

3.3

DB36/T

1869

19170-2003，3.1，有改動]3.4

28）cm（0.004～0.005）cm聚丙烯塑料袋為容器，也稱為二級種。3.5

3.6

3.7

4.1

4.2

4.3

18692023

5.1

5.2

試管一般選用18

mm180

mm200

mm。5.3

配方一：PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）：馬鈴薯200

g，瓊脂20

1000

g，瓊脂20

mL。5.4

5.5

～124（0.11

5.6

～65

5.7

抽取3%～5%冷卻的試管，在28

5.8

先用75%酒精棉球?qū)⒊瑑艄ぷ髋_以及接種工具表面擦拭消毒，再打開紫外燈照射30

挑選生長長勢良好、形狀規(guī)則、未開傘、無蟲蛀的香菇子實(shí)體作為種菇，用75%的酒精棉球?qū)ΨN菇在菌蓋與菌柄交界處切取10

mm

mm“目”字形組織小塊為接種材料。用接種針挑取一小塊組織片，試管放入25

d～3

5×DB36/T

1869

選取斜面上菌絲茁壯、長勢優(yōu)良的試管，用接種工具挑取（3～5）mm(3～5)

mm的菌塊，按無菌操作要求，轉(zhuǎn)接到新的試管培養(yǎng)基中，置于25℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15

接種48

h后應(yīng)做首次檢查，挑揀出未萌發(fā)或污染母種。母種菌落長至直徑2

cm左右時，進(jìn)行第二次

6.1

6.2

78%、麥麩

1%；

cm

cm

所有原料應(yīng)符合NY/T

原種采用850

28）cm栽培種采用同原種要求的玻璃瓶子，或（15～17）cm（33～35）cm（0.004～0.005）cm的聚丙

cm～1.5

cm～12

cm，每袋（瓶）裝培養(yǎng)基500

g～600

h內(nèi)進(jìn)行滅菌。高壓滅菌：培養(yǎng)基在121～124（0.11

MPa～0.14

MPa）

h之內(nèi)使滅菌溫度達(dá)到100

10

先用75%酒精棉球?qū)⒔臃N袋（瓶）以及接種工具表面擦拭消毒，放入接種箱或接種室內(nèi)，再對接種

～2650

DB36/T

1869

原種及栽培種在培養(yǎng)期間，按照NY/T

6.2.10

6.3

1）配方一：葡萄糖20

g，蛋白胨5

g，酵母膏3

g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5

加水至1000

mL，pH

2）配方二：玉米粉20

g，葡萄糖20

g，酵母膏5

g，牛肉膏4

g，磷酸二氫鉀2

g，硫酸鎂1

g，維生素B1

mg，加水至1000

mL，pH

18692023將分裝好的搖瓶放入滅菌鍋內(nèi)，鍋內(nèi)留有一定的空隙。滅菌蒸汽壓力升至0.1

MPa～0.12

mm

（3～5）mm的母種塊迅速轉(zhuǎn)接于待接種搖瓶培養(yǎng)基內(nèi)。將接種后的三角瓶置于搖床上振蕩培養(yǎng)，

MPa、溫度126，維持40

a）配方1：玉米粉20

g，葡萄糖20

g，酵母膏5

g，牛肉膏4

g，磷酸二氫鉀2

g，維生素B1

g，加水至1000

mL，PH

b）配方2：馬鈴薯100

，葡萄糖10

g，磷酸二氫鉀2

g，消泡劑0.3

mL，pH

c）配方3：玉米粉20

g（煮汁），葡萄糖20

g，蛋白胨5

g，磷酸二氫鉀2

g，硫酸鎂1

g，加水至1000

mL，pH

%，加入0.03

%消泡劑，通入空氣攪拌1

min～2

發(fā)酵罐加熱層通入冷水，水位低于排水口20

cm，關(guān)閉進(jìn)、排水閥門加熱。待加熱層蒸汽壓力達(dá)到0.05

MPa時，緩慢打開排氣閥降壓至0

MPa，關(guān)閉排氣閥，再次升壓至0.11

MPa，待發(fā)罐培養(yǎng)層蒸汽壓力達(dá)到0.05

MPa時，緩慢打開排氣閥降壓至0

MPa，關(guān)閉排氣閥，再次升壓至0.11

MPa，同時打開空氣過濾器滅菌，微開排氣閥，維持50

min～60

滅菌結(jié)束，關(guān)閉空氣過濾器滅菌閥與排氣閥，緩慢打開空氣過濾器排水閥降壓至0

入冷水降溫；同時緩慢打開發(fā)酵罐培養(yǎng)層排氣閥降壓，待壓力接近0

MPa時向培養(yǎng)層內(nèi)通入無菌空氣，調(diào)整排氣閥，維持罐壓0.04

接入搖瓶菌種，接種量為2

%～4%。將搖瓶接種管和發(fā)罐接種口用75

%酒精消毒，用95

%酒精的火焰圈套在接種口上，輕微打開呼吸器閥門，使發(fā)酵罐壓力為0

MPa。點(diǎn)燃