65.020CCS

B

1613 DB

13/T

5457—2021馬鈴薯對黃萎病抗性評價技術(shù)規(guī)程 河北省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布庫七七提供下載DB

13/T

5457—2021庫七七提供下載 本文件按照GB/T

1.1—《標準化工作導(dǎo)則第1定起草。本文件由河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本文件起草單位：河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護研究所。本文件主要起草人：鹿秀云、李社增、年冠臻、郭慶港、張曉云、趙衛(wèi)松、蘇振賀、馬平。庫七七提供下載庫七七提供下載庫七七提供下載DB

13/T

5457—2021庫七七提供下載1 范圍Verticillium

wilt本文件適用于馬鈴薯品種和材料抗黃萎病的評價。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用適用于本文件。本文件沒有規(guī)范性引用文件。3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。感病對照品種

susceptible

罹病后黃萎病病情指數(shù)能達40.0以上的品種。病情指數(shù)

index全面考核供試品種發(fā)病率和嚴重程度的綜合指標。病情指數(shù)校正系數(shù)

標準病情指數(shù)（50.0）與同批次評價試驗中感病對照品種病情指數(shù)的比值，記作K。相對病情指數(shù)

relative

disease

index病情指數(shù)與病情指數(shù)校正系數(shù)的乘積，記作RDI。4 儀器設(shè)備養(yǎng)室（使溫度保持在20

28

℃）、不銹鋼鍋、電磁爐、培養(yǎng)皿、試管、剪子、鑷子、三角瓶等。5室內(nèi)評價病原菌的選擇、培養(yǎng)和接種液制備7

d～10

d的新鮮菌絲塊4～5，150

mL/300

25

180

rmin-1條件下恒溫振蕩培養(yǎng)5

d后用2板計數(shù)，并用滅菌水將其濃度調(diào)整為1.0×，作為接種液。感病對照品種選擇選擇對黃萎病表現(xiàn)高度感病的馬鈴薯品種費烏瑞它作感病對照品種。庫七七提供下載將培養(yǎng)好的接種物用攪拌機或鐵锨攪拌均勻至單粒棉籽基本分開狀態(tài)，按照1500

kgha

均勻撒DB

13/T

5457—2021庫七七提供下載將培養(yǎng)好的接種物用攪拌機或鐵锨攪拌均勻至單粒棉籽基本分開狀態(tài)，按照1500

kgha

均勻撒馬鈴薯種薯處理與育苗將供試馬鈴薯品種及感病對照品種的種薯置于25

℃催芽15

d

cm酒

g～50

g1～2個芽眼。25

℃攤開放置4

h

cm重量:育苗基質(zhì)重量=1:1，121

～0.15

MPa，1

h）5

cm～6

cm3塊薯塊，上部覆土厚度為3

cm～4

20

℃～

10

h光照，14

h黑暗。陰天開補光燈，光照過強使用遮陽網(wǎng)）。每個品種播種5盆作為1次重復(fù)，重復(fù)4次。病原菌接種采用人工傷根接種法。待馬鈴薯出苗后15

d，用消毒的壁紙刀將花盆底部切掉，再用壁紙刀沿花盆底部平切傷根，然后放到底部鋪有2

cm滅菌土的同樣新花盆中，置于接種液（2.0

L）中浸泡min，繼續(xù)在原來環(huán)境中培養(yǎng)。設(shè)置清水處理為對照。6 6

田間評價選地人工黃萎病圃應(yīng)建立在馬鈴薯代表性產(chǎn)區(qū)或土壤氣候條件相似、有利于黃萎病發(fā)生的地區(qū)；要求發(fā)病均勻，正常年份感病對照品種的病情指數(shù)達到40.0～60.0；病圃地勢平坦，排灌方便，周圍無房屋、樹木等蔭蔽，有隔離設(shè)施。病原菌培養(yǎng)基質(zhì)的準備選用帶短絨的棉花毛籽作為繁殖病原菌的營養(yǎng)基質(zhì)。首先將棉花毛籽放入容器中，加入自來水（洗滌靈濃度0.1%）將棉籽浸沒，浸泡過夜；次日將棉籽裝入紗袋中并用甩干機甩干，然后裝入菌3.0

kg1

h（

MPa～0.15

用。病原菌的繁殖接種液培養(yǎng)方法同500

mL接種液后扎緊袋口并搖勻，

℃恒溫靜置培養(yǎng)15

d～20

d，即可用于田間接種。人工病圃建立-1于地表，隨即淺層（約20

cm）旋耕，使接種物與土壤混合均勻。感病對照品種選擇選擇對黃萎病表現(xiàn)高度感病的馬鈴薯品種費烏瑞它作感病對照品種。馬鈴薯播種按照當(dāng)?shù)胤N植方式播種馬鈴薯于人工病圃中，每個品種重復(fù)3～4次，每個重復(fù)至少207 病情調(diào)查記載50.010.0評價試驗中所有供試品種的病情嚴重度。病情嚴重度分成五個級別，病級值分別為0，1，2，3和4。各病級癥狀描述如下：0級：健株，葉片無癥狀；1級：病株顯癥葉片數(shù)占總?cè)~片數(shù)的比例≤25%，葉肉變?yōu)榈S色或呈不規(guī)則形的黃色病斑；2級：＜病株顯癥葉片數(shù)占總?cè)~片數(shù)的比例≤，葉部褪綠形成病斑，病斑顏色大部分為黃色或黃褐色，葉片邊緣略有卷枯；3級：＜病株顯癥葉片數(shù)占總?cè)~片數(shù)的比例≤，有少數(shù)葉片凋落；RDI=0.0HR0.010.020.020.035.0RDI35.0提供.kw七庫七下載DB

13/T

5457—2021提供.kw七庫七下載4級：病株顯癥葉片數(shù)占總?cè)~片數(shù)的比例＞75%，多為褐色枯斑，有的病株葉片脫落成光桿，整株枯死。8 結(jié)果計算病情指數(shù)（DI）（計算結(jié)果精確到小數(shù)點后

1

位）DI

=∑（病級值×相應(yīng)株數(shù)）/（最高病級值×總株數(shù)）×100…………（1）相對病情指數(shù)（RDI）感病對照品種病情指數(shù)在40.0～60.0之間可采用相對病情指數(shù)，超出范圍則不宜采用。校正系數(shù)K（計算結(jié)果保留小數(shù)點后3位）：K

=

本批次評價中感病對照品種的病情指數(shù)……（2）相對病情指數(shù)（RDI）（計算結(jié)果保留小數(shù)點后1RDI=K×3）9 抗性評價RDI劃分標準見表1。表

表

1 馬鈴薯品種抗病性類型的劃分標準庫七七提供下載DB

13/T

5457—2021庫七七提供下載

附錄 A（資料性）馬鈴薯黃萎病病原及癥狀A(yù).1 病原菌的分類地位大麗輪枝菌（Verticillium

dahliae

Kleb.）屬真菌界（Fungi），子囊菌門（Ascomycota），SordariomycetesVerticillium種（V.

dahliae

Kleb.A.2培養(yǎng)特性和孢子形態(tài)2.0

μm～4.0

μm菌絲形成微菌核。分生孢子呈橢圓形，單細胞，大小為（

μm～

μm）×（1.7

μm～

μm），由分生孢子梗上的瓶梗末端逐個割裂?？諝飧稍飼r，孢子在瓶梗末端聚集成堆，空氣濕潤時，則形成孢子球。顯微鏡下制片觀察時，孢子即散開，只留下梗端新生出的單個孢子。分生孢子梗常由2～41～7通常有3～5根，瓶梗長度為13.0

μm～18.0

μm，輪層間的距離為30.0

μm～38.0

μm。A.3 癥狀盆栽馬鈴薯苗期黃萎病發(fā)病癥狀：下部葉片先表現(xiàn)癥狀，葉片或葉片主脈間葉肉表現(xiàn)淡黃色不后期葉片全部顯病狀、萎蔫或枯死。葉肉組織變軟，后變褐干枯，不脫落。

載w.kw.co七m提庫七供下DB

13/T

5457—2021載w.kw.co七m提庫七供下

附 錄 B（規(guī)范性）病情調(diào)查表B.1

病情調(diào)查表評價地點：

評價地點：