蘆薈的組織培養(yǎng)生物09本一、立題依據及背景蘆薈,拉丁名Aloe,是百合科多年生物肉質常綠植物,葉子大,長披針形.蘆薈是一種古老而神秘的植物,遠在3000多年前人類就用它治療疾病,我國從唐代就對蘆薈的藥用有記載。近年來,隨著科學技術的發(fā)展,人們對蘆薈的認識越來越深刻。經檢測表明,蘆薈的鮮葉中含有蘆薈西酊、蘆薈堿、蘆薈烏辛、治愈激素、蒽類、有機酸、多糖類、氨基酸、維生素及鈣、磷、鉀、鐵等多種礦物質和微量元素。由于蘆薈的葉中含有豐富的有效物質,因而具有醫(yī)療、保健和美容等多種功能。經功能實驗證實,蘆薈具有較強的抗感染、殺菌能力,并能促進血液循環(huán)和新陳代謝,排除毒素及提高人體抗癌能力,以外,它還具有使皮膚收斂、柔化、保濕、消炎、增白、防皺紋、治療粉刺的功效。因此,蘆薈被人們譽為“萬應良藥”、“人類最偉大的醫(yī)生”,形成世界性的蘆薈保健熱,成為開發(fā)者的開發(fā)熱點。目前,蘆薈廣泛用于化妝品、食品、飲料、醫(yī)藥行業(yè)中。蘆薈目前主要的繁殖方法是分株和扦插,繁殖速度較慢,因而限制了蘆薈業(yè)的發(fā)展。分株和扦插的方法已經不能適應生產發(fā)展的要求,因此用組織培養(yǎng)快速繁殖的技術，可以提高產量，成本低，效益高。二、實驗方案(一)技術路線藥品稱量藥品稱量培養(yǎng)容器清洗培養(yǎng)基配制培養(yǎng)容器清洗培養(yǎng)基配制分裝分裝蘆薈莖尖高壓滅菌蘆薈莖尖高壓滅菌消毒接種消毒接種分化培養(yǎng)生根培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)分化培養(yǎng)生根培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)移植煉苗試管苗移植煉苗試管苗(二)材料、方法與手段1材料1.1樣品來源將準備好的蘆薈幼苗,用自來水沖洗好后,洗凈外表泥土,切除根部大部分葉片,取莖尖部分,先用75%乙醇浸泡60S,然后再用0.1%升汞消毒15min,最后用無菌水洗4次—5次。1.2培養(yǎng)基愈傷組織誘導培養(yǎng)基（一）MS+(2.5mg/1)6-BA+(0.15mg/1)NAA,PH6.2;培養(yǎng)基（二）MS+BA4.5mg/L+IBA0.2mg/L上分化培養(yǎng)基（一）:MS+(2.0mg/1)6-BA+(0.10mg/1)NAA,PH7.0;培養(yǎng)基（二）;MS+BA4mg/L+NAA0.5mg/L生根培養(yǎng)基（一）:MS+(0.3-0.5mg/1)6-BA+(0.2mg/1)IBA培養(yǎng)基（二）：MS+BA4.5mg/L+NAA0.2mg/L+0.25%活性炭上2.方法與手段2.1外植體獲得將準備好的蘆薈幼苗,用自來水沖洗好后,洗凈外表泥土,切除根部大部分葉片,取莖尖部分,先用75%乙醇浸泡60S,然后再用0.1%升汞消毒15min,最后用無菌水洗4次—5次。2.2愈傷組織在無菌條件下,將滅菌好的蘆薈的莖尖接種到愈傷組織誘導培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件:溫度(27±1)℃,每天光照10hr—12hr后,光強2001x,約15天后,試管中的外植體就可膨大形成愈傷組織周后,可將愈傷組織轉管進行繼代培養(yǎng)或分化培養(yǎng)。兩種各培養(yǎng)基接15瓶，每瓶接3塊組織。2.3分化培養(yǎng)在無菌條件下,將愈傷組織取出,用無菌水沖凈,切成小塊,接種到分化培養(yǎng)基中,培養(yǎng)條件同愈傷組織培養(yǎng),約30天后,愈傷組織可分化為小芽,并繼續(xù)長出小葉片。兩種培養(yǎng)基各接15瓶，每瓶接3塊組織2.4增殖生根培養(yǎng)待葉片長至2cm—3cm左右時,將幼苗取出,在無菌條件下,接種到生根培養(yǎng)基中,約15天后,即可生根。兩種培養(yǎng)基各接15瓶，每瓶接3株。四、研究條件植物組織培養(yǎng)實驗室五、研究進度安排2011.10.31----2011.11.14愈傷組織的獲得2011.11.14----2011.12.14得到芽以及小葉2011.12.14----2012.01.01得到有根的小苗六、預期結果1.愈傷組織不定芽誘導愈傷組織培養(yǎng)基1愈傷組織培養(yǎng)基23天6天9天12天15天2.分化培養(yǎng)分化培養(yǎng)基1分化培養(yǎng)基2接種數(shù)分化數(shù)分化百分比小苗情況原因分析3.增值生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)基1生根培養(yǎng)基2有根小苗數(shù)生根率根系情況分析原因[參考文獻][1]松男等.蘆薈組織培養(yǎng)快繁技術研究[J