孕婦艾滋病、梅毒和乙肝檢測(cè)技術(shù)

前言

對(duì)于我們醫(yī)務(wù)工作者在醫(yī)療活動(dòng)中針對(duì)符合一定條件的就診者提供艾滋病和梅毒、乙肝的檢測(cè)，我們稱之為“篩查”。篩查是預(yù)防艾滋病和梅毒、乙肝的一項(xiàng)重要策略，為世界衛(wèi)生組織和我國(guó)所倡導(dǎo)。它的目的是早期發(fā)現(xiàn)感染者，及早得到診斷和治療，達(dá)到治愈感染者、消除傳染源、阻斷進(jìn)一步傳染的目的。同時(shí)，這種篩查也是“有的放矢”的，它是針對(duì)特定的人群、特定的情況而進(jìn)行的，并非亂檢查、亂收費(fèi)。傳染病傳染過(guò)程：病原體侵入病原體與機(jī)體相互作用與斗爭(zhēng)結(jié)局隱性感染病原攜帶顯性感染

死亡宿主病原體被清除3傳染病傳播的基本條件

三個(gè)基本環(huán)節(jié)：傳染源易感人群傳播途徑45傳染病的流行過(guò)程

傳染源

自然和社會(huì)因素傳播途徑易感人群6潛伏期傳染期病原侵入排出病原體出現(xiàn)癥狀時(shí)間過(guò)程潛伏期停止排出病原體（痊愈、死亡等）傳染期7

傳染病種類繁多，為了保障公眾的健康與安全，國(guó)家以法律的形式將某些傳染病列為法定傳染病以加強(qiáng)管理。

2004年新頒布的《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》規(guī)定了甲類、乙類和丙類共37種法定傳染病。其中：

1、甲類傳染病2種：鼠疫、霍亂

法定傳染病8

乙類傳染病25種：傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱、狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、肺結(jié)核、傷寒和副傷寒、流行性腦脊髓膜炎、百日咳、白喉、新生兒破傷風(fēng)、猩紅熱、布魯氏菌病、淋病、梅毒、鉤端螺旋體病、血吸蟲(chóng)病、瘧疾。(其中傳染性非典型肺炎、炭疽中的肺炭疽和人感染高致病性禽流感按甲類管理。)

9艾滋病和梅毒、乙肝離我們遠(yuǎn)嗎？

艾滋病和梅毒、乙肝是一種危害性極大的傳染病，尤其是近年來(lái),我國(guó)艾滋病和梅毒、乙肝感染者和病人呈逐年上升趨勢(shì)，從2005年的0.4%上升到2017年的21.45%；并從高危人群向一般人群擴(kuò)散,通過(guò)母嬰傳播途徑感染的比例也在增加。若不采取預(yù)防干預(yù)措施，感染了艾滋病和梅毒、乙肝病毒的母親，生下染有艾滋病和梅毒、乙肝病毒嬰兒的比例很大,嚴(yán)重威脅著廣大婦女和兒童的健康。因此,預(yù)防艾滋病和梅毒、乙肝母嬰傳播是保護(hù)兒童免遭艾滋病和梅毒、乙肝侵害、減少兒童感染艾滋病和梅毒、乙肝的重要措施，這就需要我們提高警惕，認(rèn)識(shí)到艾滋病感染的危險(xiǎn)性，而接受專業(yè)人員的咨詢和篩查是有效的解決途徑。艾滋病、梅毒、乙肝--概況

母嬰傳播途徑1、艾滋?。杭s15～35%

HIV陽(yáng)性孕婦會(huì)發(fā)生母嬰傳播。90%以上兒童HIV感染者是由母親垂直傳播而感染。2、梅毒：流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或馬鞍鼻、先天性耳聾等。3、乙肝：在我國(guó)，人群中40-50%是由母嬰傳播積累而成。

介紹相關(guān)檢測(cè)技術(shù)一.艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)HIV抗體檢測(cè)核酸檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)二.梅毒檢測(cè)技術(shù)顯微鏡檢查法血清學(xué)檢查法三.乙肝檢測(cè)技術(shù)HBV免疫標(biāo)志物檢測(cè)HBV-DNA

檢測(cè)時(shí)要注意什么？

作為受檢者，應(yīng)該注意的是：一是要向醫(yī)生提供較為詳盡的病史，特別是危險(xiǎn)的性行為，不要因?yàn)椴缓靡馑级[瞞。只有這樣，醫(yī)生才能正確判斷感染的危險(xiǎn)性，有助于分析檢測(cè)結(jié)果并做出診斷和處理的決斷。二是注意檢測(cè)的“窗口期”問(wèn)題，也就是從病原體進(jìn)入人體到血液中產(chǎn)生足夠量的、能用檢測(cè)方法查出抗體的這段時(shí)期。對(duì)于艾滋病“窗口期”，隨著新一代、敏感的艾滋病抗體檢測(cè)手段出現(xiàn)后，艾滋病窗口期已經(jīng)縮短到最為保守的艾滋病抗體峰值出現(xiàn)的第6周。就目前廣泛采用的第三、四代雙原夾心法和酶聯(lián)法以及化學(xué)發(fā)光法等檢測(cè)手段而言，艾滋病的窗口期可以縮短到14～21天。而梅毒雖無(wú)“窗口期”說(shuō)法，但從感染到可檢測(cè)到抗體也需要3～4周甚至更長(zhǎng)時(shí)間。因此，在有高危的性行為后接受檢測(cè)，結(jié)果雖為陰性但未渡過(guò)“窗口期”，仍不可掉以輕心，需要繼續(xù)隨訪直到確認(rèn)已渡過(guò)“窗口期”。三是結(jié)果的解釋和分析要聽(tīng)從醫(yī)生的專業(yè)建議。艾滋病、梅毒檢測(cè)結(jié)果的意義隨受檢者不同的情況而有差別。因此受檢者應(yīng)該聽(tīng)從醫(yī)生對(duì)結(jié)果的解釋和建議，不可盲目悲觀或盲目樂(lè)觀。乙肝，丙肝，梅毒，艾滋檢測(cè)的必要性

艾滋病、梅毒、乙肝實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)艾滋病抗體檢測(cè)及

樣品處理實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理生物安全質(zhì)量控制梅毒乙肝

檢測(cè)要點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)一、艾滋病檢測(cè)技術(shù)HIV抗體檢測(cè)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）核酸檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)快速檢測(cè)（RT）（建議配備合格的快速檢測(cè)試劑，灰區(qū)。）HIV抗體檢測(cè)試劑有國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)文號(hào)試劑在有效期內(nèi)酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格證件采購(gòu)試劑選擇敏感性和特異性高的試劑HIV抗體篩查樣品血清/血漿/全血濾紙干血斑唾液尿液一般篩查方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)：采用發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果?？焖贆z測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)

(1)明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)(2)免疫滲濾試驗(yàn)

(3)免疫層析試驗(yàn)(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）HIV抗體檢測(cè)試劑：檢測(cè)HIV-1/2抗體HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑：可同時(shí)檢測(cè)血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果四代艾滋病酶聯(lián)免疫試劑比較solidphasespecificdetectionofconjugate第一代病毒裂解液HIV-1IgG抗體HIV-1-IgG抗體第二代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2IgG抗體HIV-1/-2IgG抗體第三代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-OIgM/IgG抗體HIV-1/-2/-O病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-O第四代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-Oanti-p24AbIgM/IgG抗體HIV-1/-2/-Op24抗原病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-Oanti-p24抗體ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

ELISAHIV抗原包被平板病人抗體酶顯色劑+ve-ve陰性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照陰性陽(yáng)性質(zhì)控酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于記錄和保存用途：流行病學(xué)監(jiān)測(cè)及臨床大量標(biāo)本的檢測(cè)(2)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)采用發(fā)光或熒光底物既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體酶或熒光標(biāo)記的HIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物用發(fā)光儀或熒光儀測(cè)定結(jié)果全血樣品加50ul樣品于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果（3）快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn):試驗(yàn)簡(jiǎn)便快速，適用于應(yīng)急檢測(cè)、門(mén)診急診檢測(cè)。不需專門(mén)設(shè)備和人員培訓(xùn),一般可在10～30分鐘內(nèi)得出結(jié)果。缺點(diǎn):肉眼判斷較主觀、價(jià)格較貴、結(jié)果不易保存。樣品初篩試驗(yàn)一陰一陽(yáng)均陽(yáng)性反應(yīng)報(bào)告陰性確證試驗(yàn)復(fù)檢試驗(yàn)報(bào)告陰性均陰性反應(yīng)陽(yáng)性反應(yīng)原有試劑＋另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑選用篩查試劑陰性反應(yīng)HIV抗體篩查檢測(cè)流程圖HIV抗體確證試驗(yàn)確證試驗(yàn)的試劑：必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。確證樣品：可采用血清、血漿、濾紙干血斑確證試驗(yàn)方法：免疫印跡試驗(yàn)(WB)、條帶免疫試驗(yàn)(LIATEKHIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)及免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。國(guó)內(nèi)常用的確證試驗(yàn)方法是WB。HIV抗體確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果a強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1和HIV-2）b弱陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1）c陰性對(duì)照d典型的HIV-2血清陽(yáng)性反應(yīng)abcdgp160gp120p66p55p51gp41p39p31P24p17

血清對(duì)照HIV-2特異帶初篩檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本兩種篩查試劑報(bào)告陰性陰性反應(yīng)一陰一陽(yáng)陽(yáng)性反應(yīng)確證試劑復(fù)檢試驗(yàn)根據(jù)具體情況進(jìn)一步檢測(cè)HIV-2報(bào)告陰性出現(xiàn)HIV-2指示條帶陰性反應(yīng)不確定反應(yīng)報(bào)告HIV-1陽(yáng)性HIV-1陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足HIV抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)性，不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。HIV抗體確證檢測(cè)流程圖實(shí)驗(yàn)室需備有：1～2種HIV-1/2抗體ELISA（化學(xué)發(fā)光）試劑2種HIV-1/2抗體快速試劑百度網(wǎng)每年進(jìn)行體外診斷試劑評(píng)估如：“HIV抗體試劑臨床評(píng)估”HIV抗體母親HIV抗體經(jīng)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒，出生時(shí)新生兒和嬰兒早期抗體陽(yáng)性，不一定是感染出生時(shí)母親的抗體，80~90%在生后9~12個(gè)月消失，出生后18個(gè)月基本上全部消失18個(gè)月后兒童HIV抗體仍然陽(yáng)性，視為自身感染產(chǎn)生的抗體18個(gè)月以下嬰幼兒的HIV診斷嬰幼兒HIV感染的抗體檢測(cè)適用于：HIV感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；母親HIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIV相關(guān)臨床表現(xiàn)，臨床懷疑HIV感染的兒童。嬰兒12個(gè)月時(shí)進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)

陰性排除感染，納入正常兒童保健；

陽(yáng)性者繼續(xù)追蹤隨訪，至18個(gè)月再次進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)，結(jié)果陰性排除感染。艾滋病病毒感染產(chǎn)婦所生兒童陽(yáng)陰用另一種不同原理或不同廠家生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測(cè)12個(gè)月進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)確證試驗(yàn)18個(gè)月時(shí)再進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)報(bào)告HIV抗體檢測(cè)結(jié)果陰性艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體檢測(cè)流程陽(yáng)性陰性陰性陽(yáng)性用另一種不同原理或不同廠家生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測(cè)陰性陰性陽(yáng)性報(bào)告HIV抗體檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性提供咨詢，繼續(xù)隨訪，4周后再次進(jìn)行確證試驗(yàn)不確定陽(yáng)性18個(gè)月以下嬰幼兒的HIV診斷核酸檢測(cè)HIV前病毒DNA（HIVDNA）檢測(cè)已整合到外周血液中血細(xì)胞基因組上的HIVDNA基于PCR技術(shù)高特異度(98%)和高靈敏度(>99%)18個(gè)月以下嬰幼兒的HIV診斷HIV病毒載量（HIVRNA）用來(lái)監(jiān)測(cè)已知的HIV感染病人的病毒載量試驗(yàn)；真陽(yáng)性的結(jié)果通常>100,000拷貝/毫升,而假陽(yáng)性結(jié)果<1,000拷貝/毫升RT-PCR、NASBA、CDNA、熒光定量PCR嬰幼兒HIV感染的核酸檢測(cè)可檢測(cè)HIVRNA也可檢測(cè)HIVDNA首選檢測(cè)HIVDNAHIVDNA檢測(cè)不受母親圍產(chǎn)期抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療和人乳汁中抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物以及嬰幼兒預(yù)防性抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的干擾考慮母親血液污染因素，不推薦使用臍帶血進(jìn)行HIV核酸檢測(cè)

。嬰兒的早期診斷

HIV感染母親所生小于18個(gè)月齡的嬰兒，不同時(shí)間的兩次HIV核酸檢測(cè)均為陽(yáng)性即可作出診斷。18個(gè)月齡以上兒童診斷與成人相同：有急性HIV感染綜合癥或流行病學(xué)史，且不同時(shí)間的兩次HIV核酸檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，即可診斷。

HIV感染產(chǎn)婦所生嬰兒嬰兒滿3個(gè)月，再次采集血標(biāo)本，送檢盡快采集第二份血標(biāo)本，送檢出生后6周采集第一份血標(biāo)本（可制備成濾紙片干血斑（DBS），或EDTA抗凝全血），送檢繼續(xù)隨訪報(bào)告陽(yáng)性產(chǎn)婦所生兒童HIV感染早期診斷檢測(cè)流程呈陰性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)盡快再次采集血樣，送檢報(bào)告陰性呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)嬰幼兒HIV感染的核酸檢測(cè)需要注意：不同時(shí)間“嬰兒HIV感染早期診斷”檢測(cè)均呈陰性反應(yīng)的喂哺母乳的兒童，應(yīng)在完全停止喂哺母乳后的6周和3個(gè)月（若6周時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性可盡快）再次采血進(jìn)行核酸定性檢測(cè)。兒童滿18個(gè)月后則可直接進(jìn)行抗體檢測(cè)。嬰幼兒HIV感染的核酸檢測(cè)方法

HIV-DNA1）RocheAmplicor試劑盒2）IN-HOUSE（國(guó)內(nèi)開(kāi)展，2009年檢測(cè)技術(shù)規(guī)范）AmplicorHIV-1DNA簡(jiǎn)介樣本：濾紙片干血斑、EDTA抗凝全血方法學(xué)：PCR-ELISA結(jié)果類型：定性靶物質(zhì)：感染宿主細(xì)胞中的pro-viralHIV-1DNA濾紙片干血斑將全血滴在特定的濾紙片上制備。它主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)中新生兒先天性缺陷疾病的早期篩查。如：苯丙酮尿癥，先天性甲狀腺機(jī)能低下，維生素缺乏和一些感染性疾病的檢測(cè)。

濾紙片干血斑用于嬰兒HIV診斷樣本量非常小，(20lto200l)特別適宜采集嬰兒樣本。容易收集: 指尖血、后跟血。能提取全血，血漿、血清。短期運(yùn)輸可在常溫下長(zhǎng)期可貯存在–20C樣本可在常溫下運(yùn)輸:不需要干冰DBS可作為一種無(wú)感染性材料運(yùn)輸（在美國(guó)）濾紙片的選擇

Whatman903濾紙片（可用于HIV抗體、HIV前病毒DNA和HIVRNA檢測(cè)）FTA標(biāo)準(zhǔn)卡濾紙片（可用于HIV前病毒DNA檢測(cè)）采集樣本所需要的材料血樣本采集卡片(濾紙片)；可密封的塑料袋；濕度指示卡；干燥劑（1-2g/袋）；怎樣采集末梢血DBS應(yīng)用通用的安全防護(hù)措施；清晰準(zhǔn)確地在卡片上標(biāo)記識(shí)別碼；完成針刺指尖程序；均一地使每個(gè)印圈飽和地吸附血液；

兩個(gè)充分吸附血液的印圈比五個(gè)不完全吸附的印圈要好怎樣采集抗凝靜脈血DBS靜脈血充分與EDTA混合；最好采集后立即制備干血斑；血漿與血細(xì)胞分層的全血在制備干血斑前，應(yīng)輕柔地上下顛倒采血管（避免血細(xì)胞破裂），使血液混勻后制備；用移液槍加代濾芯槍頭移取75-80ul血液；槍頭對(duì)準(zhǔn)印圈的中心緩慢將血液滴于濾紙上；避免有氣泡；怎樣干燥DBS避免觸摸或涂抹血斑；室溫空氣中水平干燥（至少4個(gè)小時(shí)）；避免陽(yáng)光直曬；在干燥過(guò)程中不允許加熱，疊加或?qū)BS接觸其他表面；在包裝前充分干燥DBS濾紙片干血斑的包裝與運(yùn)輸將完全干燥的濾紙片干血斑樣本用塑料袋進(jìn)行獨(dú)立包裝，或者用秤量紙隔開(kāi)，以避免樣本之間的污染。已獨(dú)立包裝好的樣本一起放入密封塑料袋中，加入幾包干燥劑,加入濕度指示卡。將包裝好的濾紙片干血斑，連同相應(yīng)的文件（如采樣/送樣單等）放入大信封中。密封后可郵寄運(yùn)輸。放入密封袋加入干燥劑加入濕度指示卡標(biāo)記袋中內(nèi)容物核酸檢測(cè)2次檢測(cè)陽(yáng)性可早期診斷HIV感染，如果不具備條件，也可用HIV病毒載量法來(lái)代替，2次檢測(cè)陽(yáng)性也可診斷HIV感染，18個(gè)月齡以后再做抗體檢測(cè)確認(rèn)。

HIV核酸定量檢測(cè)

通過(guò)SFDA審批的試劑盒、方法

NASBAEasyQAmplicorTaqmanbDNA340440M2000PGCD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)廣泛應(yīng)用于HIV感染者的臨床管理中，協(xié)助判斷感染者的預(yù)后、指導(dǎo)實(shí)施抗病毒治療和療效觀察以及藥物預(yù)防機(jī)會(huì)性感染等方面。CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)對(duì)于免疫功能相對(duì)較好，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)>350/mm3的艾滋病感染孕產(chǎn)婦，采用預(yù)防性抗病毒用藥方案；對(duì)于CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)≤350/mm3的艾滋病感染孕產(chǎn)婦，采用治療性抗病毒用藥方案。常規(guī)CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的方法和程序

流式細(xì)胞儀檢測(cè)方法雙平臺(tái)方法單平臺(tái)方法樣品：EDTA、枸櫞酸（ACD）或肝素抗凝全血運(yùn)送條件：室溫（18～25℃）保存和運(yùn)輸樣品避免極端溫度（結(jié)冰或大于37℃）高溫季節(jié)，需用隔熱容器盛裝樣品，并將其置于有冰袋和吸熱物質(zhì)的容器中。常規(guī)CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的方法和程序48小時(shí)內(nèi)染色，染色后6小時(shí)內(nèi)分析；如采血后24小時(shí)內(nèi)染色，可在染色后24小時(shí)內(nèi)分析；利用CD45單克隆抗體設(shè)淋巴細(xì)胞門(mén)，可檢測(cè)放置72小時(shí)的樣品；在血球分析儀生產(chǎn)商允許的樣品采集時(shí)間范圍內(nèi)檢測(cè)。FACSCalibur流式細(xì)胞儀二、梅毒檢測(cè)技術(shù)顯微鏡檢查法血清學(xué)檢查法梅毒特異性抗原血清學(xué)檢測(cè)梅毒非特異性抗原血清學(xué)檢測(cè)各期梅毒的取材部位和檢查方法臨床表現(xiàn)取材部位檢查方法一期梅毒潰瘍、淋巴結(jié)暗視野檢查血液血清學(xué)檢查二期梅毒皮損、淋巴結(jié)暗視野檢查血液血清學(xué)檢查三期梅毒血液、腦脊液血清學(xué)檢查隱性梅毒血液血清學(xué)檢查胎傳梅毒皮損、胎盤(pán)暗視野檢查血液血清學(xué)檢查（一)、顯微鏡檢查法1.暗視野顯微鏡檢查2.直接免疫熒光試驗(yàn)（DFA）3.渡銀染色檢查1.暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡下，典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)規(guī)律，運(yùn)動(dòng)性較強(qiáng)，其運(yùn)動(dòng)方式包括①旋轉(zhuǎn)式，圍繞其長(zhǎng)軸旋轉(zhuǎn)；②蛇行式,全身彎曲如蛇行；③伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)。觀察其運(yùn)動(dòng)形式有助于與其他螺旋體相鑒別。未檢出螺旋體不能排除梅毒的診斷，陰性結(jié)果可能說(shuō)明：①螺旋體數(shù)量不足(單次暗視野顯微鏡檢查陽(yáng)性率小于50%)。②患者已接受抗生素或殺滅梅毒螺旋體的藥物治療。③損害接近自然消退。④損害不是梅毒。2.直接免疫熒光試驗(yàn)（DFA)在熒光顯微鏡下可見(jiàn)到發(fā)蘋(píng)果綠色的梅毒螺旋體。臨床意義與暗視野顯微鏡檢測(cè)相同。DFA的特異性及敏感性均大于暗視野顯微鏡檢測(cè)。3.梅毒螺旋體渡銀染色檢查梅毒螺旋體具有親銀性，顯微鏡下可見(jiàn)到染成棕色的梅毒螺旋體。臨床意義基本同暗視野顯微鏡檢查法。(二)、血清學(xué)檢查法血清學(xué)檢查是輔助診斷梅毒的重要手段。當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4～10周左右，血清中可產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素（主要是IgM、IgG）和抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體（主要是IgM、IgG）。這些抗體均可用免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法1.非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)1.1性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VenerealDiseaseResearchLaboratorytest，VDRL）1.2快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（Rapidplasmareagincirclecardtest，RPR）1.3甲苯胺紅試驗(yàn)（Toluidineredunheatedserumtest，TRUST）方法簡(jiǎn)便、快速，敏感性和特異性較好。對(duì)一期梅毒的敏感性為74％～87％，二期梅毒達(dá)100％，三期梅毒34％～94％。特異性96％～99％。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)臨床意義適用于各期梅毒的診斷。早期梅毒經(jīng)治療后血清滴度可下降或轉(zhuǎn)陰，故可用于療效觀察、判愈、判定復(fù)發(fā)或再感染。也適用于人群的篩查、產(chǎn)前檢查及健康體檢等。VDRL試驗(yàn)適用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查,特異性高，但敏感性低?？稍谀承﹤魅静〖澳z原病時(shí)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，因此對(duì)陽(yáng)性反應(yīng)應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行鑒別，或做梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)以進(jìn)一步證實(shí)之。2.梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

采用梅毒螺旋體作抗原，為特異性抗原，檢測(cè)血清中抗梅毒螺旋體IgG或IgM抗體。敏感性和特異性均較高。一期梅毒的敏感性為70％～100％，二期梅毒達(dá)100％，三期梅毒95％～98％，特異性94％～100％。梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）原理

TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見(jiàn)的凝集反應(yīng)。明膠顆粒為玫瑰紅色，便于肉眼觀察結(jié)果。梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸